【国家标准(GB)】 化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定

中华人民共和国国家标准
化妆品微生物标准检验方法
细菌总数测定
Standard methods of microbiologicalexamination for cosmetics
Standard plate count
UDC 668. 58 : 576
.85.07
GB7918.2-87
细菌总数系指1g或1ml化妆品中所含的活菌数量。测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。
本标准采用标准平板计数法。
1方法提要
化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理特性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、PH值、需氧性质等均有所不同。在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37℃培养48h）生长的一群嗜中温的需氧及兼性厌氧的细菌总数。2培养基和试剂
2.1生理盐水：见GB7918.1—87《化妆品微生物标准检验方法总则》。
2.2卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基成分：蛋白陈
牛肉膏
氯化钠
卵磷脂
吐温80
蒸馏水
1000ml
制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分（除琼脂外）加到其余的蒸馏水中，溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温80，混匀，调pH值为7.1~~7.4，加入琼脂，121℃（151b）20 min高压灭菌，储存于冷暗处备用。3仪器
3.1锥形烧瓶。
3.2量筒。
3.3pH计或精密 pH试纸。
3.4高压消毒锅。
中华人民共和国卫生部1987-05-28批准1987-10-01实施
3.5试管。
3.6灭菌平血：直径9cm。
3.7灭菌刻度吸管：10ml、2ml、1ml。3.8酒精灯。
3.9恒温培养箱。
3.10放大镜。
4操作步骤Www.bzxZ.net
GB7918.2—87
4.1用灭菌吸管吸取1：10稀释的检样2ml,分别注入到两个灭菌平血内，每血1ml。另取1ml注入到9ml灭菌生理盐水试管中（注意勿使吸管接触液面），更换一支吸管，并充分混匀，使成1：100稀释液。吸取2ml，分别注入到两个灭菌平血内，每血1ml。如样品含菌量高，还可再稀释成1；1000，110000，等，每种稀释度应换1支吸管。4.2将熔化并冷至45~50℃的卵磷脂、吐温80、营养琼脂培养基倾注平Ⅲ内，每Ⅲ约15ml，另倾注一个不加样品的灭菌空平耻，作空白对照。随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平Ⅲ，置37℃培养箱内培养48h。5菌落计数方法
先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落数后。求出同一稀释度各平血生长的平均菌落数。若平血中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平血不宜计数。若片状菌落不到平血中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平血菌落计数后乘2，以代表全耻菌落数。6菌落计数及报告方法
6.1首先选取平均菌落数在30～300之间的平血，作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平血菌落数乘其稀释倍数(见表中例1)。6.2若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～~300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数（见表中例2及例3）。6.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例4)。
6.4若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例5）。
6.5若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例6）。6.6若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10个。6.7菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示（见下表报告方式栏）。在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。138
不可计
不可计
附加说明：
不同稀释度的平
均菌落数
GB7918.2--87
细菌计数结果及报告方法
两稀释
度菌数
本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。菌落总数
个/g或个/ml
513000
本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。本标准主要起草人周淑玉，
本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。报告方式
个/g或个/ml
16000 或1.6× 10*
38000或3.8×10
27000或2.7×10
510000或5.1× 10g
270或2.7× 10z
31000 或 3. 1 × 101
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