【商检行业标准(SN)】 衣原体感染检测方法　补体结合试验

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1161—2002

衣原体感染检测方法  补体结合试验

Protocol of complement fixation--Test for chlamydia infection

2002-11-25 发布 2003-05-01 实施

中  华  人  民  共  和  国
国家质量监督检验检疫总局发布

前 言

本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E均为规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、湖北省农业科学院畜牧兽医研究所。

本标准主要起草人：徐承平、黄晟、刘泽文、陈平、段正赢、颜小平、练建军、杨宜生。

衣原体感染检测方法 补体结合试验

1 范围

本标准规定的补体结合试验(CF)包括直接补体结合试验(Direct Complement Fixation Test, DCF)和间接补体结合试验(Indirect Complement Fixation Test, ICF)。

DCF适用于猪以外的哺乳动物和鸡、鸭（二年龄以上老种除外）、火鸡衣原体病的检疫和诊断。ICF适用于其他禽鸟和猪衣原体病的检疫和诊断。

2 材料准备

1. 2.1 器材：12 mm × 37 mm试管、试管架、水浴箱、U型微量反应板(8×12孔)。
2. 2.2 补体：由官方认可单位供应，按说明书使用和保存。试验前须对补体进行效价滴定，滴定方法见附录A。
3. 2.3 溶血素：由官方认可单位供应。试验前须对溶血素进行效价滴定，以后每隔2个～3个月测定效价一次。滴定方法见附录B。
4. 2.4 1%绵羊红细胞悬液，制备方法见附录C。
5. 2.5 敏化红细胞：制备及使用方祛见附录A。
6. 2.6 被检血清：按常规方法采血，分离血清，要求不含血、无腐败。在血清中加入0.01%硫柳汞或0.1%叠氮钠防腐，试验前需灭能。不同动物血清灭能的温度和时间见附录D。
7. 2.7 抗原和标准阳性血清、指示血清、阴性血清：由官方认可单位供应，按说明书使用。抗原和阳性血清效价滴定的方法见附录E。

3 操作方法

3.1 直接补体结合试验

3.1.1 试管法：按表1的顺序操作。试验要同时设抗补体对照、阳性血清对照、阴性血清对照、抗原对照、溶血素对照和生理盐水对照。