【团体标准】 灵芝孢子油中麦角甾醇的含量测定 高效液相色谱法

ICS 67.050 X 04 团体标准 T/SATA 0001—2017 灵芝孢子油中麦角留醇的含量测定 高效液相色谱法 Determination of ergosterol in Ganoderma lucidum spore oil - High performance liquid chromatography 2017-07-25发布 2017-08-25实施 深圳市分析测试协会 发布 目次 前言 1 范围 2 规范性引用文件 3 原理 4 试剂与材料 5 仪器和设备 6 分析步骤 7 分析结果的表述 8 精密度 9 其他 附录A 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由深圳市分析测试协会归口。 本标准主要起草单位：深圳市计量质量检测研究院、惠州市食品药品检验所。 本标准主要起草人：张协光、黄秀丽、兰全学、王晓琴、肖伟敏、赖政炀、刘文丽、朱文娟、朱丽、彭祖茂、杨国武。 本标准为首次发布。 1 范围 本标准规定了高效液相色谱法测定灵芝孢子油中麦角留醇的含量。 本标准适用于灵芝孢子油及其制品中麦角留醇含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样中麦角留醇经三氯甲烷/甲醇提取，反相液相色谱-紫外检测器测定，以保留时间进行定性，外标法定量。 4 试剂与材料 4.1 试剂 4.1.1 甲醇（CH₃OH）：色谱纯。 4.1.2 三氯甲烷（CHCl₃）：分析纯。 4.1.3 乙醇（CH₃CH₂OH）：色谱纯。 4.2 试剂配制 4.2.1 三氯甲烷/甲醇（1:1, v/v）：将100 mL三氯甲烷与100 mL甲醇混合，摇匀。临用前配制。 4.3 标准品 麦角留醇标准品：麦角留醇（C₂₈H₄₄O），CAS号：57-87-4，纯度≥98.0%。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 麦角留醇标准储备液（1 mg/mL）：准确称取0.01 g麦角留醇标准品，用乙醇溶解，超声5 min，定容至10 mL，此溶液每毫升相当于含1 mg麦角留醇。置于0℃~4℃冰箱中，保存期为三个月。 4.4.2 麦角留醇标准中间液（100 μg/mL）：准确吸取5.00 mL标准储备液（4.4.1），用乙醇稀释并定容至50 mL。此溶液中麦角留醇的浓度为100 μg/mL。临用前配制。 4.4.3 麦角留醇标准工作液：吸取麦角留醇标准中间液（4.4.2）0.00 mL、0.500 mL、2.50 mL、5.00 mL、10.00 mL、25.00 mL，用乙醇稀释并定容至50 mL。该标准系列浓度分别为0.00 μg/mL、1.00 μg/mL、5.00 μg/mL、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL、50.0 μg/mL。临用前配制。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：配置紫外检测器。 5.2 分析天平：感量0.0001 g。 5.3 旋涡混合器。 5.4 注射器：一次性，10 mL。 5.5 微孔过滤膜：0.45 μm，有机相。 6 分析步骤 6.1 试样溶液的制备 取试样约0.1 g，准确至0.1 mg，置于25 mL容量瓶中，用三氯甲烷/甲醇（4.2.1）定容至刻度，旋涡振荡1 min，摇匀，用0.45 μm有机微孔滤膜过滤，收集滤液，供色谱测定。 6.2 仪器参考条件 6.2.1 色谱柱：ODS-2 HYPERSIL色谱柱（粒径5 μm，250 mm×4.6 mm）或相当者。 6.2.2 流动相：100%甲醇。 6.2.3 流速：1.0 mL/min。 6.2.4 检测波长：282 nm。 6.2.5 进样量：10 μL。 6.3 标准曲线的制作 将标准系列工作液注入高效液相色谱仪中，测定相应的麦角留醇峰面积，以标准工作液的浓度（μg/mL）为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。 6.4 试样溶液的测定 按照6.2的色谱条件，将试样溶液注入高效液相色谱仪中，得到麦角留醇的峰面积，根据标准曲线计算得到待测液中麦角留醇的浓度。 7 分析结果的表述 注：原文中第7、8、9章及附录A的具体内容在OCR输入中缺失或未完整显示，仅保留了目录结构。