【国家标准(GB)】 食品中还原糖的测定

ICS67.040
中华人民共和国国家标准
GR/T 5009.7—2008
代替 GB/T 5009.7.-2003
食品中还原糖的测定
Determination of reducing sugar in foods2008-11-21发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
2009-03-01实施
本标准代替GB/T5009.72003《食品中还原糖的测定》。本标准与GB/T5009.7-2003相比主要修改如下：-增加了检出限；
一-对食品样品的分类重新界定；-增加了第一法“直接滴定法”的反定公式，—-明确计算结果的有效数字。
本标由中华人民共和国生部提出并归口。GB/T5009.7—2008
本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、北京市疾病预防控制中心。本标准主要起草人：杨大进、常迪、赵馨、吴国华、薛颗，本标摊所代替标准的历秋版本发布情况为：-GB/T 5009.7—1985,GB/T 5009.72003。http:/
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1范围
食品中还原糖的测定
本标准规定了食品中还原糖含量的测定力法。本标雅适用于食品中还原糖含鼠的测定：GB/T 5009.7—2008
当称样量为5.0g时，真接滴定法的检出限为0.25g/100g，高锰酸钾滴定法的检出限为0.5%/100g第一法
直接滴定法
2原理
试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标雅溶液标定），根据样品液消耗体积计算还原糖含。3试剂
除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯。盐酸(HCI)。
硫酸铜(CuSO,·5H,0)。
3.3 亚甲蓝(Cl.Hl:CINS3H,O):指示剂。3.4
酒石酸钾钠[CH,O.KNa·4H.O]。3.5
氢氧化钠(NaOH)。
乙酸锌[Zn(CH;CO0O)。· 2H,O].冰乙酸(C,H,Q,)。
亚铁氰化钾_K,Fe(CN)。·3IIzO]3.9
葡萄糖（CH2O.）。
果糖(C,HO.)。
乳糖(CHO.）。
薰糖(CH2O1).
碱性酒不酸铜甲液称取 15 g硫酸铜(CuSO。5HzO)及 0.05 g亚甲监，溶于水中并稀释至1 000 tml.
3.14碱性酒石酸铜Z液：称坡50 g酒酸钾钠、75g氢氧化钠，溶于水中,再加人4 g亚铁氰化钾,完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。3.15乙酸锌溶液(219 g/L):称取 21.9 乙酸锌,加 3 ml.冰乙酸,加水溶解并稀释至100 mL。3.16亚铁氨化钾溶液(106g/L）:称取10.6g亚铁氟化钾,加水溶解并稀释至100ml3.17氢氧化钠溶液（40区/L）：称取4g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL。3.18盐酸溶液（1+1）：量取501nL盐酸，加水稀释至100mL。3. 19葡萄糖标准溶液;称取 1 g(精确至0.000 1 g)经过 98 ℃～100℃干燥2 h的葡萄糖,加水溶解后加人 5 mL盐酸,并以水稀释至 100U mL。此溶被每毫升相当于1.0 mg葡荐糖。3.20果糖标准溶液：称取1g(精确至0.0001g)经过98℃～100℃干煤2h的果糖，加水溶解后加人GB/T 5009.7—2008
5ml.盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当于1.0g果糖。3.21乳糖标准液：称取1g（精确至0.0001g)经过96℃士2℃干燥2h的乳糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当子1.0mg乳糖（含水）。3.22转化糖标准溶液：准确称取1.0526g蔗糖，用100mL水溶解，置具塞三角瓶中，加5mL盐酸(1+1)在68℃~70℃水浴中热15min，放置至室温，转移至1000mL容量瓶中并定容至1000 mL，每毫升标推溶液相当于1.0 mg转化糖。4仪器
4.1酸式滴定管:25 mL。
4.2可调电炉带在棉板。
5分析步骤
5. 1试样处理
5.1.1一般食品：称取粉碎后的固体试样2.5g～5g或混匀后的液体试样5g～25g，精确至0.001g，置250tmL容量施中，加50mL水，慢慢加人5ml.乙酸锌溶液及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混，静置30min，用「爆滤纸过滤，弃去初滤皴，敢续滤备用。5. 1.2酒精性饮料:称取约 100 g混匀后的试样,精确至 0.01 g,置丁蒸发血中,用氢氧化钠(40 g/L)溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后，移人250mL容量瓶中，以下按5.1.1自“慢慢加人5垃L艺酸锌溶腋”起依法操作，5.1.3含大最淀粉的食品：称坡10g～20g粉碎后或混勾后的试样，精确垒0.001名，置250mL穿量瓶中，加200m水，在45水浴巾加热1h，并时时振摇：冷序加水至刻度，混匀，置，洗淀。吸瑕200 mL上清液置另一250 mL容量瓶中,以下按 5.1.1自“慢慢加人5 mL乙酸锌溶液”起依法操作。5.1, 4碳酸类饮料:称取约 100 g混勾后的试样,精确至 0. 01%，试样置蒸发Ⅲ中,在水上微热搅拌除去二氧化碳后，移人250ImL容量瓶中，并用水洗涤蒸发Ⅲ，洗液并人容瓶中，再加水至刻度，混句后，备用。
5.2标定碱性酒石酸铜溶液
啵堰5.0 ml. 碱性酒石酸铜甲滋及5.0 mL碱性酒右酸销乙，置于150 mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠两粒，从滴定管滴加约9mL葡萄糖或其他还原糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，趁热以1滴/2s的速度继续滴加葡葡糖或其他还原糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡药糖或其他还原糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每10mL（中、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg）也可以按上述方法标定4mL~20mL碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）来适应试样中还原糖的浓度变化]。5.3试样溶液预测
吸取 5. 0 mL 碱性酒i酸铜甲液及 5. 0 ml. 碱性酒石酸乙液,置于 150 L 锥形瓶中,加水10 niL,加人玻璃珠两粒，控制在2 min内加热至沸，保持沸腾以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以1滴/25的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。当样液中还原糖浓度过高时，应适当稀释后再进行正式测定，使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约10mL左右结果按式（1）计算。当浓度过低时则采取直接加人10mL样品液，免去加水10mL，再用还原摘标落液滴定至终点，记录消耗的休积与标定时消耗的还源糖标准溶液体积之差相当丁10mT.样液中所含还原糖的量，结果按式（2)计算，2
h
5.4试样溶液测定
GB/T 5009.7-2008
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL碱性酒酸铜乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入坡璃珠两粒，从滴定管滴加比预测体积少1mL.的试样溶液至锥形瓶中，使在2min内加热至沸，保持沸腾继续以1滴/2s的速度滴定直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。
6结果计算
试样中还原糖的含量(以某种还原糖计)按式(1)进行计算：式中：
X= m ×V7250 ×1 00 × 100
试样中还原糖的含量（以某种还原糖计），单位为克每百克（g/100g)；碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）相当于某种还原糖的质量，单位为毫克（mg）；试样质量，单位为克（g)；
测定时平均消耗试样溶液体积，单位为毫升(mL)当浓度过低时试样中还原糖的含量（以某种还原糖计)按式（2)进行计算：式中·
X *m×10/250 ×1000 ×100
试样中还原糖的含量（以某种还原糖计），单位为克每百克（g/100g)；（1）
（2）
标定时体积与加人样品后消耗的还原糖标难溶液体积之差相当于某种还原糖的质量，单位为毫克(mg）;
试样质量，单位为克(g)。
还原糖含量≥10 g/100 g时计算结果保留三位有效数字:还原糖含量10 g/100g时,计算结果保留两位有效数字。
第二法高锰酸钾滴定法
7原理
试样经除去蛋白质后，其中还原糖把铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量，计算氧化亚铜含量，再查表得还原糖量。
8试剂
除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯。8. 1硫酸铜(CusO, ·5H,0)。bzxz.net
8.2氢氧化钠(NaOH)。
8.3酒石酸钾钠(C,H,O.KNa·4HzO)8.4酸铁:Fe(SO,)al。
8.5 盐酸(HCI)。
8.6碱性酒石酸甲减：称取 34.639 g硫酸铜(CuSO.5H,O),加适量水溶解，加 0.5 mI.硫酸,再加水稀释至500mL，用精制石棉过滤。3
品成伴网h
GB/T 5009.7-2008
8.7碱性酒行酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解：并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。8.8氢氧化钠溶液（40g/L)：称取4g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL。8.9硫酸铁溶液（50g/1.）：称取50g硫酸铁，加入200mL水溶解后，慢慢加人100mL硫酸，冷后加水稀释至1000mL。
8.10盐酸（3mol/L）：量取30ml.盐酸，加水稀释至120mL8.11高锰酸钾标准溶液[c(1/5KMnO.)0.1000mal/1]。8.12精制棉：取不棉先用盐酸（3mol/L）浸泡2d~-3d，用水洗净，再加氢氧化钠液体（400g/L）摄泡2d~3d，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净。再以盐酸（3mol/L)浸泡数小时，以水洗至不呈性。然后加水振摇，使成细微的浆状软纤维，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可作填充古氏璃角。
9仪器
9. 125 mL 古氏堀或G4垂融璃
9.2真空泵。
10分析步骤
10.1试样处理
10. 1. 1般食品:称取粉碎后的固体试样约 2. 5 g～5 g或混勾后的被体试样 25 g～50 g,精确至0.001g，置250mL容量瓶中，加水50mL，摄匀后加10mL碱性酒石酸铜甲液及4mL氢氧化钠溶液(40g/L），加水至刻度，混勾。静置30 min，用下燥滤纸过滤，充去初滤液，取续滤液备用。10. 1.2酒精性饮料:称取约 100 g混勾后的试样,精确至 0. 01 ,置于蒸发匪中,用氢氧化钠案液(40 g/I.)中和至中性,在水浴.L蒸发至原体积的 1/4 后.移人 250 mL容量瓶中加 50 trL水,混。以下按10.1.1自“加10 mL碱性酒石酸铜甲液”起依法操作。10.1.3含人量淀粉的食品：称取10g～20g粉碎或混勾后的试样,精确至0.001名，置250mL容量瓶中，加200mL水，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇。冷后加水至刻度，混勾，静置。吸取200mL上清液置另一 250 mL容量瓶中,以 下按 10. 1.1 自\加 10 mL碱性酒石酸铜甲液\起依法操作。10.1.4碳酸类饮料：称取约100混匀后的试样，精确至0.01g，试样置于蒸发Ⅲ中，在水浴.上除去二氧化碳后，移人250L容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并人容量瓶中，再加水至刻度.混勾后备用。
10.2测定
吸取50.00mL处理后的试样溶液，于400mL烧杯内,加人25mL碱性酒石酸铜甲液及25mL乙，丁烧杯上盖：表面皿，加热，控制在4 in内沸腾，再准确煮沸2min，趁热用铺好石棉的古氏埚或G4垂融埚抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏埚或垂融均蜗放回原400ml烧杯中，加25mL硫酸铁溶液及25mL水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以高锰酸钾标摊溶液Lc(1/5KMn0.）=0，1000 mol/L_滴定至微红色为终点。同时吸取50mL水，加人与测定试样时相同量的碱性酒不酸铜甲液、乙液、硫酸铁溶液及水，按同一方法做空白试验。
10. 3结果计算
试样中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量，按式（3)进行计算，4

式中：
X =(V-V) ×e×71. 54
X一试样中述原糖质量相当于氧化亚铜的质量，单位为毫克（mg)；測定用试样液消耗高锰酸钾标准猝液的体积，单位为毫升（mI.）；V。一试剂空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积，单位为亳升(mL)；c-“高锰酸钾标准溶液的实际浓度，单位为摩尔每升（mol/L）GB/T 5009.7---2008
-......-( 3 )
1mL1.000mol/L高锰酸钾溶液相当于氧化亚铜的质量，单位为毫克（mg）。71. 54—
根据式中计算所得氧化亚铜质量，查表1，再计算试样中还原糖含量，按式（4)进行计算。m
ml×V7250×1000×100
式中：
试样中还原糖的含量，单位为克每白克（g/100g)：查表得还原糖质量.单位为毫克（mg）：m-..
试样质虽（体积），单位为克或毫升（g或mL）；V—测定用试样溶液的体积，单位为毫升（mL）；250--试样处理后的总体积，单位为毫升（mL）。+*.-....---..++.....-( 4)
还原糖含量≥10g/100g时计算结果保留三位有效数字；还原糖含量<10g/100g时，计算结果保留两位有效数字。
表1相当于氧化亚铜质量的葡萄糖、果糖、乳糖、转化糖质最表氧化亚钢
葡萄糖
(含水）
转化糖
氧化亚钢
葡葡糖
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（含水）
单位为离克
转化糖
GB/T5009.7—2008
氧化亚铜
（含水）
表1（续）
合品成伴网ht
氧化亚铜
葡萄糖
(含水）
单位为毫克
转化糖
氧化亚铜
葡萄糖
loa, 1
【含水】
表1（续）
转化糖
合品成伴网httn
氧化亚铜
葡葡糖
unyfoodmate.ne
129, 0
GB/T 5009.7—2008
单位为尝克
(含水)
转化糖
GB/T 5009.7—2008
氧化亚铜
葡葡糖
164, 9
（含水）
203, 8
表1（续）
转化糖
合品成伴网httn
氧化亚铜
葡萄糖
159, 6
nFondmatono
179, 2
183, 4
(含水）
单位为毫克
转化糖
氧化無钢：
葡萄糖
（含水）
表1(续）
转化糖
bttp:
氧化亚铜
葡萄糖
221, 4
GB/T 5009.7—2008
单位为毫克点
(含水）
转化糖
225, 4
GB/T 5009.7—2008
精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。http://foodmate.net：
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