【农业行业标准(NY)】 饲料中沙丁胺醇的测定气相色谱质谱法

ICS65.120
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1030-2006
饲料中沙丁胺醇的测定
气相色谱/质谱法
Determination of salbutamol in feeds-Gas chromatography/mass spectrometry method2006-01-26发布
2006-04-01实施
中华人民共和国农业部
本标准由中华人民共和国农业部兽医局提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。言
本标准起草单位：国家饲料质量监督检验中心（北京）。本标准主要起草人：范理、王彤、郑君杰、田静、高生、苏晓鸥。NY/T1030—2006
1范围
饲料中沙丁胺醇的测定
气相色谱/质谱法
本标准规定了用气相色谱/质谱法（GC/MS）测定饲料中沙工腰醇的含量NY/T1030—2006
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混合饲料中沙丁胺醇的测定，最低检测浓度为0.02mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样
3原理
用乙酸钠缓冲溶液提取何料中的沙丁胺醇，提取液过固相提取柱（SPE）净化，吹干，经衍生后，直接在GC/MS仪上测定。
4试剂和材料
以下试剂除特别注明者外均为分析纯，水应符合GB/T6682一级水要求，甲醇、甲苯、乙酸乙脂为色谱纯。
4.1氨水。
4.2冰乙酸。
4.3三水合乙酸钠。
4.4衍生剂：N.O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）。4.5甲苯。
4.6提取溶液：称取31.63g三水合乙酸钠（4.3）溶于水，加人冰乙酸（4.2）约12.0mL调pH约4.5.用水稀释至1L的乙酸钠缓冲溶液。4.7固相提取小柱（SPE)所用试剂。4.7.1OasisMCX固相提取小柱@3.cc/60mg(SPE)。4.7.2淋洗液1:乙酸溶液C（CHCOOH）=1moL/L：取5.72mL冰乙酸（4.2）于100mL容量瓶，用水定容至刻度，摇匀。
4.7.3淋洗液2:甲醇。
4.7.4洗脱液：取3.5mL氨水（4.1）于100mL容量瓶中，用乙酸乙脂稀释至刻度，摇匀。①Oasis?MCx固相萃取小柱是由Waters提供的产品的商品名称，给出这一信息是为了给本行业标准的使用者提供方便，而不是标准主管部门对这一产品的认可。1
NY/T1030—2006
4.7.5氮气。bzxz.net
4.8氮气（99.999%）
4.9沙丁胺醇标准溶液
4.9.1沙丁胺醇标准贮备液：称取20.00mg（精确0.00001g）沙丁胺醇标准品（纯度>99.5%），溶于甲醇并定容至100mL，该贮备液每毫升含沙丁胺醇为200g。4.9.2沙丁胺醇标准工作液：移取10mL沙丁胺醇备液（4.9.1）于100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，该溶液每毫升含沙丁胺醇为20。4.9.3沙丁胺醇标准系列：取适量标准工作液（4.9.2)于50mL容量瓶中，分别用甲醇稀释至刻度，配制成0.01μg/mL0.05pg/mL.0.10μg/mL0.50μg/mL1.00μg/mL，5.00μg/mL，10.0μg/mL标系列。
5仪器和设备
实验室常用仪器、设备及
5.1分析天平：感量0.0001g和感量0.00001g5.2氮气吹干仪。
5.3振荡机：水平或往复转动，频率每分钟250次～300次。5.4涡旋混合器。
5.5固相提取样品净化处理装置。5.6气相色谱/质谱联用仪
真有非极性毛细管柱和电子轰击源（EID）的检测器6试样的制备
按GB/T14699.1采取实验室样品（用四分法缩减分取200g）粉碎使之全部通过0.45mm孔径筛充分混勾，装人磨口瓶中备用。7分析步骤
7.1提取
称取试样（配合饲料3g~5g，浓缩饲料、添加剂预混合饲料约1g）精确至0.0001g，置于150mL具塞三角瓶中，准确加人提取溶液25mL（4.6），振摇使全部润湿，盖紧塞子，放在振荡机（5.3）上，振荡20mn，取下，溶液通过定性滤纸过滤，收集滤液备用。7.2净化
精确吸取5mL试样溶液（7.1）置于固相萃取小柱上（4.7.1），打开真空泵，使其过柱速度不超过2mL/min，再分别取2mL乙酸（4.7.2）和2mL甲醇（4.7.3）淋洗固相萃取小柱，丢弃所有的流出液，最后取5mL洗脱液（4.7.4）洗脱，用具塞试管收集，将洗脱液置于氮气吹干仪（5.2）70℃的条件下，用氮气吹干。
7.3衍生
具塞试管加人100L衍生剂（4.4），涡旋混合器（5.4）上充分溶解，置（70±5）C烘箱中，衔生反应30min。用氮气吹于，加人200甲苯（4.5）溶解，气质联用仪上分析。同时用沙丁胺醇标准系列做同步衍生。
7.4测定步骤
7.4.1色谱条件
色谱柱：DB-5MS，长30m，内径0.25mm，膜厚0.25pm。载气：氮气（纯度99.999%）：柱头压：100kPac进样口温度：2600
进样量：1.0L，不分流方式。
NY/T10302006
柱温程序：70℃保持1min，以25℃/min速度升至200℃，于200C保持6min，再以25七/min的速度升至280℃并保持2min。
EI源电子麦击能：70eV。
检测器温度：200。
接口温度：250℃。
质量扫描范围：70AMU400AMU。
溶剂延：12min
检测用沙丁胺醇三甲基硅烷衍生物的特征质谱峰：质核比m/Z=86，294，350，369。7.4.2定性定量方法
7.4.2.1定性方法
样品与保留时间的相对偏差不大于0.5%。特征离子基峰百分数与标准品相差不大于20%。7.4.2.2定量方法
选择离子监测法（SIM）计算峰面积，标准工作液和试样溶液中沙丁胺醇响应值均应在仪器线性范围内，如果浓度过高，需适当稀释。对标准工作溶液和样品液等体积参插进样测定。外标法定量。8结果的计算
饲料中沙丁胺醇的含量X，以质量分数（ag/g）表示，用公式(1)计算X=AsxcV0x
式中：
试样溶液峰面积响应值：
标准溶液峰面积响应值；
标准溶液浓度，单位为微克每毫升(ug/mL）；提取溶液的总体积，单位为毫升（mL）：Vo
试样质量，单位为克（g）；
Vi——定容体积，单位为毫升(mL)：V2
从试样溶液(7.2)中分取体积，单位为毫升（mL）。n
稀释倍数。
计算结果保留三位有效数字。
9允许差
两个平行测定结果的相对偏差不大于20%。（1)
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