【国家标准(GB)】 蜂蜜中氯霉素残留量的测定方法 酶联免疫法

G乃/T189的本部分的附录A考资料性附录。言
六部分出中件人出其和国案皇岛出人境检验检疫局是山。本部分主中华全国供销作总社归，本部分起草单位：中华人民共和国杂定出出人晚检验控将品本部分土要起草人：庞国芳、付宝莲张逆杰、肖他震，本部分系肖次发市的国家标准：GB/T18932.2*—2003
1范图
蜂蜜中氯囊素残留量的定方法
酶联免疫法
K1的本规宗了收中氯费素品酵联免疫测定方法本部分适周于好蛋中氢亮残率量的退本部分的支法检山限：款毒求为,0μR/kR2规范性引用文件
GR/T 18332.21—2003
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T37领试为法心粘密设通过文验室间试验确定标非测式方法许五现性和小现医(GB:T63791936.nec1S0)57251s81iG15：655分价实验究用水规格和试验法（6B/T起682—192.0cgSJ516：15873原理
试杆山减的氢需与试剂盒中的氯需案降际记物共同竞“级度抗休，形成有标证尤案标记的玩原抗体安合物它微附于教孔金来。出嗨还假在5助处测定吸光，股撕账光要值得片样品中的我量，
4试判和柯料
1. 1 氧需景试剂查
4.1.1 96返:12条×3孔:
4.1.2氧抵素标济液。
4.1.3氮荐物格敏
4.1.4氛性索抗体游液。
4. 1. 5 游些质,
4. 1. 6 发色剂、
4.1.7反应停止没。
冲济液，
4.2乙艺
分纯：币热幅，
G13T82现定的一级水。
5仪器
5.1酶标假：
CB/T16932.21—2003
5.2洗板机,配&逍或12道洗头
5.3&蓝移液器，50JrL~.30LrL
5.4单~510011.和3~10m.
5.5商心机
5. 6氮*次干仪，Www.bzxZ.net
5. 710 mL 具基试管
5.8滚相器
5.9报满器：
6试样制备与保存
6.1试样的制备
对无结晶的实验室样品，将其拌均匀，邓有结品的实骏案样是，在整闭的情说下，置于不超过50节的水裕十温热、振落，待样品企部账化后揽冷却垒家温。分出（.5kg作为试样。制备好的试样资于样品瓶中，密，加以标识。5.2试祥的保存
将栏品室祖下保存
7分析步媒
7.1规取
称收2≤成样，精确例2.01R.置于2mL其函离~管中，人4mL水和4ml.Z酸之醛（4.2)，生液体混匀器上充分混句2mn，使式单完全筛解，在报需器上据荡10min，以400ct/nn离心0准确吸取上层乙乙醛1ml.10mL具塞试管（=.7中吊氯气吹-千仪车5℃吹千，加入0.5mL缓冲减（4.1.8)落解戏造，供等标仅测定：此格液含试样量C.5，筛释系数为1：1.2测定条件
以下所右探作应在20么~24室很下进行，7.2.1酶标收测定条件，醛标假测定被关为451nml。7.2.2选条件如下，
7.2.2.1统柜机洗板条件，采月象式抽十和注酒，洗涤次数人饮，年以法水基为250l.--3GL。？.2.2.2人三选拨条件：院漆次数五次以上，再次注水导为251uT..7.2.3氢再其试剂个中所有试制的温虚均应巨产至室盟<20%~24)后方可使用：期每索标准浮液(4.1.2)，忽再表杯记物落浓（1.1.3>和氯每景抗体裕被（.1.41尊均接1份试剂十10)份规冲游液进行稀释与制务！，每达测定所吊的税释减均品现配现用。了.2.4将谢定需的微摄备齐并销人做孔集工，记录标准炎样品牛在款孔架上的位（模板图）。7.3前定
测径中吸收不司的试列和样品溶液时应更换吸头，7.3.1分别吸取59稀种的牌标证让数，蒸露素准陷液、单成落液利氛再系比体”等按换板图位置依次加人各户的说庆部，然后，日封厂膜税封孔签以附落波抵发：权微板在台面上以圆商运动为式混约后，于20--24心避光将宵2b\1：个别品牌试划盒中试剂的常产系数端不同，2）个期品牌试有盒中的达剂品人员落有不网，？个别品牌试盘餐的用益质与间增不间，2
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7.3.2微孔架置于洗板机工：按设定的继隔洗板后，将微孔架反扣在收水罪上净反复拍。此以既要去险微孔户过多的减：义不能使微孔十燥，7.3.3迅题加人50叫.酸热质邦50安色别于微孔底部，然后，持微孔板在台面上以圆周运动方式滤20~2睡光粤育30mi：
7.3.4以还加人100反应序止饿于微凡底部，然后持微孔板在价固上以可周盗动方式混勾证，册微托架置干能标仪中，在450)nm处测量吸光度（划人反应停止后在min内读取吸光厘）.7.4平行试验
以上步录，对同一标准、同一样品落浓均进行平行试验测定。7.5空自试验
除不称取战样外，均按工述步森进行，7.6监控试呕
每秋溃定均应做“人添加氮每来标准的样品：日结果计算
在学刘数生标跃上，以吸度位为标（些.氮垂标准游液浓度（\/）为坐标，经制标准工作线：从标注工作曲裁上导到试样中相成的额避索浓魔已、结按式（1)计练：V.Tocc
式中:
试样中素鸡量，单位微克每克（/kg从标准1性山线上得到的试栏中数要亲浓度，单位为纳元也升（ng/ml）样器获内总整定奔体积，单位为急升（mL)：一样品溶波所代衣的最察试样质展，单位为克（R）.结果去小西小数点厅两位
计：计萍结业应打席空自宜
9确证试验
被件品中氯要款残留量的恒大于检出限比，成用C-MS运或成1：MMS法过行确证，10精密度
本郝分的精密度数据是按源/5379均规定确定的，其承复性小现生的值是以%的可值度米绅.
10.1重桌性
在友注条件下，择害惠需的含量在0一4./也压时，缺得两次独测试综果的笔对竞值不距过垂复性限(),本部分拍审复生限按为保式（2\计算：0.U76,61
w———-两次测定值的子均值，单位火情京料千克（g/g)：如来差值适过中复注限，应合办试验站果并立新完就尚次单一验的谢定，10.2再现性
4：个制品单试洲企中的牌成和发剂合一为一，划人量略有同。（2
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4再现性条件下，韩递中氧太的含以存0.2c35/kg~0.58/kg范国对，获得的两次纳立测试结果的绝别差值不辑过典现性（R).木部分内小现性双按方程式(\)计并：IgR0. s57 2 gm 1, 57 4
两次测定值的平与值，单位为微克带于点g/k）。对录
（资料性附录）
回收率
本方法中疯索添加浓改及回收率的试验效制：在添3）对，平收率99.1%；
在加显为1.35k；，平均回收量为.34.%；在券加量火2.539/k平均回收率为13：.0：在微加量4.052g/时，平均可收求为96.净不。GR/T18932.21—2033
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