【国家标准(GB)】 蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧萘青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定方法液相色谱-串

1CN67.180.13
中华人民共和国国家标准
GB/T18932.25--2005
蜂蜜中青霉素G、青霉素V
乙氧萘青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定方法
液相色谱-串联质谱法
Mcthod fnr tlie determinatlon of penicillin G, penicillin Vnafeillin.oxacillin +cloxhcillin, dieloxacillin residues in huney-LC-MS-MS method
2005-D2-04发布
中华人民共利国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2005-08-01实施
H11893本部分的防求A、时录B为资料外录.本部分由中华人民共和国举章出人意检验检疫后揽出。本部分出中华全国供销合作总社中口。本部分起草单位：中华人尺共和国案与路山人境检验检疫局。GB/T18932.25—2005
本部分主要起毕人，出国势、产学以，张进态、曲单恩，能存林，刘水明、赵为、郭彩形、行玉秋，本部分亲前次发布的国家标准
1范巴
蜂蜜中青霉繁G、声塞嘉
GB/T 18932.25—2005
乙舞蔡青藓素，苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定方法
液相色谱-串联质谱法
B/T_3332的本分规定了性出4古存累、青素V、东声太，苹坐素邻素、双氯得求残留望的越色增-本联质增测定方法部分用十资中有V乙氧素、唑青素邻效素戏用量的浪宝
本部分的方法检止限：当存泰G青需素V举唑青为1.0/k8：邪氧每系、双氣每求为2.gg青.5kg
2规范性引用文件
死2件的录款通/18932的本部分的用成本部分的条款，凡是注日期的引文计，其随后所有的修改单（不包活勘误的内容或停所版均不适用于本部分·然所·数励根据本部分达成协设的务办研究是否可使市这些文件的层新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新反本适用于本部分。
G13/T6373谢院方法的料渐通过实验牢间试娶确定标准创试方法的重现任知再现性（GH/16373986neg72081
CBT552分析实验室用水现格和式验/法（GB/T66821S92.ne1503696:1987）3原理
试样上举索残留，用去离子水落解后，溶液用aaiITLB或相当的固相萃取柱序化：谈相色谱中联质谐设测究，外标法定量，4试剂和材料
除另有说明外，所用诚剂均均忧级纯，水步（B/T5532规定的-短水，4.1甲醛；色诺纯。
4. 2Z临色诺4.
4.3乙酸：忧纯。
4.4乙脂+x1+)：量取25mI.乙跨（4.2)与75nL水强合，4.5【3asisHL上柯举成拉或柜当老53)mg,6m。市前分别用rT.甲惊（4.1)和13ml.水预处圳：保持杠体湿润。
4.6古素，青等机V之氧青、未唑声海素，氯置家，氧古标准物质，纯出94.7元素G、青素V、7单靠有医然，茉得素，部期青避索、双款声减素标储备溶液：准确称吸量范每种标准物质<4.6;，分别书乙脏（4,4)比制成浓度为1.mg/mT.的标备液，催备液购存在一13%冰柜中。
4.8背再求G，古需款V、乙氧青帝、苹唑吉带茶，邻复有军案，双氧本素标雅工作落池，根据需CB/T18932.25—2005
受活V育双标准技
（4.?），用空凹并品提取波稀科成退当退为基质强分证准工作落报.5收腾
兼相色谱-串联四极杆质谱交：配有电喷雾离了源（ES1>。5.1
5.2分折天，缺01. 1 m和0. 61g各一台.5.3浓划器。
5.4闹相率取再空装置：
5.5 :50 mL
5,6微录注射薪;25 μl-,100 rL..5.7刻度样品肾,5mL精度为. 1 mE.,5.8真空系，真客使应达8P：。
5.9pH：量精度=0.02。
鼠气吹丁设，
6试样的制备与保存
5.1试样的制备
对无结品的实教室样品，精其推拌均分。对有站品的栏品，在案闭情况下，置小不超斗0的水浴中温热，报离，得样品会部融化后挖勾.迹速冷却至室温，分山0.，k作为试样。制备好的式推置于难品瓶户，封，并做上标记：
6.2试择保存
将成样了常祖下保存。
7.1试祥溶液的朝音
承取3式（精确到C.9：）世寸5om角中、加人25l.去离于水于液你泥分器上快速混会1mir.使或完全销：样商格率下接（JanisHLB桂（4.5的广装器中.以小T成等3m./im起流速通过asis周相举取杜，用5I.水洗柱，弃云全部流山液，在GPa的负瓜下，减区抽一20min，量币3ml.中醇（4.1>选说，收集洗脱策效度样品咨<5.7)中，乎49℃水举中用每气收十改于，只乙脑（4.4）定客至11.据后，供落相色培-串联质谱促测定。7.2测定
7.2.1液相色谱条件
u）也谱柱：Sur.Fi.emC.n3.5um.1mx2.1mm（内径）或相当者：流动相及流速见表1
杜温30
进禁：20，
表1液相色谱梯度洗肤条件
水(. 乙酸
7.2.2质谱条件
离子源，中喷等离子源(ESI)；
扫方式：可商子扫描：
检测力武：务反应监测：
中喷客电压：55U；
等化气压力.0.c55MPas
气帝气：0.079MPa：
辅助气流速;6 1,/mi-1
离子源温0
CB/T18932.25--2005
性离子列定量离子对电压IP我东压（FP）换够（CE及跑室出电乐(CXP),见表.
表之八种膏录素的定性离于对、定量离于对、去端电三，聚焦电压，碰插能量和随谨室出口电压3正性
益高费
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幽子饼
tanrei
N:: F3
35::82
$132:F3
402:213
215/:59
-15:256
273/:6
473:31:
了2.3液相危谢申联质谱测定
7.2.3.1定性测定
35:160
551:16f
43F/160
415:19
476:169
谨体定
弃相同试验条件下样品中诗物质与同正呛测的标堆品具有相同的保留间，产且所选样的两商子十变法相致，叫可判定为样战十存在该戏率7.2,3.2定量测定
器作件，素，
求标准增备浮液配成的基实混合标带凉策（4.分别逆详.以标谨工作资液浓理为模坐标，以峰面积划纵些标，绘制标消二作曲线。用标准工作曲戴对样品进行定量，Y品浮装叫专筹素G、专将素V、乙氧券言蛋菜,苯唑文萨其邻氯青露索,状氮与学系的响院值证仪器测定的线性范因内：在上这色增条下，言、每款乙案存素，来唑青零者，邻氣背素，双素的总由子流图参见图A.1。古系于素V，乙点青海意，举坐事、邻氯案、双氛青的伴留时和离子比见表3。
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生写素名称
青每来心
长坐声活素
之或游背需意
表3六种善求的参考保留时间和离子率度比正性子）
335716)
3357175
351/160
551/192
102/16u
402/245
136/360
可2727
1:1:/19s
1_51256
本方法的添加回收收垂现表B.1
7.3平行试验
按」述步梁，对间一试样进行平行民验定。空白试验
徐人称收试样外均按上选分析步强进行8靖果计境
离于对丰度北(）
好室宁变册素变照止利用数据处再系统计第或按式门计算：X-x
式宁：
X—试样中被测组分残留臣单位为款克年千克（g）保留非间/ni.
一从标准广作此行到的试详游液中教德组分的液度单位为纳克牵升（/m上)：试栏液定察休积，单位为培升(ml.)：A
最终试样链液所代的试质量单校为克（）。理，计原结果军柯空白值扣除，9精密斑
本部分的捐出度数括还按照GH的规定确定的，其垂象性和再现性的值以监拍可信度来计翼，
9. 1重复性
在重友性条件下，获丧的两次独立测试结果的绝则差道不超过乐象证限（）蜜中吉再常，，、邻、含及性表。
如果副定值的整值超亚复性限（）感弃成验药果并或新完成两次单个试验的测定9.2再现忧
再现性多件下，获得的两次独立期试结果的池对差值不读再坏烂限（尺》，蜂密十专典索G，者森素己氧素有素苯唑青密素,邻氰青疫素,双素青或素命冠范岛改再现性方积衰。+
效名称
青考素V
增专放
茶育发
六种声赛含量范围及直性和再现性方程含量范围g/kg)
1 -- c
0, 5 --20
汁：州为两次超定果的算术平均临，取复性限
Jg -1. 502 7 lg m 1. 09: 6
Ig r-5. 985 0 g m--1. 148 5
lg/-3.779 1gm0.9155
tg μ-3, 915 4 1g m 1. 086 21g/1,02:31gm1,1511
Ig =1,017 : lg m 1, 13x 1
CD/T 18932.252005
再现性R
lx R- t. ese u le m -c. 62? rJx R-c. 657 2 le -0. 645 1
1gR-c.813 7 le m0.6173
Ig R-c. 8.e p lg m0. 562 5
g R-c.831 I lg m
Ig R G, 801 s Ig m
GB/T 18932.25—2005
附录A
（贵料性附录）
六种青零索标准物质的总离子疏图六种事索标准物质的总离丁流图，光阅A.1.a. ous
- nm5 -
20 r/:nim免费标准bzxz.net
图A.1六种青需求标准物质的总离子流图7.min为需
9.21in为Vi
0,56un些青：
.in含想得车
5.05 min共
附录B
【资料性附变】
国收率
CB/T18932.252005
牛分中存素、V不氧要家，唑索，氧素，双氯吉需素添加浓底及平均运性率的试验数据见表.1.
表B，1六种肾罩密源加溶度及其平均回收率的试验整据育票安各邦
否奈心
添加装度/(ng/kg)
回收意八
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