标准简介/下载中华人民共和国进出口商品检验行业标准
SN 0210—93
出口肉及肉制品中
己烯雌酚残留量检验方法
分光光度法
Method for determination of diethylstilbestrol residues in meat and meat products for export —Spectrophotometric method
| 1993-06-04发布 | 1993-08-01实施 |
中华人民共和国国家进出口商品检验局 发 布
中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出口肉及肉制品中
己烯雌酚残留量检验方法
分光光度法
Method for determination of diethylstilbestrol residues in meat and meat products for export
-Spectrophotometric method
1 主题内容与适用范围
本标准规定了出口肉及肉制品中己烯雌酚残留量检验的抽样、制样和分光光度测定方法。
本标准适用于出口冻猪、牛、兔、鸡及午餐肉、清蒸猪肉和咸牛肉罐头中己烯雌酚残留量的检验。
2 抽样和制样
2.1 检验批
以不超过2500件为一检验批，同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2 抽样数量
| 批量(件) | 最低抽样数(件) |
|---|---|
| 1~25 | 1 |
| 26~100 | 5 |
| 101~250 | 10 |
| 251~500 | 15 |
| 501~1 000 | 17 |
| 1 001~2 500 | 20 |
2.3 抽样方法
按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。
肉及肉制品(罐头除外)：每件至少取一袋为原始样品，原始样品总量不少于2 kg，放入清洁容器内。加封后，标明标记，及时送实验室。
如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2 kg，则可用锋利刀（用酒精灭菌过）在抽出的包件中，每件割取不少于100 g，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2 kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。
罐头：每件随机取一罐。
所抽取的样品加封后，标明标记，及时送实验室。
2.4 试样制备
肉及肉制品(罐头除外)：从所取全部样品中取出有代表性样品约1000 g，充分搅碎、混匀，均分成
SN 0210-93
两份，分别装入洁净容器内。密封并标明标记。
罐头：将所取全部样品开罐后，充分搅拌、混匀，取出约 $1\,000\,\text{g}$，均分成两份，分别装入洁净容器内，密封并标明标记。
2.5 试样保存
将试样于 $-18^\circ\text{C}$ 冷冻保存。
注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
3 测定方法
3.1 方法提要
用正己烷和氢氧化钠溶液依次提取试样中的己烯雌酚。取部分含己烯雌酚的氢氧化钠溶液，用磷酸调至 pH 为 $8$ 左右。加乙醇和水至一定体积。此澄清液在紫外灯下辐照，使己烯雌酚转变为醌式的化合物，在波长 $418\,\text{nm}$ 测定吸收值，由标准曲线求得其含量。
3.2 试剂和材料
3.2.1 正己烷：分析纯。
3.2.1 磷酸：分析纯。
3.2.3 磷酸溶液：$1+4$。
3.2.4 氢氧化钠溶液：$0.8\,\text{mol/L}$。求出中和 $15\,\text{mL}\ 0.8\,\text{mol/L}$ 氢氧化钠溶液所需磷酸溶液的毫升数，以酚酞为指示剂，至粉红色刚刚消失。
3.2.5 乙醇：分析纯。
3.2.6 无水硫酸钠：分析纯，$650^\circ\text{C}$ 灼烧 $4\,\text{h}$，于密闭容器内。
3.2.7 己烯雌酚标准品：纯度 $>99\%$。
3.2.8 己烯雌酚标准储备溶液：准确称取己烯雌酚标准品 $25.0\,\text{mg}$，加精制花生油至 $50.00\,\text{g}$（每毫克油中含己烯雌酚 $0.5\,\mu\text{g}$）。
3.3 仪器和设备
3.3.1 紫外灯：$15\,\text{W}$。
3.3.2 分光光度计：具有 $10\,\text{mm}$ 或 $40\,\text{mm}$ 比色池（石英）。
3.3.3 组织捣碎机。
3.3.4 锥形瓶：$250\,\text{mL}$，具磨口玻璃塞。
3.3.5 分液漏斗：$250\,\text{mL}$。
3.3.6 容量瓶：$25\,\text{mL}, 50\,\text{mL}$。
3.3.7 试管：$25\,\text{mL}$，具磨口玻璃塞和刻度。
3.4 测定步骤
3.4.1 标准曲线的绘制
准确称取己烯雌酚标准储备液 $100.0\,\text{mg}$（含己烯雌酚 $50\,\mu\text{g}$）于 $50\,\text{mL}$ 烧杯中，用 $50\,\text{mL}$ 正己烷定容转移至分液漏斗中。用氢氧化钠溶液 $20, 20, 10\,\text{mL}$ 提取三次，合并氢氧化钠溶液。
取氢氧化钠提取液 $0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 7.5$ 和 $10.0\,\text{mL}$（分别含己烯雌酚 $0.5, 1.0, 5.0, 7.5$ 和 $10.0\,\mu\text{g}$）分别置一组 $25\,\text{mL}$ 试管中，用氢氧化钠溶液补足至 $15\,\text{mL}$。按 3.2.4 条事先求出的毫升数加入磷酸溶液中和。再加乙醇 $2.5\,\text{mL}$，最后用水稀释至 $25\,\text{mL}$。
上述溶液每毫升含己烯雌酚分别为 $0.02, 0.04, 0.10, 0.20, 0.30$ 和 $0.40\,\mu\text{g}$。
分别取适量上述溶液置于比色池中，按 3.4.2 条预先选好的辐照条件，在紫外灯下辐照。在波长 $418\,\text{nm}$ 处测定其吸光度，以未辐照的溶液为参比液，按吸光度对浓度绘制标准曲线。
3.4.2 辐照条件的选择（注意保护眼睛，勿直接接触紫外线）
移取适当体积的绘制定标准曲线用的溶液（$0.40\,\mu\text{g/mL}$）放入比色池中，垂直放置在距紫外灯约 $7\,\text{cm}$ 处。
