【商检行业标准(SN)】 松疱锈病菌检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 2341—2009

松疱锈病菌检疫鉴定方法

Quarantine identification of Cronartium spp.

前 言

本标准的附录D为规范性附录，附录A、附录B、附录C为资料性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局和中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：王颖、程颖慧、章桂明、康林、陈枝楠、杨伟东、娄定风、吴翠萍。

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

松疱锈病菌检疫鉴定方法

1 范围

本标准规定了入境松属(Pinus spp.)及其他寄主植物,包括原木、木制品、木质包装和苗木上的松疱锈病菌的检疫鉴定方法。

本标准适用于对来自松疱锈病发生国家和地区的所有松属植物和其他寄主植物中松疱锈病菌的检疫鉴定。

2 原理

2.1 分类地位

松疱锈病菌(油松疱锈病菌 Cronartium coleosporioides,北美松疱锈病菌 C.comandrae,香蕨柱锈菌 C.comptoniae)属于真菌界(Fungi),担子菌亚门(Basidiomycotina),冬孢菌纲(Teliomycetes),锈菌目(Uredinales),栅锈科(Melampsoraceae),柱锈属(Cronartium)。

2.2 鉴定原理

松疱锈病菌的形态特征是检疫鉴定的主要依据,同时参考病原菌的发生国家和地区(参见附录A)、寄主范围(参见附录B)及症状。

3 仪器用具

体视显微镜、显微镜、冰冻切片机、高压灭菌器、滴管、镊子、放大镜、斧头、钳子、酒精灯、手术刀、手术剪、量筒、载玻片、盖玻片、玻片、标签等。

4 试剂和药品

无水乙醇、冰乙酸、福尔马林、蒸馏水。

5 检验方法

5.1 症状观察

观察入境松属及其他寄主植物有无溃疡症状、有无孢子堆等。检查植株的枝干是否有流脂、皮层肿大、破裂并从裂缝中生出黄白色至橘黄色锈子器或锈黄色锈孢子的症状。秋季发病处可渗出蜜滴(为性孢子和蜜滴的混合物),蜜滴消失后可见“血迹”状斑。对转主寄主则检查叶片背面有无疱状夏孢子堆,在夏孢子堆中或其周围组织是否有冬孢子柱。

5.2 形态观察

将可疑针叶组织样品或枝干皮层组织样品用FAA(福尔马林5 mL、冰乙酸6 mL、50%酒精89 mL)固定脱脂处理2 h~24 h后,徒手或冰冻切片备用。体视显微镜下选取切片完整的组织,制成玻片,在显微镜下观察病原菌形态特征(参见附录C)。

6 鉴定特征

松疱锈病菌侵染寄主植物,在寄主植物茎和枝干上产生不同的症状,C. coleosporioides 在寄主植物的茎和枝条上形成的终年溃疡症状通常是长形(长短比超过10倍)、钻石形、常环割小茎和枝条;而C.comandrae、C.comptoniae 在寄主植物的茎和枝条上形成纺锤形病斑;C.comandrae 锈孢子橙色,梨形、长梨形、卵形或椭圆形,通常上端尖,也称泪珠形,为该病原菌的典型特征;C.comptoniae、C. coleosporioides 锈孢子为