【国家标准】 食品添加剂　维生素D2(麦角钙化醇)

中华人民共和国国家标准

GB 14755—93

食品添加剂
维生素 D₂（麦角钙化醇）

Food additive
Vitamin D₂ (Ergocalciferol)

1 主题内容和适用范围

本标准规定了食品添加剂维生素D₂的技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存的要求。

本标准适用于以麦角甾醇为原料制成的维生素D₂，在食品工业中作为营养强化剂。

2 引用标准

中华人民共和国药典 一九九〇年版 二部

3 产品化学名称、分子式、结构式、分子量

化学名称：9,10-开环麦角甾-5,7,10(19),22-四烯-3β-醇
9,10-secoergosta-5,7,10(19),22-tetraen-3 β-ol
分子式：C₂₈H₄₄O
结构式：

[图片]

分子量：396.66（按1987年国际原子量）

4 技术要求

4.1 性状

本品为无色针状晶或白色结晶性粉末，无臭无味，避光或空气均易变质。本品在三氯甲烷中极易溶解，在乙醇、丙酮或乙醚中易溶，在植物油中略溶，在水中不溶。

4.2 项目和指标

5 试验方法

本标准所用试剂除另有特殊规定外，均为分析纯试剂；水为蒸馏水或去离子水；溶液为水溶液。

5.1 鉴别

5.1.1 试剂和溶液

5.1.1.1 三氯甲烷(GB 682)。
5.1.1.2 乙酸酐(GB 677)。
5.1.1.3 硫酸(GB 625)。

5.1.2 鉴别方法

取本品约 0.5 mg，加三氯甲烷 5 mL 溶解后，加乙酸酐 0.3 mL 与硫酸 0.1 mL，振摇，初显黄色，后渐变红色迅速变为紫色，最后成绿色。

5.2 含量测定

5.2.1 试剂和溶液

5.2.1.1 色谱纯试剂：正戊醇、正己烷、异辛烷。
5.2.1.2 2,6-二叔丁基对甲酚。
5.2.1.3 内标试剂：邻苯二甲酸二甲酯。
5.2.1.4 标准品：维生素 D₂ 标准品，由卫生部颁发。

5.2.2 仪器和设备

高压液相色谱仪。

5.2.3 测定方法

5.2.3.1 对照品贮备液的制备

称取维生素 D₂ 对照品 25 mg(准确至 0.000 2 mg)，置于 100 mL 棕色量瓶中，加异辛烷 80 mL，避免加热，用超声处理助溶 1 min 使完全溶解，加异辛烷至刻度，摇匀，充氮密塞，避光，0℃以下保存。

5.2.3.2 内标溶液的制备

精密称取邻苯二甲酸二甲酯 25 mg，置 25 mL 棕色量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀。

5.2.3.3 样品溶液的制备

精密称取供试品 25 mg，置 100 mL 的棕色量瓶中，加异辛烷 80 mL，避免加热，超声处理助溶 1 min 使完全溶解，加异辛烷至刻度，摇匀。精密量取上述溶液与内标液各 5 mL，置 50 mL 棕色量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

5.2.3.4 系统适用性试验

用硅胶为填充剂，正己烷-正戊醇(994：6)为流动相，检测波长为 254 nm，量取维生素 D₂ 对照品贮备液 5 mL，置具塞玻璃容器中，通氮后密塞，置 90℃水浴中加热 1 h，取出迅速冷却后，加正己烷 5 mL，摇匀，置 1 cm 具塞石英吸收池中，将石英吸收池斜放成 45°，在主波长为 254 nm 和 365 nm 的紫外线照射下放置 5 min，使溶液中含有前维生素 D₂、反式维生素 D₂、维生素 D₂ 和速甾醇 D₂，取此液注入液相色谱仪中，测定维生素 D₂ 峰值，先后进样 5 次，相对标准偏差应不大于 2.0%，前维生素 D₂(与维生素 D₂ 的比保留时间约 0.5)与反式维生素 D₂(与维生素 D₂ 的比保留时间约为 0.6)以及维生素 D₂ 与速甾醇 D₂(与维生素 D₂ 的比保留时间约为 1.1)的峰分离度均大于 1.0。

5.2.3.5 校正因子的测定

精密取对照品储备液溶液和内标溶液各 5 mL，置 50 mL 棕色量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀；取一定量注入液相色谱仪，计算维生素 D₂ 校正因子 f₁。精密取对照品贮备液 5 mL，置 50 mL 棕色量瓶中，加入 2,6-二叔丁基对甲酚结晶 1 粒，通氮排气后，密塞，置 90℃水浴中加热 1.5 h，取出迅速冷却至室温，精密加内标溶液 5 mL，加正己烷至刻度，摇匀，取一定量注入色谱仪，计算校正因子。

f₂ = (A_sm_i - f₁ · m_i · A_D1) / (A_D2 · m_s) ..............................(1)

式中：f₂ ——前维生素 D₃ 折算成维生素 D₂ 的校正因子；

A_s ——内标的峰面积；

m_i ——加入对照品的量，g；

f₁ ——维生素 D₂ 的校正因子；

m_s ——加入内标物质的量，g；

A_D1 ——维生素 D₂ 的峰面积；

A_D2 ——前维生素 D₃ 的峰面积。

5.2.3.6 含量测定

按高效液相色谱法中内标加校正因子测定法（《中华人民共和国药典》一九九〇年版二部附录第 68 页）测定，取样品溶液，注入液相色谱仪中，记录色谱图，测量峰面积。

5.2.3.7 分析结果的表述

x = (f₁ · A_D1 + f₂ · A_D2)m_s × 100/(A_i · m) ....................................(2)

式中：x ——维生素 D₃ 及前维生素 D₃ 折算成维生素 D₂ 的总含量，%；

A_D1 ——维生素 D₂ 的峰面积；

A_D2 ——前维生素 D₃ 的峰面积；

m_s ——加入内标物质的量，g；

A_i ——内标的峰面积；

m ——样品质量，g。

5.2.3.8 允许差

本方法平行测定的允许绝对差在 1.5%以内。

5.3 麦角甾醇的检查

5.3.1 试剂和溶液

5.3.1.1 乙醇(GB 679)：90%(V/V)乙醇。

5.3.1.2 洋地黄皂甙试液，取洋地黄皂甙（生化试剂）20 mg，加 90%乙醇 2 mL，加热溶解制成。

5.3.2 测定方法

取本品 10 mg，加 90%乙醇 2 mL 溶解后，加洋地黄皂甙试液 2 mL 混合，放置 18 h，不得发生浑浊或沉淀。

5.4 比旋度测定

5.4.1 试剂和溶液

无水乙醇（GB 678）。

5.4.2 仪器

旋光仪。

5.4.3 测定方法

取本品，精密称定，加无水乙醇制成每 1 mL 中约含 40 μg 的溶液，按照《中华人民共和国药典》一九九〇年版二部附录第 17 页旋光度测定法测定（应于容器开启 30 min 内取样，并在溶液配制后 30 min 内测定）。