【商检行业标准(SN)】 副结核病补体结合试验操作规程

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1085—2002

副结核病补体结合试验操作规程

Procedure of complement fixation test for paratuberculosis

中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局 发布

前 言

本标准是按照 GB/T 1.1—1993《标准化工作导则 第1单元：标准的起草与表述规则 第1部分：标准编写的基本规定》的要求编写的。

本标准参考了国内外有关资料和我国在这方面的经验，制定了适合我国出入境动物检验检疫的操作方法。

本标准的附录A、附录B为标准的附录。

本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。

本标准起草人：曹爱波、蔡琳炜、王玉玲。

本标准系首次发布的检验检疫行业标准。

副结核病补体结合试验操作规程

SN/T 1085—2002

Procedure of complement fixation test for paratuberculosis

1 范围

本标准规定了副结核病补体结合试验的操作规范。

本标准适用于牛、绵羊、山羊副结核病的检验，其他哺乳动物可以参照。

2 引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB/T 6082—1992 分析实验室用水规格和试验方法

3 器材和试剂

3.1 器材

3.1.1 玻璃试管：$10\ \text{mm} \times 75\ \text{mm}$，圆底，洁净，同质。

3.1.2 试管架。

3.1.3 加样器：可调式或定量式，$0.05\ \text{mL} \sim 1.0\ \text{mL}$。

3.1.4 离心机：低速，使用水平转子。

3.1.5 水浴锅：$37^\circ\text{C}$。

3.1.6 水浴箱：使用时参照附录B调节水温。

3.1.7 吸管：$1\ \text{mL}, 2\ \text{mL}, 5\ \text{mL}, 10\ \text{mL}$。

3.2 试剂

3.2.1 试验用蒸馏水为 GB/T 6682 中的三级水。

3.2.2 溶血素：冻干品，使用时按说明用蒸馏水溶解。

3.2.3 抗原：冻干品，使用时按说明用蒸馏水溶解。

3.2.4 补体：冻干品，使用时按说明用蒸馏水溶解。

3.2.5 红细胞悬液：采健康成年绵羊血，以 $1 : 1.2$ 的比例与 Alsever氏液混匀，在 $4^\circ\text{C}$ 保存 $5\ \text{d}$ 后使用。使用前摇匀后取出适量，用20倍量生理盐水洗涤3次，每次用离心机以 $2000\ \text{r/min}$ 离心$5\ \text{min}$，最后一次$10\ \text{min}$。取沉淀的红细胞用生理盐水配制成$3\%$悬液(V/V)。

3.2.6 标准阴性血清：冻干品，使用时按说明用蒸馏水溶解，并用生理盐水作 $1 : 10$ 稀释后 $56^\circ\text{C}$ 水浴灭能 $30\ \text{min}$。

3.2.7 标准阳性血清：冻干品，使用时按说明用蒸馏水溶解，并作 $1 : 10$ 稀释后按附录B水浴灭能 $30\ \text{min}$。

3.2.8 被检血清：从被检动物静脉采血，分离血清，不能产生溶血，$4^\circ\text{C}$保存。采血应与皮内变态反应同天进行；若需重复采血，则第二次采血应在皮试后 $3\ \text{d}$ 内进行。使用前用生理盐水作 $1 : 10$ 稀释后，按附录B水浴灭能 $30\ \text{min}$。