【FZ纺织行业标准】 化学纤维氨基酸含量试验方法

ICS59.060.20
中华人民共和国纺织行业标准
FZ/T50049-—2020
化学纤维
氨基酸含量试验方法
Man-madeFibresTestmethodforamino acid content2020-04-16发布
中华人民共和国工业和信息化部-rrKaeerKca-
2020-10-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中国纺织工业联合会提出。本标准由上海市纺织工业技术监督所归口。FZ/T50049—2020
本标准起草单位：广州纤维产品检测研究院、上海市纺织工业技术监督所、安徽宏祥丝绸织造有限公司、安徽省产品质量监督检验研究院、桐昆集团股份有限公司、上海纺织集团检测标准有限公司。本标准主要起草人：谢剑飞、胡剑灿、丁振华、周祯德、秦祥宏、刘艳丽、徐燕。I
-kaerkAca-
1范围
化学纤维
氢基酸含量试验方法
本标准规定了用氨基酸自动分析仪测定化学纤维中氨基酸的方法。FZ/T50049—2020
本标准适用于化学纤维中的天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸17种氨基酸的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6503—2017化学纤维回潮率试验方法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
化学纤维中的蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换分离柱分离后，与节三酮溶液产生衍生颜色反应，再通过比色测定氨基酸含量，外标法定量。4试剂和材料
4.1试剂
浓盐酸，优级纯。
水，符合GB/T6682中规定的一级水。4.1.2
柠檬酸钠（NaC.H,O，·2H,O)，优级纯。4.1.3
氢氧化钠（NaOH)，优级纯。
氯化钠(NaCI)，优级纯。
氢氧化锂（LiOH·HzO)，优级纯。4.1.6
冰乙酸（CzHOz），优级纯。
二甲基亚砜（CzH.OS)，优级纯。4.2试剂配制
4.2.16mol/L盐酸：浓盐酸与水以1：1（体积比）混合。4.2.20.02mol/L盐酸：将浓盐酸用水稀释600倍，置于0℃~4℃冰箱中保存。4.2.3pH2.2的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠（Na;C.HsO，·2HzO)和16.5mL浓盐酸加水稀释到1000mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化钠溶液调节pH至2.2。4.2.4pH3.3的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和12mL浓盐酸加水稀释到1000mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化钠溶液调pH至3.3。4.2.5pH4.0的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和9mL浓盐酸加水稀释到1000mL，用浓盐1bZxz.net
irKacerKca-
FZ/T50049—2020
酸或500g/L的氢氧化钠溶液调pH至4.0。4.2.6pH6.4的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和46.8g氯化钠（优级纯）加水稀释到1000mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化钠溶液调pH至6.4。4.2.7pH5.2的乙酸锂溶液：称取氢氧化锂（LiOH·H,O)168g，加人冰乙酸（优级纯）279mL，加水稀释到1000mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化钠溶液调pH至5.2。4.2.8节三酮溶液：取150mL二甲基亚矾（C,H.OS)和乙酸锂（见4.2.7)溶液50mL加人4g水合节三酮(C,H,O，·H,O)和0.12g还原节三酮(CigH1.O。·2H2O)搅拌至完全溶解。4.3混合氨基酸标准溶液
含天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸17种氨基酸，各组分浓度为2.50μmol/mL。17种氨基酸的摩尔质量见表1。
17种氨基酸的摩尔质量表
中文名称
天冬氨酸
苏氨酸
丝氨酸
谷氨酸
脯氨酸
甘氨酸
丙氨酸
胱氨酸
缬氨酸
高纯氮气
纯度99.99%。
4.5冷冻剂
英文缩写
水和冰以1：3混合。
5仪器与设备
5.1恒温干燥箱或其他干燥设备。5.2分析天平：分度值≤0.1mg。摩尔质量
中文名称
蛋氨酸
异亮氨酸
亮氨酸
酪氨酸
苯丙氨酸
组氨酸
赖氨酸
精氨酸
英文缩写
摩尔质量
5.3水解管：耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管，体积20mL～30mL。用去离子水冲洗干净并烘干。5.4氨基酸自动分析仪：三酮柱后衍生离子交换色谱仪。5.5水相滤膜：孔径0.22μm。
nKaerkAca-
6样品及前处理
6.1取样
6.1.1取样品（50士1)g和（1.0士0.1)g各两份，共4个样品。6.1.2将两份（50士1)g的样品按GB/T6503一2017中的箱内热称法测试含水率。FZ/T50049-2020
6.1.3两份（1.0士0.1)g的样品分别剪为长度不大于0.5cm的短纤维并称取0.5g，精确到0.1mg。将称好的试样置于水解管底部。
如果已知待测试样中蛋白质组分的含量大于10%，将取样量调整为0.1g，精确到0.1mg。6.2水解
向水解管（见5.3）内添加6mol/L的盐酸溶液（见4.2.1）15.0mL，再将其放入冷冻剂（见4.5）中，冷冻3min~5min，然后向管内充人高纯氮气（见4.4），约2min后迅速盖上瓶盖密封，再将水解管置于（110士1）℃的恒温干燥箱内（见5.1），水解22h后取出冷却至室温。6.3去酸
打开水解管，将水解液过滤并转移至50mL容量瓶内，用水多次冲洗水解管并以此洗液冲洗滤纸上的固体残留物，合并洗液并定容，混匀。用移液管移取1.0mL滤液于5mL烧杯内，置于50℃恒温干燥箱内干燥，残留物用1.0mL～2.0mL水溶解，再干燥，反复进行两次，最后完全蒸干。6.4溶解
用移液管取0.02mol/L的盐酸溶液（见4.2.2)1.0mL于烧杯内，充分溶解6.3中所得残留物，充分溶解后用0.22μm孔径的水相滤膜（见5.5）过滤，供仪器测定用。7测定
准确吸取0.2mL混合氨基酸标准液（见4.3），用0.02mol/L盐酸溶液（见4.2.2）稀释到5mL，此标准稀释液浓度为100.0nmol/mL(2.0nmol/20μL），作为上机测定用的氨基酸标准液，用氨基酸自动分析仪（见5.4)测定试样提取液中氨基酸种类和含量，外标法定量。（色谱条件参见附录A，氨基酸标准物质的色谱图参见附录B。）
8结果计算
样品测定液中氨基酸的含量按公式(1)计算：XA
式中：
试样提取液中氨基酸i的含量，单位为纳摩尔每20微升（nmol/20μL）；（1）
c—上机测定用氨基酸标准液中氨基酸i的含量，单位为纳摩尔每20微升(nmol/20μL)；A；—试样提取液中氨基酸i的峰面积；A.—上机测定用氨基酸标准液中氨基酸i的峰面积。试样中各氨基酸的含量按公式（2)计算：3
rraeerkca
FZ/T50049—2020
式中：
XFXVXM
m×(1-W)×10%
试样中氨基酸i的含量，单位为毫克每100克（mg/100g）；试样提取液中氨基酸i的含量，单位为纳摩尔每20微升（nmol/20μL)；·（2）
将试样提取液中氨基酸含量由纳摩尔每20微升（nmol/20μL）折算成纳摩尔每微升(nmol/μL)的系数，无量纲；
试样稀释倍数，无量纲；
试样水解后定容体积，单位为毫升（mL）；第i种氨基酸的摩尔质量，单位为纳克每纳摩尔（ng/nmol)；试样质量，单位为克(g)；
试样的含水率，无量纲；
将试样含量由纳克（ng）折算成毫克（mg）的系数，无量纲；折算成100g试样中氨基酸含量的系数，无量纲。计算结果可表示为每100g样品中某个氨基酸的含量，也可表示为各氨基酸的总含量。计算结果以两个平行样品测试结果的平均值表示，修约至一位小数。9精密度
在重复性条件下，两次试验的差值不超过算术平均值的12%，超过算术平均值的12%的情况不超过5%。
10试验报告
试验报告应包括以下内容：
a）样品的名称、规格；
所使用的标准（包括发布年号）；c)
测试结果；
经协商后对试验步骤的修改提示及其他与本标准不一致的部分；观察到的异常现象；
试验人员和日期。
-KaeerKAca-
附录A
（资料性附录）
色谱条件
FZ/T50049—2020
由于测试结果取决于所用的仪器，因此不可能给出分析的普遍参数，采用下列操作条件已被证明对测试是合适的。氨基酸分析仪色谱条件如下：1）离子交换分离柱：蛋白水解柱4.6mm1.DX60mmL；2)
分离柱温度：57℃；
反应柱：内置情性金刚砂小颗粒反应柱，4.6mmI.DX40mmL；反应柱温度：135℃；
检测波长：570nm、440nm；
进样量：20μL；
流动相及洗脱程序见表A.1。
流速/（mL/min)
流动相及洗脱程序
KaeerKca-
FZ/T50049—2020
附录B
（资料性附录）
氨基酸标准物质的色谱图
氨基酸标准物质的色谱图见图B.1、图B.2。mV
检测波长570nm时（通道1）
-KaeerKAca-
FZ/T50049—2020
检测波长440nm时（通道2）
-KaeerKAca-
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。