【行业标准】 乳及乳制品卫生微生物学检验方法 第6部分：柠檬酸杆菌检验

中生人民共和国团人童检验检府行业标准sN/T 2552. 6---2010
乳及乳制品工生微生物学检验方法第6部分：柠爆酸杆菌检验
Micilical exmati HT mik ATe Eus hyicPart b: tteceinm t Cepeencier spp.2010·05-27 发布
数码防件
国家威监世格验疼总质
金品伴网ht
2010-12-01 篇
然/汀22及乳制品卫4该4谢学金验法分为下一个部分：第1部分：聪栏指南：
一第2部分检验样的制备释：
第：部分;酵所、每幽菌学计数；“”第「部分嗜冷国微牛菌学计激：第部分：沙门长茵检验，
一.第6部分柠檬酸朴离检验
第了部分：熙沟肠杆菌检验：
第8部分：普温密形科菌和奇外变形格图冷：第部分：克件低菌检验：
第二0非分：版.奇场标荣检验负没费来法：第部分：蛇样麦伯杆菌的分离一汁数。…第1部分，单核卵脂增斗李特无菌检测与计数，第13部分：假总抢菌属的分商与计数本部分是3N/T252第6部分
个分按搬（/，」200给前规刚草，本分出国案认证认可监督管理菱员公热出并门SN/F 2552.6--2010
本部分起单俊中国险验论疾科学酬究院、人总其和医回西白人境检验检疫扁、北京农牛荡技术渐究十心。
本部分主盈起草人：令卫华、张红至、出承学、考奔珍、土仙、张敏爱赵贵明，http:
foodmate
1范围
及乳制生微物学检验方法
管6分：种檬酸菌检验
5V门2552的本部分规定了乳制中格家骏车紫的股可能效计数方法。本部分延川于乳粉控琦骏杆岗（属或御的鼓叫能数检验。2规范性引用文件
SN/3: 2552.6--2010
列文性对小文件的应乐必个学的原注由期的用件假期的版活用上义件、凡是不注别的引出文件，上最新版个（他括有的修改单适用子合文件，N/533.」穿熟据衍备指南第：察分实验案济累制备质些保训通则N/T1538.2倍在基件拍南第2前分：倍养蒸性能测试实用报有N/2%.1乳放乳衍站卫小缴生物学检验方法第1部分：取栏指南3窄语利定义
以下尽谱和定义语月于入文件。31檬酸杆菌oehuctanspg
核蒙像茵拉」学名itrooacerW:rkriuy都cile，l32)，量氏阴性兼性厌氧医。白杆闲、白径约m长们m,0m。有烂吸相发酵两和代谢炎恐。氧化酶所性。动方试验、试验性，能利用柠樣骏谢，能够化明较，！髓试验和试验谢性。极据治然氏细菌学分类予严，穿檬榜村圆周分为像梭扫菌e）科成化家峻打菌（.dirsus)和无内二酸盐柠徽骏杠谋(Camalonatirus)三个和
1仪、器具及标淮菌株
4. 1 水浓稻:45 -1
4.2培养箱:3 ~37
,3 吸管:1 mL.5 ml. 10 .
4.4接和坏：直径3mm
4.5天中谢|只。
4.样品橘释随1,o.和2ri拍简或件适稀释板4.7培养：古径inm：
4、8柠檬鞍杆菌标准菌槟：第长柠機胶刘菌ATC138,科氏柠曦酸杆菌AT02716，无内酸盐柠傻酸杆菌AC47（或其他能潮熙到1第菌殊的你雅菌棵）1
http:
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S/2552.6--2010
49A所F信化监是试到盒或奖低产4. 10VTIEK生化鉴宗系统或奖似多泽5试剂和培养
四硫演酸盗透绿曾卤肉滋（113）：A甜来A第1章沙武离点贺法繁分离琐（的现剧，萨章亚硫酸铋指（HS)：双附录A第：营赢脂A除求AA
氧化试验武剂：见降录人两A，章5、5
半国体踪指：见图录A第A.6章
ONPG试验路券据：见限录A第？
四蒙民柠像较社塔拆小，见甜算DNA酶甲最绿影指：现阴录A第A常营差明胶：见附录A第A.IC，
V-P我验培养基及式剂：元及A产小粉酸发醉培养速：见附第A蔡，？宝\戊糖醇发酵培养基：死附录A筑亲，三糖铁境当：九阳录A第A1I章
马纸俊增格桌，见附A笋，1：完蛋白游水（颜某验用虹酬录部16产内”酸钠培养蒸：四附录A等A.1取样
按$N/2552.1找行：部分采出一第品法完己给测样品的柠像酸托菌，该片法能检测样混甘少的H探菌，该方泌率少3
7测步
7.1增菌
无菌称取栏品130g，lc和1g件份分级如人2080ml.20r.t.和00l样品稀科瓶中，加人9倍预热到45的火岗蒸增小1：1格料）戒产将￥品直按格就到装存倍预热到45%的火菌蒸馆水的样品稀释瓶中派部使样品究分现：路获hh分移取增养18h~-21的标各1！m，加人1元硫蔬酸盐烨绿增菌肉荡（T中，36℃=1C席养 18 1:-~24
7.2分离培养
轻轻油到增菌液，每份增用滚川按平要平沙民阅志锐菌分离原脂（密）平被，业航酸秘琼脂（BS）中板。采用法破国这线以得单个落，极倒界1，S廉脂平极培养）AP2V牛化些案统是品达牛喇降J接公供的产张的商品名：给出这竹息是为了方便六部分的使用誉，并不及示对成为汉，是其油举效产品上有相的效来，期可使，这些等效产品。http:
1h4,款后平板培亲10h18h
$N/E 2552.6---2011
从下极：严成价别排职个5个市期差游，在需养原监斜上纯化济养。柠酸酸菌在惊肥板「的可舒范落为圆形，价色超价色案落，惑粉红信，期件中心菌密在5源脂平摄上的可爱菌落为核绿色或标黑随格7、3分离整定
7.3.1方法璇择
求排选的荫体进行学民烫负，留化裤战业化鉴点，量单民染色所件，复化驹诚验阴体按732进行礼步生化点验，对+需发签完组种的离体用古接出A月2E生化鉴定试烈盒V门EK2化驱定欢经改性能相似的产品门崧违牛化多亲7.3.2初步生化紧定
使引带养境脂平搬或面【纯化分离范新雄培：努（培养时间不断过24避行动力试验（NP试验柠摄腰战试验A降标验：感听液化發和V让验：动力试验NG试验和柠概酸盘点验筑准A韵验成叫疫率东）和：战验到性的落为格檬股料陶加细闲，市次书背养蔬指纯化增养h泌片，以1生花验7.3.3生化紧定
重加营养琼据1的新能增养物、率海付间个净乱按及1各真生化试验士行行你设杆菌各种的鉴定，也可诚用AI20生比监处武新V化将家系舒性能相似的产品进行生化鉴定表1漂酸杆菌匾生化穿装
准斌绘
水杨设发球产酸
性降发
产硫效气
鸟织设脱核响
就基质
大酸利圳
弗酸扫商
科试柠段机
无风爱控酸补窗
(C uneremaler x)
：293图性：：7589：口用%
3结果判定舒结渠报告
8.1给踝定
柠德酸杆茵属
革兰民熟色院让，氧化商实验期性，生代成度这个732要求的虚露，划家为柠像酸杆属细菌，8.1.2柠酗杆菌
革“长卖包性，氧化练实防性，生化成活显气732知3.3中表：的生化度应结共作符，http
SN/3 2552.6--2010
或根据生化鉴定试剂金、生化鉴处系统创中际酸环国展和的绍果：以州定为特定的柠像龄杆菌。8.2结器报
生化整定结果符合产蒙慢汗霜牛化特性接陈单学两国性瓶数：应用MPN装（贝附录H），弯出每100g样品中的M件冷测给票摄告步行1降品中控像酸杆医（高或种）的MP值http：
Foodmate:ne
（聊教密附晟）
培养激利剂
SN/T 2552.6-2019
为保证培养热的质量：宜按原SV/T1338，！和SN/T1538.2对培养基进行质量控制，也川使用合SN/T1538质量热求的商品化游水合贴养：A、1
四硫磺酸盐煌缘增菌肉汤（T）
及.1.1饿分
4,1. 1. 1
微酸钙
硫代硫酸钠
蒸馏水
A.1.1.2碘密液
殡化钮
燕璐水
4，1,2制备涨
1 000 ml.
将基础音将基的各成分力人蒸水。热容，检止1H至7.0，分装特瓶100ml.。分装时应随时，做只中的碳酸钙混匀，121心高正灭菌5m每用：临用时每100ml基础培养基中加人碘率液2ml.c.1绿游液1mt.
A.2琼脂
A.2.1成分
基硼或分
A.2. 1. 1
4肉膏
经方乐
三号盐
蒸留水
宝全培养湛
基础培养基
http:
1000mL
T ooc rnl.

SN/T2552.6—201D
柠樸骏钠
硫代硫酸钠
10为宁檬酸钦溶液
中性红溶液
C.「%煌绿溶液
A.2.2制备方法
加热游化基培齐幕，按比例人上述除料外的名成分，光分得到，校正率7。，加人中性红和煌绿溶波，倾注平假。制好的培养基汽些1恢出：收保存下冰籍内」48内使用。：泄好能银济液在01内货压，
亚流琼睛（BS)
A,3。1成分
强白陈
牛肉黄
硫酸亚铁
磷酸氢一锅
柠橡骏铋铵
业硫骏钠
蒸馏水
A.3.2制备方法
将前直种成加人300n蒸馏本中
A.3. 2. 1
8. +* 8-20. 11 g
. 020 tml.
.3.2.2柠蒙酸敏铵和业统酸钓分5厂5℃m1蒸水溶解，2.3.2. 3将胎于60)ml馆水1素沸溶别冷率左有A3.2.4将上述没合并补充水率1000m1，校正H7：人5为焊绿游液，冷动至50~55%：癫注平…
注，此率养我不流恶高正求最。制各过得不当证分将，以游负评然选择性，应产忙用前天制备，请存下车望处。超过48h不定使川
A.4营养琼脂(NA)
A.4.1成分
鲨向陈
牛肉萨
蒸馏水
htt
-5. t g--20. 0 g
及,1. 2制备方法
SN/ 2552.6--2010
格除琼脂以外的各成分滚解T蒸增本加人15乐益气化销溶额约2m1调书至7.310.1北人琼脂，加热盛沸，使晾谢化。分装就询文正成南历。注：此培养基可供般到尚之证领注设或成能：如用「菌露计数球脂盘1.，如制件度板成余川为
A，5寰化酶试验试剂
A.5.成分
A.1.11%盘酸“基对米胺浮滚，少最潮密配制：冰箍内避保存，A.51.21%a系龄乙醇深液。
A,5.2试验方法
主，521取片色洁净滤纸污取菌落·：滴清酸“！基对果一胺试剂，阳怪者量现粉红色·并逐新加深用加会盼-需溶波，滴.用性许下.5m为品现鲜益供，既2mu内不变色。5.22尺毛纠吸管吸取试剂。自接滴定陷落「；用非减与以「款验相同。A.6半固体琼脂
A.6. 1成分
牛肉窖
氯化钠
蒸耀发
4、6.2 制备方法
0.3: g-~C. 4C E
将各成分厕人馆水中，部落解，调节p，1起7.分装6mmx100mm成管。21%高压灭菌.5 uin.直次避片备用
注：实决力烈察、以种课存、Ⅱ执原位判变齐价骚掌日。4.6,3试端方法
穿刺接种烂茵株培养物（着不避21「“培养1～24h观察结果。等刺线匝量例称散的混滤状生长时，为阳应：在离！涩穿刺经主长前为防性度成，A.7DN试验培养基
A.2.1成分
邻硝志期3-D半乳糖（ON1）
c.31 mol/酸点一缓冲液
1终年良豚来（p117.)
ht
SN/T 2552,6--2010
A.7.2？制密疗法
将0NP游于磷酸氧二俩缓冲波！过滤除！2！乐灭前15mim的白陈水中，泥勾分装15m×100mm试肾，我约2概尝品限保乎2！8℃冰箱，间供1个月用，如变英成弃表
A. 7. 3试验方法
在原指斜血「洪培养物.3“音养3121h，规察结。若产牛毕乳糖谢、则谱器物」h3变黄色不变傅西蒙氏柠瞰盐培养基
A,.1 成分
七水合梳骏美（MgsO.·7门：0）磷酸氨二铵
磷酸氧纯
柠檬酸钠
0.2兴狼里滑蓝溶液
蒸馅水
A.我.2制案方法
先将类物压川人蒸翊水中H游至川人琼脂、加热溶解加人浪甲酚蓝济液润的，分装15mm×10）mm试管.便试湾房部高约为3m，121C尚法火案15min-携成面各用。A.8.3试验方法bzxZ.net
接种·环鲜菌株培养物（音洛时间小子24h)到培希基中，36℃=1℃培养181~24h，培烤题色变为落色为阳性反应，绿色为防性发成，A.9DNA酶甲基绿琼脂(ITA）
焦.9、1成分
蒸础成分
胰蛋白踪
批物炼
氯化纳
氯化钙
http
1.9.1、2甲幕绿溶液
SN/T 2552.6--2010
制角0的十情缴水落液。川等本积·原中惊，欧了批势，占到一氛平烷色为十，过除限“有备用
A,S.2备方法
海谷证股分印水徐热，免形成谢案性必次物，校正H至，高压灭菌。每m灭菌是研蹄基中剂人1间升震绿济浓，便甲绿终液虚为0.Co5为元.3.3试除方法
游沙闲来培养物（养别间小中4在川A最酷板「划线或点穿度钟，36！1培养[8~2h后观察结果，阳性友应个平板上能变察到清骄的州A降解区带阴性发府为雾状区带，表本1NA木降解，
A.10当亲胶
A、0、城分
牛阁没渍
蒸雷水
pil6, 8~-7,c
表，1G.兴制备方法
I t:n mi.
将卒成分加人获籍水小灿热游解分餐u人100mu，调11学7.4么6。121高火菊10，政出=巡满冷部便其凝固。复驶终nH为67.0.及，1.3试验方法
用接种针穿制接种新解闲株培不物（培养时间小12h）86℃1C落雅2h21压观浆，号7内明度水解，月在4或冷小欲放登30量以股伤不整用，为唯反应。否则为的性反应，A.11-r（Warskauer)试验培募基及微剂A，1冲蕴糖自陈求
点.11. 1. 1分
磷峻氢“钾
A，1，1.2裔方法
药名成分人感微水前灿热游解，谢节分装m义m点管得擎「：http:
Sr/T 2552.6--20113
高压炎些Ib min,
.11.2.试剂Voges-sikr
4、11. 2. 1 成分
甲液蔡
956之册
乙波氯瓦化钾
蒸馏水
A.11.2.2制禽方法
.Jt.3 nr
游茶酸游乙能中完全法部成液化饼斯酸密十蒸水中统金游解制成艺液，保有“浓箔
焦,11.3试验方法
接种新鲜菌球培养物（培弃心41.3：+1℃.音养2h~18h，加入P年乙液诚剂后“一1“养，阻件度应率感寸数分内用原经为检反应，应在36，培部市进行察，
A.12水杨酸发醇酵培养基
A.12.1成分
牛肉膏
氯化钠
降酸（IIPH
0.2%澳密容草酸蓝浓效
蒸谱水
A.12.2制备方法
将上述我充分解。巨小配制：的水粉骏济滋与其础培养鼎同耐于：21高压灭销1mm，使用时接5的量将水杨俊落液邮人本件养草无能探发分装15×100mm试管A.12.3试验方法
挑联少量辛部物接种水伤毅增募件元：席并48并随时观察颜色整化。济液变为英作为切性反施，角为创性这应。A.13I-戊糖醇发酵焙养基
A.13. 1成分
牛肉离
强白豚
http
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