【行业标准】 乳及乳制品卫生微生物学检验方法 第9部分：克雷伯氏菌检验

中华人民共国人境检验检疫行标准SF/r2552.9---2010
乳及乳制品卫化微生物学检验方法第9部分：充留伯氏菌检验
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N产2552乳及制品卫中微牛物学险方法分为个部分第1分腋译消南
第2部分，检验样品的制备与降评第3部分降见，每通内够计放：
第1部分：哗冷菌微升崧菌路汁数：第5部分沙门民菌验：
第6部分产檬龄菊检验
二-第7部分·附沟们案检验;
--筑部道变杠影和前足形医途
…--第9部分·克尚价民案检验；第I℃部分版崎物杯荣检验鱼妆装证认笋部分：蜡样参扭杆荫的分家于数。筑！2部分单磁细跑曾少会斯萨会测可计数；第部分：假单独酒的分商计数：本部分共SN/T2552的绘5部分
本部分按照1209给出的则车
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本部分超草单位：中国检稳格度学研率所中人民计和国大净出人境检验检疫局本邪分主系驱草人：账，高旗利新贵御游潔径刘培、米海英foodmate.net
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克击们民内K）为肠托菌新的：品。根班在全细菊分类达，将克需们式病分成5个种：市提克百伯民第（K）产克的议尚克需伯民图（）4克带们菌Kptanirua）上牛克手伯离K，rigen解鸟氨克市伯以巢R，ernithinotvica）其肺炎点需值氏菌支分成3种，炎件菌利炎业种（.你.munae）斯爽克需伯民菌奥男平种（sew和师富信民最漫亚种（，siostern），为惯士称谓师炎克雷们氏菌、是异完需伯菌私吴逆统支雷佰无萨。中于直生克市作低菌、上生克需伯氏菌和解鸟氨暖京需价氏菌不其有卫牛恶义，因此本部分举定的克言们天菌仪包拓肺炎克需伯民菌肿炭亚种师炎克害们低茵是单业利、流烫可年代菌桌使结业和产敢克带们眠菌。完需伯氏岗是最重要系伴微病菌之，对人然将别是会装力衔下的人咋，易可发肿炎肝脓肿膜炎、脊髓炭、收血产、结场炎及食物中奔等淡病、A门/WI1）、2C04年在I内瓦召川的\要儿斯方奶粉中酸畅胸什育和其他微牛场“的联期会设多点而任民南列为婴儿配方奶努中的病原菌，要求成员国实施有效的蓝控措施，渠章婴儿用方舒份喂婴儿的安全年调在报当装明婴儿能方奶粉中污染肺炎克带伯底菌和酸克言伯氏菌的含量较低，肺资克需汇度消含量019CFL/100g-~46.23CFU/10C产酸克出价既苗污染经支为0，5CT7710）~1.1？C/10g，为北，定性检测收样品研定为3义103定量格测股栏量确为333*，以尽可能冷测片性品中含量少的出标阅http:
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乳及乳制卫件微物学检验方法
9分菌检验
/ 2552.9 -2010
SN/T2..2的木洋分规定了乳粉4点主们民前（师炭克需伯民两、产酸贞带价氏窗）临检验方法。本部分适用了乳粉中完需伯民菌（脂炎点出们氏菌、产酸克简伯低商）的检验·其假乳及乳制品叫象照使用，
规范性引用文性
下列文件对于本文件的成尚好必不可少的，悬注！的引用文待，仪注日期的版个点用十本件，凡是不注工的引历文件，共最新版本（付括证在附修单)运于木文件。SN/2552、1乳及乳制品14缴生物学检力法第」部分：取样指南N/个别2.2乳及乳制品生微生物学检验方法第2部分：检验样品的制备号稀弹3术与定义
下列求术语和定义插用于会受衍。3.1
克富伯氏菌en
克百民菌拉丁学名ketsellu，为肠杆菌科的·个高，符合肠村菌科宠义，具英膜、儿教活的革兰[阴性除杆菌，交小（.5m~08）实（um单继、成双成签链状排列：发醇肌醇或叫东醇，不产生IS和乌氨酸顺羧悔、培新塞和试剂
4.1场杆带增菌肉汤（上L为汤）：风附A第A1意4.？麦康凯肌能阿系尊羧遇与击素境脂（MA）.翁录A第A.3产43个化海诚验证剂：卫附录A销八，单。4.作营养琼脂(NA):五附录A穿A,A 章：4新小验培养基：见附求A第A.！章。4. 6染试验增养基及示剂:见苏录A第A.单除男有规定外，所上剂均为分情纯，水为蒸储水。5设和材料
5.1水浴箱：15 -9.2T
5.2温度计:1~55,分刻度9, 1
5,3培养箱:36 ℃「。
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SN/T 2552.9--2010
5,4吸德;10 l.分刻度8.1 m..
5.5试算:15 mnx 100 rn
5.6灭菌wL, mmX0 .
5.7 挖种环:3mm自径。
5.8大：谢程2kg·换员u：8
59灭菌的样品处埋器只最样每剪儿：厂踏5，10样品稀释版：12m1238#和21滞降载5. 11
克出价氏菌压控菌珠：A883
A互场杆离和H他来兰武茶菌减剂常或美似产嘉，VITE自动微生物分新系或类似段在：6i检测
6.1方法提要
料积中克市伯民新的性检验力法：产减3分100可份样法行预增制、选择性增菌分离及生化鉴定等出刘乳粉中可半存个的的弱有家性检验，定最检验来用“管”的菌的MPN法，至少者要333g样品以检酸栏品中常最之约用不同6.2检验程序
克出价低菌的检验在序见图！
检样100 3,0 88 0入0内南蒸说
56 y + 28 t--22 3
0H内）
18:- 22h
A平据
力、英聚烈区，，年在染色，氧女齿21 23 .
穿让，龄测
含MPV报
图1卢需们总菌的检验辉案
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foodmate.net
h.3定性检验
SK/T 2552.9--2010
6.3.1收样和制备安3N/T2：和5/152.2供行。按无用操作称量3价100多检样分别微！3瓶2品稀释瓶中，加入就m，购热河小，的求精然留水中，或者将检品百接你量到装个9倍预热到两火国蒸馅小的样出稀瓶，握，您检样充分混剑：1【养181~22，6.3.2分别移培养8h-2·前点滋名1人到90mF内滋中36+培养18~2%hG3轻轻溉创FF增离凌，用径州的密神体按川区法按和乎A心平板，C计培养181221，观察平极1的菌落形态.年MA：平「克值低随的案落形您为遗彩突退湿润治滑的包萄落：度衔为2~
6.3.4从MAC平被1排较个可感网新分做动市验并接抑到NA极1.36℃11（培养15 F-22 h.
03.5将34中NA平板上的增整物做书#、送染色、氧化嗨试验：无泌力，市“民色阴有英赖，气化啊款验闻性者，校衣，进行生化驱，也可应用A用证生化鉴出减剂盒惑VEK4化鉴定系统进行生名鉴处
6.3.6克需氏两属菌化特性成表、表1宽留的氏商属细菌生化特性
牛化特”：
柠蒙發品
赖城设悦发府
致氨酸悦股酶
果酸酸酶
打蒸克击价氏东收淡种服决克弯们试菌实染亚神批炎克行伯民数夯题结业冲+
%9路件保不系终8阴性
6.4定量梳验
酸鼎需伯我来
6.4.1按菌携作取1009、10险存3份分则臂121250m1125m的样品帮释瓶中，订人3伟预热到4；C的火菌蒸留应（：1：评率）.成者将检样直接称量到装有9倍预热到45%的灭案蒸辫水的样品痛瓶中，派超彼检样充分活61%增养18h-22642从上述9瓶增菌液分移反属液双.加人到90m1.F肉汤中，36℃培养822h.
6. 4. 3操作同 6. 3. 3 ~~6, 3. 6,？结深报告
7.1定性检验结累报
根题生化鉴定装来，者3份冷栏中至少“份停试为用性报替年0品样品中检出何钟成间业种3
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SN/2552.8.2010
克雷伯氏菌，节份检样均为阴性。侵化年群与中来检出克需伯长菊。7、2量检验结果报告
生化鉴定绪果符合克雷作良菊特性殊：李菌培花引样管数：属剂MN友（见附录B）·背出每0品样品的克管伯民菌MPV值。给验结乐求牛太舒样品中克需作氏术属其体种或亚说最近值
http://foodmate.net1肠杆荫曾菌肉汤（起煎肉汤）
A，I.成分
满萄糖
梭氯兰钠
谢二氧弹
牛肌盘
蒸馏水
A.1.2制法
(抑菊性附录）
培养基利试剂
I oto mt
SN/12552.9—2010
市依用纯净的牛胆盐和煌，减少对受损伤且数量极少的杆菌的生长抑制。将备成分加人蒸懈水中.灿热点沸，调节pH至7.「0.1,分装适文溶器：15高压灭随mn,涮成的培养表为绿色可放置2：8冷适保行，周内使用，A，2麦康凯朋醇阿东醇羧青霉案琼脂（)A2.『成分
刚东醇
氯化钩
蒸馏水
A.2.2制法
I 090 mt.
特衍成分灿人蒸馏水中，熟溶解，嵌草至7、「0.2，圳人0。1%结品紫水溶滋1ml1%中性红水溶液3ml分装适当容器，：高压灭南1.imi髓魔降至60℃不名，加人00 mg/m废毕青索（经0.22m滤膜过滤除)1ml.分浪勾：制成平板备月。A3
氧化酶试验试剂
A.3，1成分
四带对
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$N/12552.9 -2010
A3.2制法
将旧中基对茶二胺落下蒸谱求证现间惠片。装人您鱼前中减背于2下8冰第保存，叫在配制店子内使为。
A.4营养琼脂(NA)
A.4.1成分
翟白炼
牛离漫膏
熟化销
蒸馏水
A.4.2制法
将各成分州人蒸耀水，加热溶解调要.。名！“高压炎离「，制成评报各用A.5动力试验培养基
A.5.1成分
胰筛门陈
绿化例
燕馏水
A.5.2制法
Ieoo ril.
终各成分加人销水中，加热落解，调节以730，：分装1！mm×100mm试管121%高压火菌5m制成非固述高忘
吲哚试验培养基及试剂
嘟哚试验培养基
腹街门陈
氯化纳
蒸饼水
A.&i.2制法
toci ral.
将客酸分加人蒸蜜水中加热溶解，润书1年7.1：分装1mm00Wm试管，121商压灭15 min.
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odmate:net
A6.3吲躲试验试剂
对甲基然基苯甲醛
纯皮醇
继浓盐酸
A.6.4制法
SN/r2552.9--2010
刘中基氮请长中薛先溶于成萨中，降缓惯加人添战酸，混封保存子&冰箱httn：
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S阁/2552.9--2010
媒范·华衡武
就需伯低菌最可能数的检索表
接种量分别为10.3、1.06和0.1g时管法的表及95%可信区间裹B.1
阴排管数
三信家
性营效
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注：如果滚种显大0估，分期为：30。#，13.0用1.（，表中的数7和应小10信如采接独缩小0分别次11司心时，亲中的数学成持人借可限
15号：155066221211
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