【商检行业标准(SN)】 进出口动物源性食品中非甾体类抗炎药残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2190—2008
进出口动物源性食品中非留体类抗炎药残留量检测方法
液相色谱-质谱/质谱法
Determination of residues of non-steroidal anti-inflammatory drugs infoodstuffs of animal origin for import and export-LC-MS/MS method2008-09-04发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2009-03-16实施
本标准的附录A为规范性附录，附录B和附录C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T2190—2008
本标准由中国检验检疫科学研究院和中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局负责起草本标准主要起草人：于静、彭涛、代汉慧、李建中、安娟、林维宣、岳振峰、唐英章。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准I
1范围
进出口动物源性食品中非留体类抗炎药残留量检测方法
液相色谱-质谱/质谱法
SN/T2190—2008
本标准规定了进出口动物源性食品中20种非留体类抗炎药残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于牛肉、猪肝、兔肝、牛奶和鸡蛋中对乙酰氨基酚、邻乙酰水杨酸（残留标示物：水杨酸）、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、非诺洛芬、甲芬那酸、萘普生、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、氟比洛芬、萘丁美酮、舒林酸、托美汀、哚美辛和苯基丁氮酮残留量的检测2方法提要
用乙睛提取试样中残留的非笛体类抗炎药，经正已烷去除脂肪后，采用液相色谱-质谱/质谱检测。外标法定量
3试剂和材料
除非另有说明所有试剂均为分析纯，水为去离子水或相当纯度的水。3.1乙：高效液相色谱级。
3.2正已烷：高效液相色谱级。
3.3甲醇：高效液相色谱级。
3.4，甲酸：高效液相色谱级。
3.5乙酸铵。
3.6无水硫酸钠：650℃灼烧4h，置于干燥器中备用，3.7乙睛饱和的正已烷：100mL乙睛（3.1)中加人100mL正已烷（3.2），充分振荡后，静置分层，取上层液体。
3.80.1%甲酸水溶液（含0.5mmol/L乙酸铵）：准确量取1mL甲酸（3.4）和称取0.0386g乙酸铵（3.5）手1L容量瓶中用水定容至1L。3.9稀释液：0.1%甲酸水溶液（含0.5mmo1/L乙酸铵）（3.8）-乙晴（80+20，体积比）。3.10标准品：对乙酰氨基酚、水杨酸、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、非诺洛芬、甲芬那酸、萘普生、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、氟比洛芬、萘丁美酮、舒林酸、托美汀、吲哚美辛和苯基丁氮酮，纯度大于等于99%。标准物质信息见附录A表A.1。3.11标准储备溶液：称取各药物标准品（3.10）（精确至0.1mg），用乙睛溶解，配制成浓度为100μg/mL的标准储备溶液，一18℃冷冻避光保存。3.12中间标准溶液：分别移取1mL单个药物的标准储备液于10mL容量瓶中，用乙睛定容至刻度，配制成浓度为10g/mL的中间标准溶液，0℃～4℃冷藏避光保存3.13混合标准工作溶液：根据需要用稀释液（3.9)稀释中间标准溶液（3.12)成适合浓度的混合标准工作溶液，现用现配。
3.14微孔滤膜：0.2um，有机相
SN/T2190—2008
4仪器和设备
4.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。4.2组织捣碎机。
4.3天平：感量为0.0001g和0.001g。4.4均质器：10000r/min。
4.5振荡器。
4.6离心机：10000r/min。
减压浓缩仪。
超声波水浴。
4.9涡旋混合器。
4.10具塞离心管：聚四氟乙烯，50mL。5试样制备与保存
5.1牛肉、猪肝、免肝
从原始样品取出有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎混勾，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于一18℃冷冻避光保存5.2牛奶
从原始样品取出有代表性样品约500g，充分混匀，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于0℃～4℃冷藏避光保存。5.3鸡蛋
从原始样品取出有代表性样品约500g，去壳后用组织捣碎机搅拌充分混匀，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于0℃～4℃冷藏避光保存。在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化6测定步骤
6.1提取和净化
称取约5g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入适量无水硫酸钠（3.6），再加入20mL乙睛用均质器以10000r/min均质2min，再用振荡器振摇提取20min后，10000r/min离心20min，收集上清液于125mL分液漏斗中。残渣用20mL乙睛再提取一次。合并上清液，加人20mL乙睛饱和后的正已烷（3.7），振荡5min，静置20min，收集下层液体。40℃水浴中减压浓缩至近干，残留物依次用0.5mlL乙腈、0.5mL和1.0mL0.1%甲酸水溶液（含0.5mmol/L乙酸铵）（3.8)溶解，超声波水浴助溶30s后，转移至10mL刻度试管，用0.1%甲酸水溶液（含0.5mmol/L乙酸铵）定容到2mL，再加入2mL乙睛饱和后的正已烷混匀30s后静置，取下层液体，10000r/min离心后过0.2μm微孔滤膜（3.14），待测定，6.2基质混合标准溶液的制备
称取5份约5g阴性试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，按照标准曲线最终定容浓度分别加入中间标准溶液（3.12)或混合标准工作溶液（3.13），余下操作同6.1。6.3测定
6.3.1液相色谱条件
6.3.1.1色谱柱：AcquityUPLCTMBEHCi8，2.1mmX50mm(内径）,1.7μm，或相当者。6.3.1.2流动相及洗脱条件（梯度为线性变化）见表1。6.3.1.3柱温：30℃。
6.3.1.4流速：0.2mL/min。
6.3.1.5进样量：10uL。
6.3.2质谱条件
参见附录B.其中氮气和氩气纯度均大于等于99.999%。表1
液相色谱洗脱条件
时间/min
色谱测定
A乙腈/%
SN/T2190—2008
B0.1%甲酸水溶液（含0.5mmol/L乙酸铵）/%90
90～60
根据样液中待测物的含量·选定浓度相近的混合基质标准溶液.待测样液中非角体类抗炎药的响应值应在仪器检测的线性范围内。对混合基质标准溶液及样液（6.1)等体积参插进样测定。在上述仪器条件下，20种非笛体类抗炎药的保留时间参见附录B表B.2。液相色谱-质谱/质谱色谱图参见附录C图C.1。6.3.4定性测定
按照上述条件测定样品和混合基质标准工作液，如果检测的质量色谱峰保留时间与混合基质标准工作液一致，允许偏差小于士2.5%；定性离子对的相对丰度与浓度相当混合基质标准工作液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表2的规定，则可判断样品中存在相应的被测物。表2定性测定时相对离子丰度的最大充许偏差相对离子丰度/%
允许的相对偏差/%
6.4空白试验
除不加试样外，按上述测定步骤进行。结果计算和表达
>20~50
试样中的残留含量，按式（1)计算，计算结果需将空白值扣除。AxcxV
A.Xm×1000
式中：
试样中残留药物含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；A-
样液中药物的峰面积；
基质标准溶液中药物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）：样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；基质标准溶液中药物的峰面积；最终样液所代表的试样质量，单位为克（g)。m
测定低限和回收率
8.1测定低限
本标准的测定低限为：
吡罗昔康、托美汀、酮洛芬、氟尼辛：1ug/kg；>10~20
对乙酰氨基酚、舒林酸、美洛昔康、氟比洛芬、吲哚美辛、双氯芬酸、苯基丁氮酮、甲芬那酸：3
SN/T2190—2008
5μg/kg;
邻乙酰水杨酸（残留标示物：水杨酸）、二氟尼柳、非诺洛芬、布洛芬、萘丁美酮、托芬那酸：20uμg/kg；茶普生：25μg/kg；
卡洛芬：50μg/kg。
回收率
见表3。
化合物
对乙酰氨基酚
水杨酸
吡罗昔康
舒林酸
托美汀
酮洛芬
萘普生
美洛昔康
氟尼辛
二氟尼柳
非诺洛芬
布洛芬
氟比洛芬
添加浓度
(μg/kg）
20种非留体类抗炎药添加回收率（n=10）猪肝
85.7~103.4
86.9~106.7
86.6100.7
96.8~107.7
89.9~104.7
89.7~106.4
95.7~107.5
89.7~104.6
86.7105.7
87.3~101,4
86.4~98.5
85.5~104.2
95.6~105.4
83.4~106.3
87.2~102.2
95.7~108.8
85.4~102.1
88.3~98.3
86.5~98.3
86.9~96.7
93.2~102.5
83.2~100,6
86.5~102.4
84.7~103.7
85.7~105.0
88.3~103.6
84.6~100.8
85.3~104.5
84.6~102.5
86.4~103.4
93.2~104.1
89.3~98.7
86.7~103.2
93.4~102.3
86.7~96.5
84.5~103.5
86.7104.2
86.1~100.4
86.1~103.7
94.2~106.5
87.2~102.0
82.7106.3
88.3~105.2
86.4~106.7
88.5~98.8
81.3~109.0
87.4~107.3
86.7~98.6
91,3~104,7
91.0~107.5
86.7~103.2
84.7~105.3
82.7103.7
88.3~103.2
96.4~107.5
86.4~106.3
88.7~98.8
89.1~103.6免费标准下载网bzxz
86.4~102.4
84.9~102.3
97.3~108.3
86.7105.4
87.5~102.3
97.1~108.2
87.2~106.5
91.7~106.2
88.3~103.5
85.8~96.7
84.3~104.5
85.4~103.5
87.2~101.4
86.7103.2
84.9~106.3
84.3~97.5
82.4~106.3
89.3~99.4
83.1~106.8
87.2~103.6
回收率范围/%
91.5~105.8
93.5~105.4
85.9~102.8
85.9~106.5
84.5~105.3
85.9~105.6
87.5~105.2
84.7~105.6
84.2~102.3
85.9~103.5
89.3~102.4
88.0~104.8
85.8~105.8
84.2~104.2
87.2~105.7
90.4~108.9
87.5~106.4
84.6~97.5
87.6~108.2
87.2~101.7
81.8~103.2
92.2~106.7
89.3~106.4
96.0~107.5
81.5~105.7
85.3~106.4
84.9~105.4
82.5~103.5
85.4~104.0
84.1~106.4
85.6~105.4
90.6~103.5
85.5~106.5
89.2~104.7
87.9~104.5
84.2~102.8
84.5~105.4
86.5102.5
87.2~102.2
86.5~102.3
92.0~103.3
86.2~102.5
88.7~106.8
85.9~102.8
89.5~105.5
88.6~103.4
86.7~106.7
86.5~104.5
95.4~105.8
91.8~105.5
91.5~103.6
85.6~105.2
87.5~106.4
84.9~103.8
84.6~98.1
93.2~103.3
86.9~101.0
86.9~107.2
87.2~106.3
87.9~98.3
94.0~106.7
87.0~102.7
86.9~105.4
84.2~100.5
85.3~102.5
93.1~106.7
94.5~106.5
86.3~106.3
86.4~98.6
86.4~104.5
91,0~98.7
91.5~104.0
87.9~108.2
86.5~103.7
91.5~103.4
87.2105.1
86.2~107.3
82.6104.7
82.7101.3
94.2104.8
87.3~105.3
87.6~105.7
85.4~108.3
93.1~99.6
96.4~105.1
86.1~107.3
85.3108.4
84.9109.6
86.1105.4
86.7~98.6
87.3~108.7
83.7~106.8
83.4107.2
87.6~106.4
83.7106.7
83.4~106.6
83.8~106.2
93.0~105.6
84.7~106.4
87.1~108.3
87.6~105.6
83.7~106.4
89.5~109.5
88.3~106.2
83.8~106.4
82.7~109.6
87.7105.8
90.7~108.2
90.9~106.4
86.4~108.3
86.7106.7
86.4~106.4
84.3108.4
85.5~106.4
化合物
卡洛芬
蔡丁美酮
吲哚美辛
双氯芬酸
苯基丁氮酮
甲芬那酸
托芬那酸
添加浓度
(μg/kg）
84.3~103.2
84.5~96.8
88.2~103.5
84.2~103.2
89.3107.2
86.4~104.2
87.1~99.8
88.6~103.4
86.8~104.2
85.4~103.5
86.2~101.8
86.5~98.7
84.3~103.5
86.0~103.0
84.9~104.2
86.3~105.7
88.4~106.2
85.1~100.6
84.6~100.8
89.5~96.7
93.1~98.4
表3（续）
91.6~103.5
89.5~102.7
91,5~100,8
86.7~105.5
85.6~103.7
88.4~101.4
97.5~106.5
86.4~106.3
86.7~100.9
87.3~98.3
86.0~102.6
92.1~103.4
86.3~108.8
82.7~103.5
97.3~107.2
83.7106.4
88.4~106.3
86.3~103.2
86.3~97.7
88.2~97.2
回收率范围/%
82.3~102.2
84.5~108.8
85.7~98.5
86.0~107.2
92.8~108.5
91.2~107.2
91.7~108.7
89.4~105.3
84.9~109.6
88,0~98.7
85.2~106.3
82.3~99.3
83.6~97.5
86.8~102.5
93.2~106.3
87.4~98.3
86.4~105.2
84.2~103.5
88.9~103.8
85.3~97.4
SN/T 2190—2008
91.0~103.5
93.6~102.3
91.0~99.3
88.2~104.8
86.4~104.2
92.0~106.5
83.1~102.3
87.3~98.5
92.2~106.5
89.1~102.7
96.7~104.8
91.0~101.0
86.4~105.7
93.7~103.6
87.2~103.5
86.7~98.4
88.2~104.0
91.8~103.2
86.1~106.4
89.4~108.6
88.8108.3
86.2105.4
82.4~98.4
84.2~106.4
86.4~109.3
86.7~105.3
84.2~109.3
85.5~105.3
85.1104.3
82.7106.2
89.4~106.2
86.7107.9
83.8~106.4
86.9~104.3
90.6106.2
90.7~108.2
90.8~109.4
89.3~106.3
83.3~103.2
SN/T2190—2008
英文名称
Acetylsalicylic acid
Salicylic acid
Acetaminophen
Carprofen
Ketoprofen
Tolfenamicacid
Meloxicam
中文名称
邻乙酰水杨酸
水杨酸
对乙酰氨基酚
卡洛芬
酮洛芬
托芬那酸
美洛昔康
附录A
（规范性附录）
标准物质信息
表A.1非笛体类抗炎药的基本信息CAS号
50-78-2
69-72-7
103-90-2
53716-49-7
22071-15-4
13710-19-5
71125-38-7
结构式
分子式
Ci1.Hi2CINO2
CirHito
C14H12CINO
CuH3NO,S2
相对分子质量
英文名称
Flunixin
Ibuprofen
Fenoprofen
Mefenamicacid
Naproxen
Diclofenac
Piroxicam
Diflunisal
Flurbiprofen
中文名称
氟尼辛
布洛芬
非诺洛芬
甲芬那酸
蔡普生
双氯芬酸
吡罗昔康
二氟尼柳
氟比洛芬
CAS号
42461-84-7
15687-27-1
31879-05-7
61-68-7
22204-53-1
15307-86-5
36322-90-4
22494-42-4
5104-49-4
表A.1（续）
结构式
分子式
SN/T2190—2008
相对分子质量
C14HiiN2O2F3
Ci3HigO2
CisHi+O3
CisHisNO2
C1+HoClNNaO
ChsHisNOS
ChHaF2O
C15Hi3FO2
SN/T2190—2008
英文名称
Nabumetone
Sulindac
Tolmetin
Indometacin
Phenylbutazone
中文名称
萘丁美酮
舒林酸
托美汀
吲哚美辛
苯基丁氮酮
CAS号
42924-53-8
38194-50-2
26171-23-3
53-86-1
50-33-9
表A.1（续）
结构式
分子式
CiHieO2
C20H17FO3S
C15H1sNO3
CigHifCINOA
C1H2oN2O2
相对分子质量
化合物
对乙酰氨基酚
水杨酸
吡罗昔康
舒林酸
托美汀
酮洛芬
萘普生
美洛昔康
氟尼辛
二氟尼柳
电离方式
毛细管电压
源温度
去溶剂温度
锥孔气流
去溶剂气流
碰撞气压
监测模式
电离方式
母离子
附录B1)
（资料性附录）
谱条件
质谱条件
120℃
350℃
氨气，100L/h
氮气，600L/h
氩气，2.40×10-6Pa
多反应监测
多反应监测条件
子离子
驻留时间/
锥孔电压
SN/T2190—2008
碰撞能量
保留时间/
附录B所列参数是在WatersQuattroPremier质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器，9
SN/T 2190—2008
化合物
非诺洛芬
布洛芬
氟比洛芬
卡洛芬
萘丁美酮
吲噪美辛
双氯芬酸
苯基丁氮酮
甲芬那酸
托芬那酸
电离方式
a.离子用于定量：
母离子
表B.2（续）
子离子
驻留时间/
锥孔电压/
碰撞能量，
保留时间/
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