标准简介/下载中华人民共和国进出口商品检验行业标准
SN 0179—92
出口食品中四环素族抗生素残留量检验方法
Method for determination of the residue
of tetracycline series antibiotics in food for export
1992-12-28发布 ↑1993-05-01实施
中华人民共和国国家进出口商品检验局 发 布
中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出口食品中四环素族
抗生素残留量检验方法
SN 0179—92
代替 ZB X22 005—87
Method for determination of the residue
of tetracycline series antibiotics in food for export
1 主题内容与适用范围
本标准规定了出口食品中四环素族抗生素残留量的检验方法。
本标准适用于出口肉或肉制品中四环素族抗生素残留量检验。蛋类和水产品可参照使用。
2 设备和材料
- 2.1 平皿:内径为90 mm,底部平整光滑,具陶瓷盖。
- 2.2 不锈钢小管(即牛津杯,简称小管):内径6±0.1 mm,外径7.8±0.1 mm,高度10±0.1 mm。
- 2.3 游标卡尺:测量抑菌圈直径用。
- 2.4 均质器或乳钵。
- 2.5 离心机:4 000 r/min。
- 2.6 恒温水浴锅。
- 2.7 恒温箱:30±0.5℃,隔层必须水平。
- 2.8 电热干烤箱:170±1℃,器皿灭菌用。
3 培养基及试剂
3.1 培养基
3.1.1 菌种培养基
| 胰蛋白胨 | 10.0 g |
| 牛肉膏 | 5.0 g |
| 氯化钠 | 2.5 g |
| 琼脂 | 14~16 g |
| 蒸馏水 | 1 000 mL |
将各成分加热溶解于蒸馏水中,高压灭菌(121℃,15 min),最终pH应为6.5±1。
3.1.2 检定用培养基
| 胰蛋白胨 | 6.0 g |
| 牛肉膏 | 1.5 g |
| 酵母膏 | 3.0 g |
| 琼脂 | 14~16 g |
蒸馏水 1 000 mL
将各成分加热溶解于蒸馏水中，高压灭菌(121℃,15 min)，最终 pH5.8±0.1。
3.2 试剂
3.2.1 c(KH2PO4)=0.1 mol/dm³磷酸盐缓冲液(pH4.5)：精确称取13.6 g磷酸二氢钾(分析纯)溶解于蒸馏水，并定容至1 000 mL。高压灭菌(115℃,30 min)。置4℃冰箱中保存。
3.2.2 生理盐水：称取氯化钠8.5 g，溶解于1 000 mL蒸馏水中，高压灭菌(115℃,30 min)。
3.2.3 标准抗生素：四环素(TC)，土霉素(OTC)，金霉素(CTC)，从中国药品生物制品检定所购买。要密封避光，防潮保存在4℃冰箱中。
3.2.4 标准抗生素原液和稀释液
3.2.4.1 原液
a. 四环素原液：称取50 mg左右四环素标准品，用c(HCl)=0.1 mol/dm³盐酸稀释并定容至1 000 μg/mL。
b. 土霉素原液：称取50 mg左右土霉素标准品，用c(HCl)=0.1 mol/dm³盐酸溶解之，再用蒸馏水稀释并定容至1 000 μg/mL。
c. 金霉素原液：称取50 mg左右金霉素标准品，用蒸馏水稀释并定容至1 000 μg/mL。
以上原液保存在4℃冰箱中，可使用7 d。
3.2.4.2 稀释液
a. 四环素稀释液：取上述原液用c(KH2PO4)=0.1 mol/dm³磷酸盐缓冲液稀释配制成0.025, 0.050, 0.100, 0.200, 0.400, 0.800 μg/mL的稀释液，为制备标准曲线的最终标准浓度溶液，0.100 μg/mL的稀释液为参考浓度溶液。
b. 土霉素稀释液：与四环素稀释液相同。
c. 金霉素稀释液：取上述原液用c(KH2PO4)=0.1 mol/dm³磷酸盐缓冲液稀释配制成0.005, 0.010, 0.050, 0.100, 0.200, 0.400 μg/mL的稀释液，为制备标准曲线的最终标准浓度溶液，0.100 μg/mL的稀释液为参考浓度溶液。
以上稀释液均在使用当天配制。
4 样品制备
取肉样品约20 g，剪碎，称取其中10.0 g加入c(KH2PO4)=0.1 mol/dm³磷酸盐缓冲液20.0 mL，小心搅匀，放置60 min，置灭菌的均质杯中(9 000~10 000 r/min)均质2 min(或置灭菌的乳钵内研磨呈乳糜状)，经4 000 r/min离心30 min，其上清液作为被检样液。
