【SN商检标准】 松纺锤瘤锈病菌检疫鉴定方法

SN/T 3428—2012 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 松纺锤瘤锈病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Cronartium fusiforme Hedgcock & Hunt ex Cummins 2012-12-12发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 2013-07-01实施 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督检验管理委员会提出并归口。本标准起草单位包括中华人民共和国上海出入境检验检疫局、宁波出入境检验检疫局、深圳出入境检验检疫局等。本标准主要起草人为杨翠云、于翠、闻伟刚、印丽萍、戚龙君等。 1 范围 本标准规定了进境植物检疫中松纺锤瘤锈病菌（Cronartium fusiforme Hedgcock & Hunt ex Cummins）的检疫鉴定方法。本标准适用于来自发生该病菌国家和地区的松属（Pinus spp.）、栎属（Quercus spp.）及其他寄主苗木中携带病菌的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样。 3 原理 3.1 病菌名称及分类地位 学名：Cronartium fusiforme Hedgcock & Hunt ex Cummins。别名：Cronartium quercuum（Berkeley）Miyabe ex Shirai f.sp. fusiforme Burdsall & Snow。无性态：Peridermium fusiforme J.C. Arthur & Kern。英文名称包括southern fusiform rust等。该病菌属真菌界（Fungi），担子菌亚门（Basidiomycotina），冬孢菌纲（Teliomycetes），锈菌目（Uredinales），柱锈菌科（Cronartiaceae），柱锈菌属（Cronartium）。 3.2 鉴定依据 松纺锤瘤锈病菌的寄主范围、为害特征、病原菌形态及培养特征是检疫鉴定的主要依据。 4 仪器设备和用具 4.1 仪器设备包括立体显微镜、生物显微镜（含油镜和测微尺）、电子分析天平、普通天平、超净工作台、生物培养箱、高压灭菌器、冰箱等。 4.2 试验用具包括斧子、锯子、手持放大镜、手术刀、手术剪、磁盘、镊子、载玻片、盖玻片、量筒、吸管、酒精灯等。 5 试剂和培养基 HGYP+BSA培养基：含CaCO₃ 0.1g/L、酵母提取物1g/L、蛋白胨1g/L、牛血清蛋白及1.5%琼脂粉。 6 检疫与鉴定 6.1 现场检疫 6.1.1 症状观察 松属植物主要检查是否出现橙色病菌孢子及锤形或不规则瘤肿，瘤肿表面可见斑点并导致枝条折断。症状需与Endocronartium harknessii等病害区分。栎属植物主要检查叶片橙色叶斑及夏孢子堆，叶片可能呈杯形或卷曲。 6.1.2 抽样 如发现症状或症状不明显，均需按SN/T 2122规定进行抽样并送实验室检测。 6.2 实验室检测与鉴定 6.2.1 制样 通过挑片等方法制备样品，在显微镜下观察孢子形态或进行培养观察担孢子及锈孢子发育情况。 6.2.2 病菌主要形态特征 锈孢子器球形至梭形，壁薄；锈孢子倒卵形至近球形，具疣状隆起；夏孢子堆生于叶背，孢子卵形至椭圆形，具细刺；冬孢子堆圆柱形至梭形，壁光滑；担子具4个细胞，透明、椭圆形。