【地方标准】 食品中四种甜味剂的测定方法 高效液相色谱法

ICS67.100
河北省地
方标准
DB13/T1112—2009
食品中四种甜味剂的测定方法
高效液相色谱法
Determination of four sweetener additives in food HPLC method2009-05-27发布
河北省质量技术监局
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2009-06-11实施
本标准中的附录A为资料性附录。前言
本标推河北省质量术监督局提出并归口。DB13/T1112—2009
本标推起草单位：国家环保产品质最监督检验中心、河北省食品安全重点实验室、测北师范大学生命科学学院、河北医大学基础医学院。本标土要起草人：李挥、张岩、庞坤、周正、康紫芬、王丽霞、召品、刘散泽、杨小龙、张敬轩、范斌、刘东。
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食品中四种甜味剂的测定方法
高效液相色谱法
DB13/T1112-2009
本标准规定了食品中乙磺胺酸钾，糖精钠，环己基氨基磺酸钠，阿斯巴甜的测定方法。本标准适用于饮料中乙酰磺胺酸钾，糖精钠，环己基氨基磺酸钠，阿斯巴甜的测定本方法乙酰磺胺酸钾的检出限为0.05μg/mL；糖精钠的检出限为0.05μg/mL；环己基氨基磺酸钠的检限为2.0μg/mL：阿斯巴甜的检出限为0.05μg/mL：2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标推的引用而成为本标推的条款，凡是注白期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不违用于本标准，然而，鼓刷根据本标准达成协议的名方研究是否可使用这些文件的最新版木。凡是不注期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验门水规格和试验方法3原理
样品中甜味剂在酸性溶液中以阴离-广形式，选门含有类离子对试剂（tris)的甲醇水溶液作流动相：采用反相离子对高效液相色谱法分离，根据色谱峰的保留时间定性，根据峰高或峰面积定量。4试剂
除另有规定，所有试剂均为分析纯，为GBT6682规定的一级水。4.1醇：色谱纯。
4.2稀氨水(1+1):氨水加水等体积混台，4.3Tris储备液（0.5mo1/L）：称取6.057g三（羟甲基）氨基甲烷溶于超纯水中定容到100mL，混合均勾。
4.4乙酰磺胺酸钾，糖精钠，环已基氨基磺酸钠，阿斯巴甜标准品：纯度≥99%。4.5乙酰磺胺酸钾，糖精钠，环己基氨基磺酸，阿斯巴甜标推储备溶液：精密秤取乙酰磺胺酸钾、糖精钠各0.1000g，用超纯水溶解稀释至10mL：环已基氨基磺酸钠1.0000g，用超纯水溶解稀释至10mL：阿斯巴甜0.1000多用1：1甲醇水溶滋溶解稀释卒10mL；阿斯凹甜、乙酰磺胺酸钾、糖精钠浓度分别为:10.0mg/mL：环己基氮基磺酸钠浓度为：100.0mg/mL：T冰箱保荐。4.6混合标准使用溶液：取一定量上述标准储备液混合：用超纯水逐级稀释，配成乙酰磺胺酸钾，糖精钠，,斯巴甜为1.0mg/mL的混合标准使用液，环已基氨基磺酸钠浓度为10.0mg/mL的标准使用液。4.7混合标准使川系列溶液：准确吸取混合标准使用液0.00mL，0.05mL，0.10mL，0.20mL，0.40mL,0.60mL，环已基氮基磺酸钠标准使用液0.00mL，0.10ml，0.50mL，1.0mL，2.0mL，4.0mL加超纯水定容至10mL，配成标准系列。其中，乙酰磺胺酸、阿斯巴甜、糖精钠其浓度为0.0ug/ml5.0μg/mL，10.0μg/mL，20.0μg/mL，40.0μg/mL，60.0μg/mL，环己基氮基磺酸钠浓度0.0mg/mL，0.1mg/mL，0.5mg/mL，1.0mg/mL，2.0mg/mL，4.0mg/mL，置于冰箱冷藏保存。5役器
5.1向效液相色谱仪，带紫外检测器。5.2 超声波滑洗器。
5.3 离心机。
食品伙伴
5.4抽滤瓶。
5.5微孔滤膜：0.45mm。
5.6电子天平：感量0.0001g和0.01g。6分桁步骤下载标准就来标准下载网
6.1样品处理：
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称取5.0 g～10.0 g（精确到0.01g）试样，用氢水（1+1）调pH至7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经45um滤膜过滤，滤波作HPLC分析用。6.2测定
6. 2. 1 HPLC 参考条件
分析：C:e，4.6mm×250 mm粒度5μum流动相：甲醇：5mmol/LTris缓冲溶液（pH4.5）=5：95。波长：205nm。
流速：1.2 mL/min。
柱温：25 。
6.2.2标准曲线：分别进样阿斯巴甜、乙酰磺胺酸钾、糖精钠利环已基氨基磺酸钠标准系列溶液名10μL：进行HPLC分析，然后以峰面积为级坐标，以四种甜味剂的含量为横坐标，绘制标准曲线。6.2.3试样测定：吸取6.1处理后的试样溶液10uL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线查得测定液中四种甜味剂的含量7结果计算
试样中甜味剂成分的含凰按下式计算：X-×V×1000
mx1000
式中：
x一试烊中味剂成分的含量，单位为克每下克(mg/kg)：心一由标准曲线上查得进样液中甜味剂成分的量，单位为微克每旁升(ug/mL)V一试样稀释液总体积，单位为号升(mL)m一试样质量，单位为克(g)。
汗算结果保留两位有效数宁。
8精密度
在再复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。食品伙伴
1.乙酰横酸钾（acesulfame-K);2.阿斯巴甜（aspartame)：
附录A
【资料性附录）
四种甜味剂标准物质色谱图
3.环已基氨基磺酸钠（sodiumcyclarruate)；4.糖精钠(sodium saccharina)。图A.1四种甜味剂标准溶液的色谱图合品伙伴网httn：
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