【地方标准】 焦糖色中的4-甲基咪唑的测定-高效液相色谱法

ICS 67. 100
河北省地
方标准
DB13/T 1116—2009
焦糖色中的4-甲基咪唑的测定
高效液相色谱法
Determination of 4-methylimidazo aspartame in caramel HPLC method2009-05-27发布
2009-06-11实施
河北省质量技术监督后
h
http://foodmate.net/本标准中的附录A为资料性附录。前言
本标准由河北省质量技术监督局提出并归口。DB13/T1116-2009
本标准起草单位：河北省食品质量监督检验研究院、河北省食品安全平点实验索、河北师范大学牛命科学学院、河北医科大学基础医学院。本标准主要越草人：李挥、张岩、李强、刘泽、吕品、刘辰魁、主丽霞、康素芬。http：//foodm
atenet
http://foodmate.net/1范围
焦糖色中的4一甲基咪唑的测定
高效液相色谱法
本标准规定了焦糖色中4-甲基咪唑的测定方法。本标准适用于焦糖色中4-甲基咪唑的测定。本方法的检山限为5mg/kg
2规范性引用文件
DB13/T 1116-2009
下处文件中的条款通过本标雅的引用而成为本标推的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内）或修订版均不适用丁本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使刃这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适而本标推。GB/T6682分析实验用水规格和试验方法3原理
样品中1-甲基咪唑经高效液相反相C柱分离后，根据色谱峰的保留时间定性，根据峰面积定量。4试剂与材料
除另有规定，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。
4.2无水乙醇。
4.3三氯甲烷。
4.4三氯甲烷-无水乙醇萃取液（80：20）：移取80mL的三氯甲烷及20ml.的无水乙醇混合均勺用。
4.5碳酸钠。
4.6碳酸钠济液（100gL）：准确吸取碳酸钠100g下1000mL容量瓶中，用水定容至刻度4.7庚烷磺酸钠。
4.8磷酸氧钾。
4.9磷酸。
4.10磷酸二氢钾缓冲液（0.05mol/L）：称取磷酸二氢钟6.8g、庚烷磺酸钠1g于1000mL睿量瓶中，加水 900 mL，刑稀磷酸调节 pH 至 3. 5，用水定容至 1 000 mL4.t14-印基咪唑标催品：纯度≥99%，4.124-甲基咪唑标准储备溶液：准确称取0.10004-甲基咪唑丁100mL的容量瓶中，月流动相溶解定容至刻度。4-甲基咪唑含量1.0mg/mL，作为贮备溶液。4.134甲基咪唑标准使用系列溶液：准确吸取4-甲基咪唑贮备溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL5.0mL于50mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，浓度分别为20μg/mL、40μg/mL60μg/mL、80μg/mL、100μg/m的系列标准济液，置于冰箱冷藏保存。5仪器与设备
全品伙会
5.1高效液相色谱仪，带紫外检测器。5.2旋转蒸发器。
5.3电子天平：感重 0.1 mg、0.001g5.4分液斗：250mL。
5.5振荡器。
5.6微孔滤膜：0.15μum。www.bzxz.net
6分析步骤
6.1样品处理：
DB13/T 1116—2009
准确称取3g样品（精确至0.001名），加15mL水溶解，移入250mL分液漏-斗，加100g/L碳酸钠溶液15mL，加三氯甲烷-水乙醇萃取液60mL，剧烈探摇5min。静置分层后，将有机相移入另一分液斗中，水再按同样方法萃取一次，合并有机相：川100碳酸钠溶液洗涤提取液3次，每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中，50℃浓缩至近下，取下，以水溶解残渣并定容至10mL，经0.45um微孔膜过滤后供HPLC分析。6.2測定
6. 2. 1 HPLC 参考条件
分析柱：Cl8，4.6mm×250mm粒度5 μm。流动相：中醇：0.05mo1/L磷酸二氢钾缓冲液（pH3.5，含0.1%庚烷磺酸钠)=5：95。波长：210nm。
流速：1.0mL/min
6.2.2标准曲线：分别进标准系列溶液各10 uL：进行HFLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以4-甲基咪唑的含量为横标，绘制标雅曲线。6.2.3试样测定：吸取6.1处理后的试样溶液10uL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标雅曲线查得測定液中 4-甲基咪唑的含量
7结果计算
试样中4-中基咪唑的含量按下式计算：式中，
X=xV×1000
mx1000
x一试样中4-甲基咪唑的含，单位为毫克每千克(mg/kg)心一由标准曲线上查得进样液中4-甲某咪唑的量：单立为微克每毫升（ug/mL）：v一试样稀释液总体积，单位为基升计算结果保留两位有效数学。
8精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
（1）
附录A
（资料性附录）
4-甲基咪唑标准物质色谱图
Mdut血香
4-甲基咪唑标准物质色谱图
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