【地方标准】 乳及乳制品中4种β—内酰胺类药物残留

ICS67.100
方标准
河北省地
DB13/T 11072009
乳及乳制品中4种β-内酰胺类药物残留量的测定方法
液相色谱一串联质谱法
Deternination of four kinds of β-lactams residues in milk and milkproductsLC-MS/MS method
2009-05-27发布
河北省质量技术监督局
http：//foodmatene
2009-06-11实施
本标推中的附录A、附录B为资料性附录。本标推出河北省质技术监督局提出并归口。DB13/T1107—2009
本标推起草单位：河北省食品安全军点实验室、河北省食品质量监督检验研究院、河北医科人学础医学院、河北师范人学生命科学学院，河北省化学工业研究院。本标准主要起草人：张岩、李挥、张敬轩、吕品、刘辰魁、千丽被、李丛芬、范斌、康素芬、苏红维、刘敬泽、杨小龙。
//foodmate.net
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DB13/I 1107-—200
乳及乳制品中4种β一内酰胺类药物残留量的测定方法液相色谱-串联质谱法
本标淮规定了乳及乳制品+青霉紫G、卉霉紫V、氮苄西林、阿莫西林4种β-内酰胺类药物残蜜量的液相色谱一串联质谱测定方法。本标适用于生鲜乳、巴士杀菌（灭菌）乳和乳粉中节霉素G、再霉素V、氨芋西林、阿莫西林残留量的测定：
本标准的方法检出限：青霉素G、清霉素V为1.0μg/kg；氨芋西林、阿莫西林为2.0ug/kg2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标推的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）成修订版均不适用丁本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用支件，其最新版本适用于本标准。GB/6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样中的4种β-内酰胺类药物残留，用OasisHLB或相当的固相紧取柱净化，液相色谱-申联质谱仪测定，外标法定量。
4试剂和材料
除另有说明外，所剂试剂哟为优级纯：水为GB门6682规定的一-级水。4.1甲醇：色谱纳。
4.2乙晴：色谱纯。
4.3酸：优级纯。
4.4乙晴+水（1+3）：取25mL乙腈75mL水混合。4.5OasisHLB 固相苯取柱或相当者：500 mg：6 mL使用前分别用5 mL 中醇箱10 mL水预处理，保持排体湿润。
4.6青霍素G、菁霉素V、氮西林、阿莫西林：纯度≥99%。4.7青霉素G、青再素V、氨芒凹林、阿莫四林标准储备溶液：准确称取适量的每种标准物质，分用乙猎配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液，储备液贮存在-18℃冰柜中。4.8青霉聚G、书霉素V、氨卡西林、啊莫西林标准作游液：根据需要吸取适量请霉素G、节霉素V、氨苄西林、阿莫西林标准储备济液，用空自样品稀释成适当浓度的基质混合标准工作溶液。5仪器
5.1液相色谱-串联四极杆质谱仪：配有电喷雾离子源（ES1)。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3漩涡混匀器。
5.4固相萃取真空装置。
5.5贮凌器：50mL。
5.6微量进样器：25，100ul.。
5.7刻度样品管：5 mL，精度为0.1mL。管是伙伴欧htt
5.真然泵：真空度应达到80kPa。5. 9 pH 计：测量精度度 0. 02。5.10氮吹仪。
6测定步骤
6.1试样溶液的制备
DB13/T1107—2009
称取5g试样（精确到0.01乌）置于150mL三角瓶中，加人45mL去离子水，于漩涡混勾器E快速混合1min。样液移至下接QasisHLB柱的贮液器中，以小于或等于3mL/min的流速通过国相举取柱所，用5mL水洗柱，弃去全部流出液。在65kPa的负正下，减K抽T-20min，最后用3mL甲醇洗脱，收集洗脱液于刻度样品管中，于40℃水浴中而氮吹仪吹下，乙腈定容至1mL，摇匀后，供液相色谱-串联质谱仪测定。
6.2测定
6. 2. 1 液相色谱条件
色谱柱：SunFireTMc183.5μm，150mm×2.1mm或相当者。流动相及流速见表1。
并温：30，
进样量：20 μL。
表1 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min
6.2.2质谱条件
流速／（μL/min）
离子源：电喷雾离子源（ESI)。扫描方式：正离子扫描。
检测方式：多反应监测。
电喷雾电压：5500V。
雾化气压力：0.055MPa。
气帘气压力：0.079MPa。
辅助气流速：6L/min。
离了源温度：400℃。
水（含0.4%乙酸）/（%）
乙晴/（%）
定性离子对、定最离予对和去簇中压（DP），聚焦电（FP）、碰撞能量（CE）及碰撞室出口屯压(CXP),见表2。
6.2.3液相色谱-串联质谱测定
6. 2. 3. 1定性测定
在相同试验条件下，样品中待测物质与基质标准溶液中对应物质的保留时间偏差在土2.5%之内：样品色谱图中各定性离子刘相对丰度与浓度接近的基质标推溶液的色谱图中离了相对丰度相比，若偏差不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在该残留。6.2.3.2定量测定
在仪器最佳工作条件下，用节醇素G、霉素V、氨芋臣林、阿莫丙两林标准储备溶液配成的基质混合标准溶液分别进样，以标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为织垫标，绘制标准工作曲线，用标准2
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L作曲线对样品进行定量，样品溶液中青霉素G、声霉素V、氨芋西林、阿奠西林的响应值均应在仪器测定的线性范围内。
在上述危谱条件下，青紫G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林的总离子流图参见附录A，青霉紫G、青霉素V、氮莘西林、阿莫西林的保留时问见阴录B，表2四种6-内酰胺类药物的定性离子对、定量离子对、去簇电压、聚焦电压、碰撞能量和碰撞室出口电压
育衔素
青霉素V
氮西林
阿奠西林
相对离子丰度
允许的最大偏差
6.3平行试验
定性离子对
335/160
335/176
351/160
351/192
350/192免费标准bzxz.net
350/160
366/114
366/208
定量离子对
35/160
351/160
350/L60
366/208
碰撞能量
去簇电压
表 3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差>50
>20--50
按上述步骤，对同·试样进行平行试验测定。6.4空白试验
除不称取试样外均按上述分析步骤进行。7结果计算
>10~-20
聚焦电压
从标准工作曲线上得到试样中相应的β-内酰胺类药物浓度后：结果按公式（1)计算：X-CxVx1000
mx1000
x—试样被测组分残留，单位为微克每千克（μ/kg）。c--一从标推工作山线得到的试样溶救宁被测组分的浓度，单位为纳克每离升（ng/mL）。V一一试样溶液定溶体积，弹位为毫所（mL)。m——最终试样溶液所代表的试伴质量，单位为克（g)。注：计算结果需将空白值扣除。8精密度
在重复性件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。http
foomo+o
磁撞室出山电
附录A
（资料性附录）
四种β-内酰胺类药物标准物质的总离子流图四种β-内酰胺类药物标准物质的总离子流图，见图A,1。3.9e5
阿莫西林，2.49min
2—氨卡西，9.80 min
青霉素 G12. 70 min
4—青霉素 , 13. 49 min
参考保留时间/min
图A.1四种B-内酰胺类药物标准物质的总离子流图附录B
（资料性附录）
四种口-内酰胺类药物标准物质的参考保留时间表B.1
青莓索
四种阝-内酰胺类药物的参考保留时间青素V
http
氨芋西林
foodmatonet
DB13/T 1107—2009
阿莫西桥
http：//foodmate.net
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