【商检行业标准(SN)】 化学品 体外皮肤腐蚀 经皮电阻试验

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T2246—2009
化学品
2009-02-20 发布
体外皮肤腐蚀
经皮电阻试验
Chemicalslnvitro skin corrosion-Transcutaneous electrical resistance test (TER)2009-09-01实施
华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
SN/T 2246—2009
本标准等同采用经济合作与发展纠织(OECI))化学品测成方法N0.43（2004午04月）体外皮肤经皮电试验英文版）
本标准在标文个格式上按（/1.12%0做「下列编辑件修改：增加广范用部分；
将0ECD化学测试方法c.430中分方法的介绍I的、范用等孜为本标准的列言。不标的对录A为资料性际录。
本标口回家认证认可监督管理委员会提出并山口：本标准负克起草单位：中华人民其和国江苏出人境检验签设局。本标准参与起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检设局、十华人民！和国安徽山人境捡验签疫局，常州逆出口工“及消贵品安个检测心本标淮耍起草人：刘右峰、张少右、温劲松、江红星、陈小卫、陈明、上小峰：不标雄系气医发布的出人境检验检设行业标雅全品伴欧ht
SN/T 22462009
皮获愿蚀足指皮肤在接触化学物质后产牛的不可避的皮纠织损伤如（HS中的定义），本你准提供「一种心需活体动物试验而对化学物质滴蚀性过行评后的试验方法。兴估离蚀性迪带需要逊行实验室动物试验：G3/T21512008考患到试验中动物的痛件和终痛·在其附录中允诈使用体外方法法行皮肤腐!性的测定：以避免动物的痛芹和疼流。完个代替GB/T213428的1要雄是缺少止式的独的,科学的体外试验方法，前验证那究可作为制是一种休内试验替代方法的第一求：随脊这种研究的逊行已经开展了体外皮肤蚀性试验为法的验证试验可究，这些可究号效了不试验和人体皮肤模型试验的产生。研究表明采用大鼠的经皮电阻试验叫改很好的区别己知的皮肤腐蚀性和皮肽非腐识性，本标准目以刘度蚀性化合物和湿合物圳以鉴定，如只结合具他已方的信总，（如}H,结构活性关系，人类和(或)动物数据)通过证据权亚分所，本准还可以对腐蚀性的化台物动溺合物加以整定，本标准通常不能提共受试物皮肤刺邀的信息，也不能对膚蚀性物质接照HS规划逃步加以分炎为了全归兴估皮肤在经皮一茨染后的局部皮应，建议按照（13/213012008中的序贯试验效略或（HS中提供的和关方汰过行试验。１范围
化学品体外皮肤腐蚀经皮电阻试验不标现定了化学品体外皮肤满蚀丝皮电阻试验的原理、试验力法程序：标适于化学品体外皮庆满蚀丝皮电阻试验。2规范性引用文件
SN/T 2246—2009
下列文件中的条款逆过本标准的引用而成为本标准的条款：凡是注日期的引用文件，其随后所的修改单（不化括设的内容)成修订版均不适用」木标：然而·鼓两根拆本标准运成决没的各方研究是否叫使用这毗文州的最郊版六，儿是不江甘期的引用文件，其最新版本延用」本标滩。(B/一2164一206化学品急性皮肤刺激性/满蚀性战验方3术语与定义
下列术和完义适用于不标群。
体外皮肤腐蚀skin currosio in itro皮状接触化学物质4后产的不叫逆的体外变肤热伤：即衣皮利真皮的叫见性坏疽，腐划作用的特行有遗炫,出而结痴,14后皮收内为发避而变色局部斑延结症，减用维织病现学方法价可疑的损伤：
transcutaneous electrical resistance (TER)经皮电阻
皮状的良抗性:用良阻供(k)表示。运用斯迪电桥检测皮肤的离子通过性,以评估皮肤的屏障功能是·种简单稳定的方法。
4原理
4.1将受战物涂敷到否于内层测试系统的皮肤表向，保持21 l．在该测战系统[，层与层之间的皮肤板可作为一个独立的访能层：皮张极来丁安乐处外的鼠龄为8d~d的大鼠：如果负质层或严障访能遭到「破坏，则该受试物点有滴钝性：角质层或屏障功能的破坏逛过测呈到的经皮电阳（二ER)低于规定的阐位水平而加以认，由十人量化学物质的数拆显示人多效人鼠经皮扭位或高（-股1kn）：哦低（股3kn)所以选控5kα作为临界值4.2般来讲：九度划性但刘激性的物质或既儿腐包!性义无刺激性的物质不会出现TER低于该临界值。此外：岱皮族或！他仪举可能会使该临界值发生收变,因此需要进一让验证。4.3可在试验步薪中加人染色方法·以确认阳:性结景（包括二ER接近k时）：如果质层遭到了破环，则会增加离了的逛透性·从而可而梁色方法逃行验，大鼠皮的ER试验可为（13/216042008十的家焦体内腐蚀性式验提供依掀：应注意在皮肤腐蚀知皮状划方面，家负体内试验比人体皮肤斑贴试验史识守，5试验方法
5.1试验动物
51成进摔人最作为谢验动物，因为大鼠的皮际对化学劲质的敲感性在以前村同的试验已经得匀SN/T2246—2009
广证实：所用太鼠的鼠龄和比系（取皮肽样品时)是非常重妄的·以循识在大鼠成牛毛发开始牛长之前·素处于灰舰状态
5.1.2谢验采用鼠龄终l约球islI人鼠或共他朴近品种），雌皆可：用尊州们细剪掉人鼠背部和侧腔部毛发，然后小心擦拭动物.回时把暴露的部位涂抹抗生素溶液（如个有链索.古需素、氯毒素，配成有效浓度以抑制细菌生长）.3dd后用抗生素溶液洗动物一遍，如剪毛后角质层已经恢复止常;在第2次清既后3l内:动物可用于试骑5.2皮肤板的制备
5.2.1在人鼠的鼠龄为～3d时，将处死，分离每！动物的背侧部皮，小心别去皮下多余的脂脏,制成径约23mm的皮肤极。皮肤极在使而之前可减起来，因为阳件对照和队性对照的数据与从新鲜皮肤获得的试验数拆相同5.2.2每个皮肤板放在聚叫氟乙矫(PTFF)芒的端识证外皮的衣工与芒相接触，在管底放个合适人小的○形橡咬环以固定皮肤除多余皮。管了和形环的尺寸见图艺,用凡十林小心的将形环与ITFE管的末端密封，管了用支架固定并放在装有硫腋（MgSO)溶液的接收器控内（如图1所示）。皮张板必须浸没准MS04溶液中。一只大佩的皮肤川以剖战(10~15)块皮肽板。1
弹贯线变；
-PTFE滑；
弹件国形”；
接收带控：
硫酸镀(134 1m:ol);
像疫形坪；
硫酸蕉(mm)
内二破粗的：
弹贯线变：
外三极细的
反联的「岁；
这长坂的真皮。
图1鼠皮肤TER测试器具
h
追能继夹
（3医位
图2聚四氟乙烯（PTFE)管尺寸
SN/T 2246—2009
5.2.3试验开始前:收年！动物的两块皮肤极恶行质虽控制试验。试验用皮肤极的电阳值必须大丁10kn如果电阻值小十1ck2,则由该只动物的皮肤制成的所有皮股板都不能用于试验。5.3受试物和对照物的染毒
5.3.1试验时需同时白阳机对照和阴性对照以确保试验模型的可行性。所为的皮肤极应米口于间一只动物，建议而的性对物和阴性对照物分别足10 11/.盘梭和蒸水。5.3.2将1.i μI. 受试物均勾地涂敷到 PTFF管早的外皮表亚：如尺受试物是固体，则应把是略彩的受试物均匀的铺到皮肤板「·以保证将个外皮的衣面帮被覆盖：向固体的衣而圳1μI.去离子水并轻摔管了，为了使受成物与皮肤充分接触，可将国体受物加杰弹30℃融化惑软化，或者骤成粒状/粉状。
5.3.3年个染红和对照红用3块皮肤板：受试物20℃23℃情况下21h后用℃水冲洗梁康部位。
5.4TER检测
5.4.1“=ER采用低交流惠斯逆电挤来测量皮肤的亚抗性。股交流电桥的工件电止是1V~3V弯型或呈H角型交流电的频率为 50 Iz1c00 IIz,测品范压牟少是.kl1~3kl1。确认试验中所用的电桥在频率10IIz或1kIz时的感显系数，电容和电阻，应分别是2 000 II、200CF和2M02.在TER窗蚀性估试验中.测量结果以「O，H频率用的电以及系列数值来表示。品伙伴网
SN/T2246—2009
5.4.？在测号电班之前：在表皮「涂数是够多的7系乙醇，以减小表皮的表亚张。保持几秒后·将管的乙啦除出向管表皮加3Mgs0.溶液（1511mmol)使皮肤纠水合：皮板的每而放个几桥电极以测量变饭的几阻图工），电极的直轻利低于赠鱼变类的口摄长度见图2：二FE管顶际在内电极上的台皮支为了保证测品口阻时浸设在S门溶波中口破的长度不变，：外部的电被周楚在要技器腔的底部。P沿「的弹性同修引和震部的比离是保持不变的：因为这个距离髂影响心阻的测量值，因些，内部心坡科皮肤假之问的距离也成保持不变并儿耍尽量短，5.4.3如果测呈听得的电叫他大于2）k川能足山于有受试物惑留在皮状板上造成的，北时以尝试进除去娥智的受试物，例如可以用带有于的洛划住=FE管谣动约10 弃去管内MgSO,溶液并演上等的MgSO溶波可欲测量电，5.4.4试验设备的性能以及试验程序Ⅲ能会影响FR结果。k的度钝朗值是依求亦标准的试骑方法，用特定的仪器得出的验结果。如果试验条件改变惑使用不同的仪器，则可以拯不同调值，国此有必要从用丁验证试验的化学物质中从与受试物类似的物质中，选择一系列的参照物质恶行试验，以对试验方法不电阻阅位进行校止，-些推些的合适化学赖质参见表A.1。5.5染色方法
此非腐独性的物质Ⅲ以侦电匪值降依到低」且的临齐值·因为这些物质间以计离子逆过负质层，例如-些右机物和含有表而活性成分的化学物质(包折清活剂、乳化剂和共他表前活性剂)能除皮映上的垢类物质:向使皮版的离子迪透性加：因此划景上R值小丁改在k皇左石，皮张及没有呗品的损物：则需婴用染料蔬时明B)淤透的方法：顿而宠阻代的减小是否是内为渗透性增加哦变腐。如果足片名·则说明角质层受破坏，染料（硫丹明3)将迅这透皮肤，将下,前的红纠染色，这种染自方法对很多化学溺质是稳楚且不受后续的萃取武验影响。5.6硫丹明1的染色及去除
5.6.1评估ER底.将管内Mg4济铱弃去，行细检查皮肤足否有明显损伤。如果,无明显损伤.则将10μl.1\%（质量/体积)的流片明染料水落液涤嫩到每块皮肤板的衣皮并识持2h，2h后用湿度少为宰温的白来水冲洗表皮10≤，以除么多余却末结合的染料5.6.2从PE管中小心取出皮肤极，入含有8m1.去离十水的小瓶中（如20的内炼瓶）.轻轻振搓小柜5nin以洗去多余的未结合的染料。重复「述清洗步骤后将皮肽板放人5ImL含3乐」二烷基碘（硫)的(SDS)的索溶液中，6）飞培养过俊，5.6.3培养后,最出皮晓极并将！弃去，将刻余的溶液在21‘离心8mn（相对离心力为每克175）1mT.悬液用30%Ss稀释到原体积的借：量溶波在6!：nm的光密度（0）5.7染料含量的计算
逆过（0)值计算得每块皮肤极的硫片明13染料的含（565nm处硫川明13的摩尔消光系数为8.7×IC，分子量为80），用适当的标准线笋每块皮肤板的染料含量和平均含量6结果的解释
6. 1如果阳性对和阴性对照的电还忙在1去求的范谢内;则可认为试验的结果是可危的表1电阻抗范围
泛战物
10ol/1.盐酸
盛淄小
三阻范围:
6,？如果和性对照和阿性对照的染料与皮肤板的结合量在表2安求的范围内,则间认为试验的结果是可信的
表？染料量范围
双试物
110 mol/1.盐酸
燕镭水
6.3符合以下任何种情说、可认为受试物对皮收是没有腐性的a）受试物的ER的侦人于k，
b）如果受试物的平均TER值小丁或等丁5kl,则必须满足：皮肤破没有显损伤：
$N/T 22462009
染料量范国耳板）
+--100
15--35
每个皮状板的平均染料结合量小」阳性对照的染料结合号（见6.2)：）符合以下在何补情况，川认为受试物对皮肤是有离钝性的，要我物一ER乎均信小十或第十，皮晓依右明显的惯伤受试物的R乎均道小变等于,皮肤板没有明损伤,似个皮肤披的平均染料结虽大下或等丁阳性对照的梁料结介虽（剂6.2)。7数据报告
7.1数据
试验效据包括染奇红、阳性对照以及阴性对照的电阻值(k2)和平均染料结介量（/极）：将以上效据绘感表举（单个试验数据和平匀值），包括年复试验中的单个和平勺数据。7.2试验报告
点验报告应包括以下内容
1）受试物和对照物
化学名称(如 IUPAC或AS名除)AS 号：化学场质或制剂纽分的个量（质量分数）、红度和物理性质；理化性质（如物理状态、>H、稳定性拟及水溶性）；稳定性（如知道）：
2）试骑动物
品种性别：
用忙给体的试验动物的鼠龄：
动物的来濒及衍养悄说：
皮肤推备的细节，
3）试验条件
诚验仪器的你准山线，
染料结个试验的标雅曲綫；
测尿上R电阳试验的详组步骤;
染料结合试验的详卵步；
对试验理序傲任何修改的插述；所而的评估你准
4）结果
每只动物和母个皮肤样板的TFR值和染料结合量的数扰衣格：观祭到的任何症状。
5）结果讨论
E）结论。
ht
SN/T 2246—2009
A,1推荐的化学物质剂表 A,1
12一氯基丙烷
2」基府
氧驾化部10
硫峻10）
-氮±-1,2,4--弹
丁子酸
以氯艺
斤十八{孩
2（甲毓基）元甲醛
时录A
(资料性附录)
推荐的化学物质
表.1推荐的化学物质
GAS Ne, rS HU C
CAS Nc.T9 TUT
CAs c. 83-13-6
CAS Ne. 1310-55-8
CAS N.. 766+-93-9
CAS Nc. 124-07-02
CAs c. 3847-13-4
CAS Nu. 7 5S C
CAS NU. l03 63 p
GAS No. 127 18 2
CAS NH03 CRI
CAS Nu. 3213 61 ?
无悔蚀
无商计
无商蚀
无腐蚀
A.2表A.1中所列的大部分化合物来源为『ECVAM国际致性研究而设计的化合物列表：化合物的选择是其于以下标准：
）相同数口的摘蚀性质和.腐蚀件物质；)
涵盖人多数化学品种类，并Ⅱ商业可素得的化学物质：们含了严重离蚀性和轻微腐蚀性的化合物：以识证对度链能力州以区别；所选的化合物除广H有腐识性外：以在实验牢单正掌使用.没方具他广http：//foodmate.netSN/1 2246-2009
中华人其“国人境龄验龄病
行业标雅
化学品
体外皮肤腐蚀经皮电阻试验
SN/T 2246 2039
中国标汇出版社出版
北点复兴门外街1
邮政缩码：100045
网th spe. net. cr.
话:t55239-h68317348
中国标唑山版在泰皇岛印师」一E.刷+
元本 30x12301/16印罪 3.77宁数 14 千#2.心9 年3 日第一般免费标准bzxz.net
230年5月第一次印别
印整 1—2 3心
5号: 151:66 -2-197:15
完价*6.00元
http：//foodmate.net600
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。