【商检行业标准(SN)】 化妆品微生物检验方法 第4部分：链球菌

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2206.4—2009
化妆品微生物检验方法
第4部分：链球菌
Determination of microbiological in cosmetics-Part4：Streptococcusspp.
2009-02-20发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2009-09-01实施
SN/T2206《化妆品微生物检验方法》分为以下部分：第1部分：沙门氏菌；
第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌；第3部分：肺炎克雷伯氏菌；
第4部分：链球菌；
第5部分：肠球菌。
本部分为SN/T2206的第4部分。
本部分的附录A是规范性附录。
本部分由国家认证认可监督管理标准化委员会提出并归口。SN/T 2206.4—2009
本部分由中华人民共和国新疆出入境检验检疫局、中华人民共和国广州出入境检验检疫局食品检测中心负责起草。
本部分的起草人：黄玲、蒋刚强、许龙岩、刘小兰、窦辉。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准I
1范围
化妆品微生物检验方法
第4部分：链球菌
SN/T2206的本部分规定了化妆品中链球菌的检验方法。本部分适用于化妆品中链球菌的检验设备和材料
2.1恒温培养箱：36℃士1℃
2.2高压蒸气灭菌锅。
2.3冰箱：0℃~4℃。bzxZ.net
2.4显微镜：10×~100×。
天平：最大称量达2000g.精确至0.1g。SN/T2206.4—2009
灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5mL（具0.1mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）。灭菌试管：16mm×160mm、18mm×180mm。灭菌培养血：直径90mm。
灭菌三角瓶：内含玻璃珠。
pH计或pH试纸
酒精灯。
灭菌剪子、镊子等
2.13水浴箱。
灭菌研钵及研棒。
均质器。
培养基和试剂
SCDLP液体培养基：见附录A中第A.1章。3.1
脑心浸出液培养基：见附录A中第A.2章。血琼脂：见附录A中第A.3章。
3.4无菌液体石蜡。
无菌吐温-80。
检验程序
检验程序见图1。
SN/T2206.4—2009
涂片染色
5操作步骤
10g（mL）检样制成
1:10稀释样品（10mL）+90mLSCDLP36 ℃+1 ℃
血琼脂、脑心没波琼脂
36 ℃±1 ℃
苏古霉索实验
图1化妆品中链球菌的检验程序
触酶实验
5.1增菌培养：取1：10稀释样品10mL加人到90mLSCDLP液体培养基，置36℃士1℃、培养24h。5.2分离培养：从培养液中挑取培养物，划线接种到血琼脂脑心浸液琼脂平板上，置36℃土1℃培养24h。如有菌落生长，在血琼脂上链球菌菌落特征：呈灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，菌落直径约0.5mm～2mm。在脑心浸液琼脂平板上，其菌落呈灰白色，半透明或不透明.表面光滑，有乳光，菌落直径约0.5mm~2mm。
5.3染色镜检：挑取若干可疑的菌落，革兰氏染色，镜检呈现链状或双排列的革兰氏阳性球菌5.4触酶实验：取一块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内，用接种环挑取可疑菌落涂在滤纸片上，然后加一滴3%过氧化氢溶液，30s之内，出现气泡者为阳性，不发生气泡者为阴性。5.5万古霉素实验：挑取可疑的菌落接种于含有万古霉素（0.5ug/L～4.0μg/L)的脑心浸液琼脂培养基中，置36℃士1℃培养18h～24h。观察细菌生长情况，链球菌均不能生长6结果报告
被检样品经增菌分离培养后，有可疑菌落生长，经证实为革兰氏阳性链状或双排列的球菌，触酶实验反应为阴性、对万古霉素敏感的细菌，即可报告被检样品中检出链球菌。A.1SCDLP液体培养基
A.1.1成分
酪蛋白陈
大豆蛋白陈3.0g
氯化钠5.0g
磷酸氢二钾2.5g
葡萄糖2.5g
卵磷脂1.0g
吐温-807.0g
蒸馏水
1000mL
附录A
（规范性附录）
试剂和培养基
SN/T2206.4—2009
制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH为7.2～7.4分装于适合的容器中，121℃高压灭菌20min。注意振荡，使沉淀于底层的吐温-80充分混合，冷却至25℃左右使用。A.2
脑心浸出液培养基
A.2.1成分
蛋白陈10g
牛脑浸粉12.5g
葡萄糖2.0g
牛心浸粉5.0g
氯化钠5.0g
磷酸氢二钠2.5g
蒸馏水1000mL
A.2.2制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH为7.2～7.4分装，121℃高压灭菌20min冷却至25℃左右使用。
A.3血琼脂
A.3.1成分
豆粉琼脂（pH7.4~7.6）
脱纤维羊血(或兔血)
5mL~10mL
A.3.2制法：加热溶化琼脂，冷到50℃，以灭菌手续加人脱纤维羊血，摇匀，倾注平板。亦可分装灭菌试管，置成斜面。亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。注：豆粉琼脂组成：
牛心消化汤（pH7.4～7.6）
黄豆粉浸液
1000ml
SN/T 2206. 4-2009
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
化妆品微生物检验方法
第4部分：链球菌
SN/T2206.4—2009
中国标准出版社出版
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中国标准出版社案皇岛印刷厂印刷开本880×1230
2009年5月第一版
印张0.5
字数7千字
2009年5月第一次印刷
印数1-2.000
书号：155066·2-19649
定价14.00元
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