【农业行业标准(NY)】 蒜薹、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量测定

ICS65.100.01
中华人民共和国农业行业标准
NY/T946—2006
蒜、青椒、柑橘、葡萄中
仲丁胺残留量测定
Determination of sec-butylamine residues in garlic sproutgreenpepperorangeandgrape
2006-01-26发布
2006-04-01实施
中华人民共和国农业部发布
本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：沈阳农业大学、辽宁省乡镇企业信息咨询服务中心。本标准主要起草人：纪淑娟、马岩松、吴玥、杨洪嘉、车芙蓉、何晓晗、李江阔。NY/T946—2006
1范围
蒜蔓、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量测定本标准规定了薪基、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺（2-AB)残留量的检测方法。NY/T946—2006
本标准适用于蒜基、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量的测定，其他果品蔬菜中仲丁胺残留量的测定可参照本标准。
本方法的最低检出限量为0.672mg/kg，测定浓度范围为0.672mg/kg~20.000mg/kg。2原理
通过水蒸气蒸馏，将样品中仲丁胺和其他挥发性胺类分离，用四氧化碳（CCL）洗涤，除去干扰物质，在硼砂缓冲液中2-AB与2，4-二硝基氟苯（DNFB)反应，生成N-仲丁基-2,4-二硝基苯胺（BDNA）加碱水解除去多余试剂，用环已烷萃取BDNA，经薄层色谱分离、净化，将2-AB色斑用三氯甲烷溶脱，用紫外/可见分光光度计在332nm处测定。3试剂与材料
除非另有说明，所用的试剂均为分析纯，所用的水均为无离子水。3.1氧化镁固体
3.2无水硫酸钠
3.3正已烷
3.4乙醚
3.5三氯甲烷
3.6四氯化碳
3.81,4-二氧六环免费标准bzxz.net
3.9：1mol/L氯化钙溶液
称取氯化钙（CaCl2）110.9g，溶于水中，定容至1000mL。3.100.05mol/L四硼酸钠
精确称取四硼酸钠19.07g，溶于蒸馏水，定容至1000mLc3.110.2mol/L硼酸
精确称取硼酸12.37g，溶于蒸馏水，定容至1000mL3.12硼酸盐缓冲液
将硼砂溶液与硼酸溶液按8+2比例混合制成硼酸盐缓冲液。3.132mol/L氢氧化钠溶液
准确称取8.00g氢氧化钠（NaOH），溶解定容于100mL蒸馏水。3.140.3mol/L氢氧化钠溶液
准确称取1.20g氢氧化钠（NaOH），溶解定容于100mL蒸馅水。3.150.05mol/L碳酸钠溶液
准确称取5.30g碳酸钠（NaC0），溶解定容于1000mL蒸馏水。1
NY/T946-—2006
3.160.15mol/L硫酸溶液
准确吸取9mL硫酸（H,SO4），溶解定容于1000mL蒸增水。3.172，4-二硝基氟苯（DNFB）
在50mL蒸馏后的1，4-二氧六环中溶解0.75mL2,4-二硝基氟苯（2,4dinitrofluorobenzene）（简称DNFB)(当天配制）。
3.18环已烷
将500mL环已通过长125mm直径25mm填充粒径为0.2mm~0.5mm硅胶的层析柱层析，弃去开始的25mL，其余收集于干燥洁净的试剂瓶中。3.19仲丁胺标准溶液（100μg/mL）精确吸取14L标准仲丁胺原液，用蒸馏水定容至100mL。3.20仲丁胺标准使用液（100μg/mL）精确吸取上述仲丁胺标准溶液10mL，用蒸增水定容至100mL。4仪器
4.1高速电动组织擒碎机；
4.2恒温水浴锅（60℃±2℃）；4.3水蒸气蒸馏装置；
4.4薄层板：硅胶G0.25mm）；
4.5紫外-可见分光光度计；
4.6旋转蒸发仪。
5操作方法
5.1样品处理
将果蔬样品切成小块，用组织捣碎机搞成浆状，称取50g匀浆，精确到0.1g，置于800mL蒸馏瓶中，依次加人75mL1mol/LCaClz溶液、10gMg0与50mL水制成的浆状物，并用100mL水冲洗瓶壁，转动使之混合均勾。将蒸馏瓶连到水蒸气蒸馏装置上进行蒸馏，用装有10mL0.15mol/LHsSO4溶液的带刻度的100mL烧杯接收馏出液约80mL，再用0.3mol/LNaOH溶液将蒸馏液调到pH=7(用pH计），最后用蒸留水定容至100mL备用。5.2标准工作曲线的绘制
5.2.1吸取仲丁胺标准使用液（3.19)0.0mL、1.0mL、2.0mL4.0mL、6.0mL、8.0mL和10.0ml（相当于0.0μg、10.0g、20.0、40.0g、60.0g、80.0g、100.0g），分别置于50mL具塞锥形瓶中，加蒸馏水至10mL。
5.2.2分别加人5mL硼酸盐缓冲液和2mLDNFB试剂，置60C水浴反应30min，再加入2mL2mol/LNaOH溶液，继续恒温30min。将锥形瓶置于冰浴中冷却，在分液漏斗中用10mL环已烷萃取，弃去下层水相，再用15mL0.05mol/LNazCO溶液洗涤环已烷萃取液，重复三次。将环已烷萃取液转移到50mL具塞锥形瓶中，加入2g无水硫酸钠，轻轻振播，用气流蒸发除去溶剂，加人0.2mL苯将仲丁胺干燥物溶解。迅速将50上述溶液点在同一块薄层板上，用正已烷一乙醚（70+30）作展开剂一次展开，刮下待测组分斑点，用三氯甲烷溶解，并定容至5mL，于332nm处测吸光度，绘制标准曲线。5.3样品测定
吸取样品溶液10mL置于50mL梨形分液漏斗中，用15mLCCl4洗涤样品溶液，重复三次。然后转人50mL具塞锥形瓶中，以下按5.2.2方法操作，测定吸光度。从标准曲线上查出仲丁胺的残留量2
(μg)。
6结果的表述
6.1计算
计算见公式（1)
式中：
-样品中2-AB的含量，单位为毫克每千克，mg/kg;在标准曲线上所查得的2-AB的含量，单位为微克，g；点样体积，单位为毫升，mL；
一点板前苯的定容体积，单位为毫升，mL；V3
-吸取的样品蒸馏液体积，单位为毫升，mL：V4—样品蒸留液总体积，单位为毫升，mL；样品质量，单位为克，名。
计算结果表示到小数点后三位。6.2青椒、蒜寒、柑橘、葡萄检测的相对标准偏差RSD为3.4%~6.7%。6.3青椒、蒙蔓、柑橘和葡葡的回收率为85%～101%。NY/T946—2006
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