【国家标准(GB)】 蜂蜜中红霉素残留量的测定方法 杯碟法

Ics e7. iec. 1c
中华人民共和国国家标准
CB/T18932,8—-2002
蜂蜜中红霉素残留量的测定方法杯碟法
Mcthod far the determination of erythromycin residues in honey-Cylinder plale method
2002-12-30发布
拉华人北和国
国家质量监督捡验检疫总用
2003-06-01实施
GB/T1832-2002分为12个部分.本部分为第8部分，GB/T18932.5—2002
611823%的年部分遵得（/120001.12001你准编了载第4部分，化举分折法2的错写规岛：
本部分的录八是规丧性附常，附录B和附录（是资科性附录，本部行击中华人民太和局国家质量监替检验检疫总局提山。本部分山中全国供销合作总社归二。本部分起章单位：中体人民共相国杂是离出人点检验按按局。本部分主要越市人康步、付宝案、标患。本部分系首次发在的片察标准，1范巨
蜂蜜中红霉繁残留量的测定方法杯碟法
GB/T-8932的率部分见定蜂壶中两素南蛋的媒测定方法.韵分适用于各种蜂蜜中红每策没谢量的定。大音分红每索的方运验出限为.mk。2规范性引用文件
C/T18932.8—2002
下列文件中的条款通过112的本部分的引用而成为本新分的余款。开是偿口期的用文件其乘后所有的修改单（不色加助误的内容）或修订能均不适用丁车部分，然而，装我本部分这成协议的名方研究卡否可使用这些文件的最新版本。凡是不注口期的文件，其量新取本近用于本部分。
（门T53731986测试方法的特缩通过实验窄间试验确定标准测试方法的五复性利再现性(neg155725.581)
GB/T6652-1992分析实验宽用规格和式验方法（eg[S8696,1927)3原堰
试样户残留的红需素经甲薛缩后在性条件下用三氰甲境宠皮，提报液经张箱非熔记利店还硬法进行拉纠并用红素标施曲线进行定盘。4试剂知材料
除有规定外所用试剂均为分析吨水对（B/T6682·192户热规定的一级本.4.1剂
4.1.1甲醇：
4.1.2Tfi您.
4. 1. 3三氯甲烷。
4.2试验菌种
芽疤打菌（Baitauits）.号ChinaMicrobin.tulureCrrelinn>CMrCG3l。4.3标准物质
红索，23IU/或相当者。
4.4工作溶液的配制
4.4.1氧氧化销液，mo:/L，称报4.0R氧或化钠落解于水中并定容至0n1r[-4.4.2性级二钠格座，10/，称取1U.<科酸氢二钙，溶解水中尽容些1000mL。4..3减酸缓冲落波HR.0，称取1元73g万水醇酸氢二评，0.63g无水磷能二氧价，溶韩」水！并定容至：03mT..
B/T1e932.3—2002
4.4.4生睡盐水.5称取.5g飘比熔新」1L水中.12高正灭卤20mit。4.5标准溶液的配制
4.5，1红带累标理坑资塔控：理通标取（确举01消出路红标物量（1.），中款4.，1）落解并定容浓度为【（L（按效价换算的标准各落。4渠行忙存期限一周。4.5.2红害索标注工推熔：取标准皓各落（1，，1)用磷就强冲落！4，小)释，瓦制成浓度为0.05、0.10,C.233.40和0.60mL的你准1.作穿率。当天配划、当大使用。4.6培荞基
4.6.1培养1：见第A.1帝：
4.62培养进2第A2
4. 6.3培齐基5,见第4.3本。
4. 6.3养基3;附求A中A.3,
4.7南态疫的配制
将试验菌外(4.2)接种于培杀1内（1.6.1)经(2士1)它培养1附11~34后，再转种于培并茎7（1.6.)的斜面，置（3=1)培茶。校学孢在%以上后10生理水（4..-)洗下，于水20mi高心（0001/mi)20min弄去上消满，10:l.业理商骤决，最统用13m.小水制故牙泡虚最，4℃保存，吃手期改个月。5夜器
5.1均压能：转过不低于50001/mi。5.2高心机.转不低于4心r/mia.
5.3滨转兼发盟：
5.4温水陷锅：
5.5生化培养箱：(士1)C.
E.E面压灭卤器：
5.7培血：内径0.底前平整比滑的玻璃现塑料丑，具降瓦益。5.8牛伴坏不小管外810.）内径6.001mm.高（101m5.5游标尺很量他国Umm-2m拍主.2mmu6 试样的制备与保存
6.1试样的刷备
将样品抛扑与勾，分心k作为试样，制备好的试样置二样品瓶中，密封：并加以标识6.2试样的保存
将样品丁常短下保存，
了测定步瞬
7.1 提职
称取1话排，确0，置于5mL.离心否用2x20)L甲醇（4.1>均1in（4Qccmin后心20in000m）合并次两心药上讲液上200分滤通斗7.2净化
7.2.1甲醇萃取
在上述上消读7.1)加人20I正二流（4.1.2)充分振药1i静置分系将下层的甲惊相移人月一200mL的分滴涌牛中
7.2.2三氨甲烷萃取
(B/T18532.8—2C02
在上述甲醇机<7. 2. 1,中人 m1.氢率化期落液(1. 1. 11利5 r[ 三更片统(4. 1. 11充计系1ie洲天剂I酸室二朝格液1.2，报满1元i静置15rii:1--min。将元烧扫移人客册中并用一数中定客到6限约.量收中25m于150.心在4浴的族转热发器上然发至示，加人磷践盐级冲落液14.3窄解就透，此简液含式盘法. 0 .L。
7. 3测定
7.3.1两患跛用最的削定
在实标测定前，用天向侬的由总4.7）加人定的培养成34.，3>中培获，能偿0>/m淡使的社学离标准工作游液：4.5.?产生虹经大了1m,消断完整的抑圈为最适压尽获用址。7.3.2检定用平板的制备
将7.2.1测成所药道菌起商用量加人山路化并冷率55主的培3（1.6.3小，充分准与井即做在灭压培养血中，平人为。求台后，在再个检定用平校中放重六个牛然怀，使每人午律杯在半得为28m的圆面成第叫距，所用平板应当天制轻。7.3.3标动间线的制备
微豪标带T作客液（4.6.230.80.0.1U.0,20.0,9C.05/m正个策3.20g标作工作落液为整考做度。
个红需素标准工作溶液浓度除季书能过(0.20.g/m1.)外，各二个检定用平板为一组，四组式18个检完用平版，每个险定用平版中的三个牛冲杯内注满参专能成（0.20/)标谁工作落般，历一个牛泾怀中则分则注酒共他表皮的杯准工作熔池：这样廖考浓感（.2mL)标准上作缩嵌将得出33个中菌图其征离数的效据其他浓度标准工作落液将各得九个拆尚国直径读数的数据，益好网瓦益，置（工1）七培养1=1后取山，翻转平板除去牛津下，热游标卡尺准确地测量务抑西周有径（精的0.11m）系H各组平板中标谨工牛将液浓变收意考淡理（020z/m.换菌因自径读数的因值以及考浓使（,2/ml)33个神菌间在读数的总平均值。周参考浓皮（(.2\/L)的总平均值或去务组参专浓离<0,20/的平均值之常为惊正偿，以此值正其他各涨度标准工作游液以及被划样品络减抑菌制直说凝数的平均值。将务组按正慎化人式（1)和式2)中，求出和H值后，在半对数坐标上以冲菌卓径（)为划半标（算术级：以标难工作落泌浓康/m.)为坐标（对效级），标出1.和点，连一直线，即为标迪脏线：
J. = ( 1 26 1 c e/s
H -3e+ 2et -- >5
武中：
1。标准由线上量保浓险(0.05/)的菌国自，单位为意水（mm)——标准曲额工最高浓度0.8JgmT)的冲苗国直径，单惊为学米（ram)r—考满度(c23/m.)拆径的总半沟值，单位为率米（)；:()
d，——分别表示保消册载中其各度际准T作落液0.05，0.1C.C，40，0,80R/m1.抑凿图白抢效据的校信单位为整米（mm)：7.2.4样品溶液的测定
每阅样品将抗各用三个校定平夜，接7.3.1标注山载制备均要求效置牛津杯，各平板中的二个4热环十让满参考浓度（C.2Cg/n)下作潜兼，见三个牛净格注满被测样已溶液，将防瓦盖益：培养18h土1h总，整转成，除表牛律杯，执微标卡尺注确地测压拍菌图直长（精确到\.二)，分别求出被测样品溶液及考浓护菌固直径读效的平均值：0B/18932.8—2C32
7.4确证证龄
如起润择品落微抑齿圈自经读数的平勾消勿时，应刃满层送法做确证试验，以正明抑菌物系想索：
力法流程正随录3，
本方领的器闲回收率数期我说闭录，8结果计其
如极源样品箱国经数的均值1mm，即报为木检出，如被测打品溶滋面膜直径资数的均值1心m按7.3.3要求校正后·从标准山载上立出相应的红球变含（5mL）印得白以/ml.计的红探京舍量，报据随训.试法（？.4)报告结果如果样品中红需亲的含单单位用：衰示时，可将按式（3）进在换算，X
式中：
一品率中红存琴命，单位为安克每千克）（一从标理止线上查山择品溶液中相应的红售量，单位为微克再者（/)：两--一地终样品游液中所北表的样品单，单位为克书李升/m）9粘密座
1189送的本部分销准数居是按限/T6879一186的现定，通过元-个实监空对个添加水平的试都所做的试验中确定的。然蛋复生和再锐性的道是改95为的可片度丧计其。8.1套性
在复性牵件下.获得的两次独文划试练果的陷对差值不粗过友件限.本部分方然的重定件限接为程式（4)计算：
蜂蛮中需素的含量./k~.mgk范：Jgr: 1. oss 31 lun - 0. 7 4
式中：
两次须定值的平均值，单位为者克十克《/）如果奈适过更复性限，应亦试验结果共重新完,放调次单个试尬的测定9,3再现性
在再现性条件获得范的次独文测试绪果的绝对类不超过再现性限（K），本部分方达再现性限按审程式（5)计算：
率蛋中红率亲的含量在s-g/.80Ck范围：R - 0. 424 3 m - 0. 011 7
式中;bzxz.net
证一--两饮测定销的平与信，单位为患京每干点/k）5
A,1培养基 1
蛋H陈
牛肉骨
蔡馏水
观范性时录
培养点
. C=5. 1
制作：分装试管.约5.5ntL：12高压灭床mi培养基2
豌蛋片陈
牛肉毒
转酸氢二标
激酯粉
制作：121t:高压灭菌2C.amin
1培养基3
培养激的成分尚 A. 2,症 μH6. 士1, 1。制作：分裂试臀，了121%商正次商20mi。E.ig
15 g*-25 g
7. R.~H. 5
G3/T18932.8—2C2
「料性附录」
本法中红海索案加浓匠及回收举的试验数好：在添量为，50m/k时，平均可收率为[01.4只：在您加账为0.2m/kg[平收率c.7%：在至为40g/平收率7
在加.8(g，收率：
GB/113932.8-2392
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