【国家标准(GB)】 石蜡中稠环芳烃试验法

中华人民共和国国家标准
石蜡中稠环芳烃试验法
Paraffln wax-Determination ofpolynuciear aromatics
本方法适用于检验食品用石蜡巾稠环芳烃，以紫外吸光度表示。1方法概要
UDC665.41:543.062
GB7368-87
本方法是用一甲业矾为溶剂，抽出石蜡中芳烃，再用异辛烷反抽提出落下二甲亚矾中的芳烃。浓缩至每毫升彝辛烷中相当于含1克试样的浓度，测定其紫外吸光度。若测定值超过极限值，再用氢硼化钠处理，经氧化镁硅藻土吸附，分离出稠环芳烃，再测定紫外吸光度。如测定值仍大于极限值，则报告未通过。无论是第一次或第二次测定值不大于极限值，可报告通过。2仪器与材料
2.1分液漏斗：容量为250，500，1000及2000毫升，带有聚四氟乙烯塞。2.2容器：500毫升底部有一18/30锥形磨口，容器上部有一合适的通氮气用接头。磨口上侧须有玻璃钩（见图1）。
内更[5.7 ±0, ;
1—容器，2—色谱柱：3—磨口塞：4—半融玻璃板国家标准局1987-03-05批准
1987-10-01实施
GB7363--87
2.3色谱柱：长180毫米，内径15:7±0.1毫米，下部带有一块粗孔半融坡璃板，在上端有-18/30锥形磨口，磨口下侧须带有坡璃钩（见图1)。2.4挚圈片：真径为5U毫米，厚约毫长的聚四氟乙烯片，其小心有一孔，孔径恰好能与色谱柱的柱身外径致。
2.5加热夹套：锥形，适合500毫升分液漏斗加热用，用变压器控制。2.6吸滤瓶：250或500毫升滤瓶。2.7冷凝器：带有接头，与仟意长度的十燥管相连接（见图2)。426
一冷器，2一蒸发烧瓶，
3一焱发烧瓶塞
2.8蒸发烧瓶：250500毫升玻璃烧瓶，带有锥形塞，塞上有进出叫管，以便通人氮气至瓶内要蒸发的液体表面（见图2）。
2.9真空蒸馏装置,全部用玻璃制作（用于：甲亚砜净化）,包括一个2升-的蒸馏瓶，带有加热罩，一个真空夹套冷凝器以及一指状冷凝器的蒸馏头及受器（见图3）。GB7363-87
“器攀！
GB 7363-87
2.10光谱用融熔石英吸收池：光程在4.000±0.005厘米范围内。可用光程为1.000±0.005厘米的石英泄校正分光光度计性能。此时，以水作参比，测定吸光度值的差异。2.11分光光度计：波长范围250~400纳米（nm），有小于2纳米的狭缝。在仪器操作条件下，测定其吸光度。分光光度计性能须符合下列要求；吸光度的重复性：在0.4吸光度处为土0.01。吸光度的精确度：在0.4吸光度处为±0.05。波长重复性：±.0.2纳米。
波长精确度：±1.0纳米。
2.12瓶装氮气：（纯度99.5%的氮气)。瓶上装有控制阀，控制压力为3.43帕【斯卡（0.35千克力/厘米2)下的流量。
2.18玻璃小量勺：自制，量取氢硼化钠用，勺相当于u.3克氢硼化钠。2.14玻璃棒：自制，长250～300毫米，外径约5毫米，一端呈扁平圆型。用丁压紧吸附剂。2.15金属棒；自制，长250～300毫米，外径约5毫米，一端磨尖，用于挑松吸附剂。3试剂
3.1异辛烷（2，2，4-三甲基戌烷）；应符合下述检验指标。必要时，需通过长约90厘米，直径5～8厘米的活化硅胶柱净化。
3.2苯：试剂级，应符合下述方法检验指标。必要时，可采用蒸馏法或其他方法净化。3.3丙酮，试剂级，应符合下述方法检验指标。必要时，用蒸馏法净化。3.4甲醇：应符合下述方法检验指标。必要时，用蒸馏法净化。3.5正十六烷；纯度99%，无烯烃，应符合下述方法检验指标。必要时，需通过活化硅胶柱渗滤或采用蒸馏法净化。
3.6蒸馏水，应符合下述方法检验指标。必要时需通过离子交换树脂或用其他合适的方法化。3.7二甲亚砜，分析纯，应符合下述方法检验指标。必要时按下法净化：将二甲亚砜加入2000毫升带玻璃塞的烧瓶中，再加入6.0毫升磷酸和50克碱性活性炭或类似物品。盖上瓶塞，用电磁搅拌器搅拌15分钟（搅拌棒须涂有聚四氟乙烯涂层），二甲亚砜通过四层厚的折成凹槽型的滤纸过滤（滤纸直径18.5厘米）。如最初的滤液含炭粉，滤液需返回同-漏斗重新过滤，直至滤被液透明为止。为防止二甲亚砜与空气和湿气接触，在操作过程中，分液漏斗和集合瓶中的溶剂表面都用层异辛烧翼盖。滤液移至2000毫升分液漏斗中，将二甲业矾从下部排至真空蒸馏装置的2000毫升蒸馏烧瓶中，在约400帕[斯卡］（3毫米汞柱）或更小的压力下进行蒸馏。弃去开始的200毫升蒸馏液，再换上个洁净馏出液受器，蒸馏继续进行直至得到1000暑升的二甲亚碱为止。由丁此试剂很易吸湿，并在空气存在下，易与某些金属容器起作用，故在蒸馏究毕后，必须贮藏于有玻璃塞的瓶中。3.8磷酸：85%，试剂级。
3.9氯硼化钠：纯度98%。
3.10氧化镁：试剂级。
3.11硅藻土：化学纯。
3.12无水硫酸钠：试剂级，粒状。对所用的每一瓶硫酸钠必须按下法进行预洗涤，以提供本方法中所需的过滤介质。
9.13氯化钠：试剂级。
活性炭：色层用、粒状。
4 试验准备
4.1实验室要求
GB736887
本试验灵敏度高，因此在操作中务必十分小心，以免污染起误差。所有玻璃仪器包括旋塞和塞子都必须细心洗净，以除去润滑油、脂类及残留洗涤剂等-切有机物质，并需要用紫外光检查是否有任何茨光污染。在仪器使用前必须用净化后异辛烷淋洗。在玻璃旋塞式接头处不准涂抹润滑脂。4.2样品处理
处理样品时必须十分注意避免污染，并保证不得因包装不当而带入任何外来杂质。在试验中被测试的某些稠环芳烃易被光氧化，故全部试验过程必须在柔和的光线下进行。4.3溶剂的检验
4.3.1正十六烷的检验
取1毫升正十大烷，用异辛烷直接稀释至25毫升，以异辛烷作参比，用4厘米光程吸收池测定紫外吸光度。在波长280～400纳米（nm)范围内，每1厘米的吸光度不应超过0.00。4.3.2异辛烷、丙酮、苯、甲醇的检验将规定量（见表1)的溶剂放人250毫升蒸发烧瓶巾，加入1毫升正十六烷，在水浴上通氮气蒸至残液量不大于1毫升。燕发速度控制在每分钟液体蒸出量约为4毫升，对苯及内酮的残液，再加人两次10毫升异辛烷，同上操作，以保证除去全部的苯或丙酮。将残液溶于异辛烷中，使总体积为25毫开，以异卒烷作参比，用4厘米光程啵收池测定溶液的紫外吸光度。在280～400纳米（nm）范围内，每1厘米光程紫外吸光度应符合表1的规定值。表1
异辛烷
规定量（毫）
测定结果大于规定值，则需净化及处理后再逊行检验。4.8.3二甲亚的检验
紫外吸光度
不太于0.01
不天于,01
不大于0.01
不大1:0.00
取120毫开一甲业砜，用240毫升蒸馏水稀释，置」500案升分液斗中，混合并冷却5～10分钟。加人40毫升异辛烷，将漏斗剧烈搬荡2分钟，进行抽提。分层后，将下部的水层放人第一个500毫升分液漏斗巾，加入40毫升异辛烷再抽提一次，弃去水层。将两份40毫升抽出液，各用蒸馏水洗次，每次用水50毫升并洗涤拔荡1分钟，弃去水层，第一份抽出液通过用异辛烷预洗涤的无水硫酸钠过滤至250毫升蒸发烧瓶中，用第二份40毫升异辛烷抽出液洗涤第一个分液漏-斗，通过上述无水硫酸钠层过滤，放入同一烧瓶中。两个分液漏斗各再用10毫升异辛烷洗涤，洗涤溶剂均通过上述无水硫酸钠层滤入同一个烧瓶中。往烧瓶中加人1毫升正十六烷，放在水浴上，并通氮气蒸掉异辛烷，蒸发速度同（4.3.2），直至残液不大于1毫升。往残液中加人两次10毫升异辛烷，同上操作，以保证所有挥发物全部除去。将残液溶于异辛烷中，使总体积为25毫升，在4厘米光程吸收池中以异辛烷作参比，测定紫外吸光度。在波长280～400纳米（nm）范围内，每1厘米光程吸光度不应大于0.02，若不合格则需按3.7所述的净化法处理后再进行检验。
4.3.4蒸馏水的检验
取500毫升蒸馏水放人1000毫升分液漏斗中，加25毫升异辛烷进行抽提，剧烈报荡5分钟，静置30分钟，分层后弃去下层水，用4匾米光程吸收池测定紫外吸光度，每厘米光程紫外吸光度应不大于GB 7363—87
0.00。若不合格则需净化处理后，再进行检验。4.4试剂的制备
4.4.1预平衡二甲亚-磷酸溶液及预平衡异辛烷的制备取300毫升二甲亚砜放人1000毫升分液漏斗中，加入75毫升磷酸，剧烈振荡混合均勾（由于二甲亚矾和磷酸作用是放热反应，在混合时注邀排气），然后放置10分钟，再加人150毫升异辛烷并搬荡混合，便溶剂达到平衡。将各层分别放出，保存于带塞瓶中。4.4.2冲洗剂的制备
4.4.2.110%苯-异辛烷溶液，用移液管取50毫升苯，放人500毫带塞容量瓶中，加人异辛烷至刻线，并混合均匀。
4.4.2.220%苯异辛烷落液，用移液管取50毫升苯，放人250毫升带塞容量瓶中，加人异辛烷至刻线，并混合均匀。下载标准就来标准下载网
4.4.2.顶替剂的制备
丙酮苯-水混合液，取380毫升丙酮加到200毫升苯中，再加人20毫升蒸馏水，并混合均勾。4.4.8无水硫酸钠的制备
取35克无水硫酸钠放入耐酸漏斗中，根据所用溶剂洗涤数次（过滤异辛烷溶液时，用异辛烷洗涤：过滤苯溶液时，则用苯洗涤），每次用15毫升，直至最后一次15毫升洗涤液，按上述检验法加人1毫升正十入烷，蒸发至1毫升，蒸发速度同（4.3.2），再加人两次异辛烷蒸发后，加入异辛烷使总体积为25毫升，测定紫外吸光度进行检验直至在波长280400纳米（nm）范围内，每1厘米光程吸光度不大于0.00为止，一般洗涤四次即能满足要求。4.4.4氧化镁-硅藻士吸附剂的制备取100克氧化镁放人一个大烧杯中，加人700升蒸馏水便其变成糊状。将此混合物在水浴上加热（水裕温度70土2℃）30分钟，并不断搅拌，以保证所有氧化镁完全浸湿，用垫有滤纸的布氏漏斗进行真空抽滤直至不再滴水为止。将过滤后的氧化镁移入洁净的携瓷盘里，铺成上～2厘米的厚层，然后放人烘箱中在160±1℃恒温千燥24小时。取出，用乳钵粉碎，并用60目标准筛过筛。将过筛的氧化镁和硅藻士以2：1混合（重量比）放人1000毫升磨口锥形瓶中，用力振荡10分钟，并混合均匀。在使用前将此混合物移至塘瓷盘内铺成1～2厘米的厚层，在160±1℃下十燥2小时，然后装入磨口瓶里，存放在干燥器中。5试验步骤
5.1抽提测定阶段（按同样的手续测定空户的紫外吸光度）5.1.1准备T作：取100毫升预平衡二甲业-磷酸溶液，放人500毫升分液漏斗中，并放在加热套上预热至使试样可以达到完全熔化的温度。加热时随时打开塞子，排除内部压力。另外准备好三个装有30毫升预平衡异辛烷的250毫升分液漏斗，一个松松地塞着一薄层玻璃毛或玻璃布（须经异辛烷洗涤）的玻璃漏斗和-一个装有35克用异辛烷洗过的无水硫酸钠的耐酸漏斗。5.1.2取试样：取1干克试样（如不足1干克，则全部取用）先刮去表面·层，切碎。混合均匀，用四分法取25±0.2克，装人100毫升烧杯中，放在比试样熔点高15～20℃恒温烘箱中熔化。保存剩余试样，作为以后需要做重复试验时使用。5.1.3抽提：将熔化的试样立即倾人在加热套中的含有100毫升预平衡二甲业砜溶液的500毫升分液漏斗中，并迅速用儿份预平衡异辛娩洗涤烧杯中残留试样至同一分液漏斗，溶剂总用鼠为50毫升。必要时可将烧杯温热。如在操作过程中有试样析出，则须重新加热溶解。注意要不时打开塞子，以排除内部压力，当试样熔化后，从加热套中取出漏斗，并用力振荡2分钟，进行抽提。液相分层后，让漏斗内的物质冷却，当漏斗内璧上开始析出蜡时，将漏斗徐徐回转以加速蜡的析出。待蜡全部析出后，将下层二甲亚砜-磷酸抽出液通过装有玻璃毛的玻璃漏斗过滤，将滤液放至一个盛有和离升预平衡异辛烷的250毫升分液漏斗巾。振荡1分钟，进行洗涤，分层后，将二甲亚碳-磷酸抽出液再用另外两个250GB7863B7
笔升漏斗中的30毫升预平衡异辛烷按同样操作洗漆。共洗涤三次，以洗去带入二甲亚砜-磷酸抽出液中的蜡。然后，将二甲亚砜磷酸抽出液放人内盛480毫升蒸馏水的2000毫升分液漏斗中。抽提后的试样，在原500毫升分液漏斗中，再用另外两批100毫升预平衡二甲亚砜-磷酸溶液按上述操作重复抽提，两次抽出液均用洗涤第一次抽出液的三个250毫升分液漏斗中的预平衡异辛烷顺次洗涤，操作同上。洗涤后的二甲亚砜-磷酸抽出液均放入盛有第一次抽出液的2000毫升的分液漏斗中。5.1.4反抽提：将2000毫升分液漏斗中的三份二甲亚矾-磷酸抽出液（总量300毫升）和蒸馏水混合均匀，冷却几分钟，加入80毫升异辛烷，将漏斗用力振荡2分钟进行反抽提。液相分层后，将下部二甲亚磁-磷酸水溶液排入第一个2000毫升分液漏斗中，再用80毫升异辛烷重复反抽提-次。液相分层后弃去下部水层，每份80升异辛烷抽出液各用蒸馏水洗三次，每次100毫升，振荡1分钟。6.1.5过滤：将第一个2000毫升分液漏斗中的80毫升异辛烷抽出液用个耐酸漏斗进行过滤，漏斗上铺有35克经异辛烷预洗涤的无水硫酸钠层。滤液至250毫升蒸发烧瓶中。然后用第二个分液漏斗中的80毫升异辛烷抽出液，洗涤第一个分液漏斗，洗涤液也通过同一个有无水硫酸钠层的耐酸漏斗过滤，滤液并入同-蒸发瓶中。再用两份20毫升异辛烷，每份异辛烷按先洗第二个分液漏斗，后洗第一个分液漏斗的顺序洗涤。洗涤液均通过上述的同一个有无水硫酸钠层的耐酸漏斗过滤，滤液均并人上述同一蒸发瓶中。
5.1.6浓缩：往蒸发烧瓶里加入1毫升正十六烷，将烧瓶放在水浴上，通氮气吹蒸异辛烷至残液量不大于1毫升，蒸发速度同上。再加人两次10毫升异辛烷，操作同上，蒸至残液量不大于1毫升。·5.1.？紫外吸光度测定：将残液溶于异辛烷中，使总体积为25毫升，混合均匀。将溶液放在4厘米光程吸收池中，注意样品在倒人吸收池时不得有丝毫损失。在波长280一400纳米（nm）范围内，以异辛烷作参比测定紫外吸光度。并进行无试样的空白试验。5.1.8判断用无试样的空白试验的紫外吸光度补正试样的紫外吸光度。空白试验的紫外吸光度和补止后的试样的外吸光度如符合表2中的规定值，则认为试样合格。表2
紫外吸光度
280-289
每1匾米光程时最大紫外吸光度
290~299
300～359
360~400
如果补正后的每1厘米光程紫外吸光度超过所规定的界限值，但数值不大于0.50，则试验需要按下法继续进行。
注：(）由于本试验使用落剂较多，操作要在还风橱内进行，实验室也要经带进行通风。②在试验中含有稠环芳烃的废液，必须用硫酸处理，以免污染环境。5.2吸附分离测定阶段（按同样的手续测定空白的紫外吸光度）5.2.1甲醇-氢硼化钠的处理，将抽提测定启在吸收池中的异辛烷溶液全部移至原250毫升蒸发烧瓶中，将吸收池用少最异辛烷洗涤二次，洗液井入蒸发烧瓶，将烧瓶放在水浴上通氮气吹蒸至残液不大于1磨升为止，蒸发速度同上。取下烧瓶，冷却，加人10毫升甲醇和约0.3克氢硼化钠（为使氢硼化钠尽盘不暴露在空气中，使用玻璃小量勺），立即接上水冷凝器，振荡烧瓶至氢硼化钠溶解。在室温下放置30分钟，并不时摇，然后卸下水冷凝器，将蒸发烧瓶放在水浴上通氮气蒸发甲醇，直至氢硼化钠开始从溶液中析出。然后，加入10毫升异辛烷，将混合物浓缩至2～3毫升，再加人10毫升异辛烷，再蒸发至5毫升左右，不断摇晃烧瓶，以保证载硼化钠得到充分洗涤。GB T36$-87
5.2.2色谱柱的准备：先将色谱柱用聚四氮乙烯禁圈与吸滤瓶相连。称敢14克氧化镁-硅藻士吸附剂，在抽真空下（约135毫米汞柱），分次装入色谱柱内，每次约装3厘米高的吸附层。每装好一层，用玻璃梯均勾的压紧吸附剂面，以保证充填良好，将每层上部几毫米表面层用金属摔尖端挑松，然启再加第二层吸附剂。按这样的方法，将14克吸附剂全部装人在内，用玻璃棒压紧吸附剂层，使殴附剂层全高约14～16厘米，停止抽真空，取下吸滤瓶，将500毫升加压容器接在色谱柱上端。色谱柱先用100毫开异辛烷湿，调节氮气压力，使异辛烷下行速度为每分钟2～3毫升。当最后一些异辛烷快要达到吸附剂上部半面时，停止冲压（注意；在任何时候液面不能低于吸附剂面）。5..3吸附分离：往吸附柱内加入上述异辛烷浓缩物，稍加瓶气压力，使液面下降至恰好稍高于吸附剂面，蒸发烧瓶和残液用二份5毫升异辛烷充分洗涤，并迅速入吸附柱中。当最后5毫升洗涤液恰好达到吸附剂项面之前，接上容器，并加人100毫升异辛烷。渗滤下行速度为每分钟2～3毫升，当最后一些异辛烷恰好达到吸附剂顶面时，向容器中加人100毫升10%苯-异辛烷冲洗剂，继续按上述速度渗滤。当最后一些混合物恰好达到吸附剂顶面时，向容器中加人25毫升20%苯-异辛烷冲洗剂，继续按上述速度渗滤，直至所有溶剂全部通过吸附柱，弃去所有冲洗溶液。向容器中加入300毫升丙酮-苯一水顶替剂，顶替下来的溶液收集于洁净的1000毫升分液漏斗中，直至溶液滴完（0.2表压下1分钟内不滴为滴完)。
5.2.4过滤，将顶替溶液用蒸馏水洗三次。每次用量300等升，振荡1分钟。液相分层后（如有乳化现象，可用氨化钠破乳化）弃去下部水层。苯残留物通过苯预洗过的无水硫酸钠过滤至250毫升蒸发烧瓶中，分液漏斗中的苯残留物用苯洗涤两次，每次用20毫升，洗涤液放人同一个无水碗酸钠漏斗中过滤，并人蒸发烧瓶中。
5.2.5浓缩：往蒸发烧瓶中加人1毫升正十六烷，在水浴上通气吹蒸，蒸发速度同上，直至残液不大于1毫升，再加两次10毫升异辛烷，每次蒸至残液不大于1毫升为止。5.2.6紫外吸光度测定，将残液溶于异辛烷中，使总体积为25毫升。将溶液放在4厘米吸收池中，以异辛烷作参比，在波长280～400纳米（nm）范围内测定紫外吸光度。注，为了防止苯在溶液中存在，影响测定结果，应在250～260纳米（nm)间检测苯的谱线。如果显出苯谱线的特征，则必须重新吹蒸以除去全部的苯，然后再测定其紫外吸光度。5.2.判断测定值用空白试验测得的紫外吸光度进行补正。空白试验的紫外吸光度和补正后的试样的紫外吸光度如符合表3规定值，则认为试样合格。表3
紫外吸光度
6报告
波长纳米
280~289
每1匾米光程时最大紫外吸光度
290299
300~359
360-400
无论是5.1抽提测定或5.2吸附分离测定，若不大规定值则搬告通过。按5.2吸附分离测定仍大于规定值则报告未通过。
A.1蒸馅法
GB 736387
附录A
试剂净化及处理用方法
(补充件）
适用于苯、丙酮和蒸馏水的净化。可来用本标准中2.9所述的蒸馏装置，在常压下进行蒸馅。A ,1.1净化蒸馏水
先将75毫升碱性高锰酸钾溶液“放人蒸馏烧瓶中，加人儿粒泡沸石，再加1500毫升需净化的蒸馏水进行蒸馏。控制留速为4～5毫/分，去开始馏出液200毫升，取中间馏出液1000毫升，残液约300毫。
注：碱性高锰酸钾溶液的配制是取0.5克分析纯高锰酸钾，2.5克氢氧化钠溶于1000毫升蒸馏水4。A.1.2净化内酮
取1500毫升内酮放入蒸馏烧瓶中，加入少量高锰酸钾，使液体旱现紫色，加人儿粒泡沸石进行蒸馏，控制馏速为4～5毫升/分。弃去前200毫升馏出液，取中问1000毫升馏出液进行检验。A.1.8净化苯
取1500毫升苯放入蒸馏烧瓶中，加入几粒泡沸石进行蒸馅，馏速和截取馏出液量均与内酮相同。A.2色谱柱法
适用」异辛烷和正「六烷的净化。先将长约900毫米，直径50毫米的玻璃色谱柱下端用洁净的棉花堵塞，边敲边装填活化好的硅胶注至3/4高度处，硅胶装入量约1干克左右，继续敲打柱于至硅胶不再下降。柱了应垂直放置并用夹了灾稳，然后加人异辛烷（或十六烷），异辛烷处理量根据其中杂质而定（-一般情况是1克硅胶可净化4～5升异辛烷），先滴下来的200毫升须倒回上端容器再处理一次，液体流速可控制在每分钟4～5毫升左右。
因正十入烧用量少，也可用小色谱柱净化，色谱柱的径高比以15～20为宜。注：用101～20目纽孔硅胶在150℃温度干活化4～5小对。A,3二甲亚枫的预处理
A，3.1将需净化的一甲亚砜置于恒温水浴中结晶。结晶条件为14℃，8小时。然后在18℃恒温2小时，再将其中不结晶部分倒出弃去，将结晶部分熔化后，按本标准t3.7叙述净化。A，3.2碱性活性炭的制备：称取500克色层分析用粒状活性炭，放人2000毫升烧杯中，加人20%氢氧化钢水溶液浸泡，在水浴中加热到50℃左有，恒温1小时，并随时用玻璃棒搅拌，然后用蒸馏水滴洗活性炭。将浮面的氢氧化钠洗去，用不蕊试纸检验洗后的蒸馏水，直至其PH为7为止。再用玻璃布在布氏漏斗中进行真空过滤至不滴水后，放入烘箱中，在120℃十燥24小时。附加说明：
本标准由中国石油化工总公司提出。本标准由抚顺石油化1研究院技归口，本标准由抚顺石油化工研究院负贵起草。本标主要起草人陈恕美、苗天、杨令儒。本标准系等效采用美联邦法规一食品和药物（CFR-FDA）S172.86石油蜡中（b）项《稠环方烃试验法》（82年版）制订的。自本标准实施之日起，原石油部部标难SY2860一82《石蜡稠环芳烃测定法》作废。
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