【商检行业标准(SN)】 国境口岸环介导恒温扩增(LAMP)检测方法　第5部分：布鲁氏菌

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 3306.5—2013

国境口岸环介导恒温扩增(LAMP)检测方法
第5部分：布鲁氏菌

Loop-mediated isothermal amplification detection method at frontier port—
Part 5:Brucellosis

2013-03-01发布2013-09-16实施

前 言

SN/T 3306《国境口岸环介导恒温扩增(LAMP)检测方法》共分为5部分：

• ——第1部分：鼠疫杆菌；
• ——第2部分：产毒素霍乱弧菌；
• ——第3部分：志贺氏菌；
• ——第4部分：嗜肺军团菌；
• ——第5部分：布鲁氏菌。

本部分为SN/T 3306的第5部分。

本部分按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本部分起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中国疾病预防控制中心、广州华峰生物科技有限公司。

本部分主要起草人：陆晔、田桢干、邱瑾、鞠志英、章琪、李强、方筠、李晓虹、何宇平、李平、卢钟山、王婷、阚飚、曹以诚、杜正平、陈淘。

国境口岸环介导恒温扩增(LAMP)检测方法
第5部分:布鲁氏菌

1 范围

SN/T 3306的本部分规定了国境口岸检测布鲁氏菌病疑似样本、不明物质等样品中布鲁氏菌的环介导恒温扩增(LAMP)法。

本部分适用于国境口岸布鲁氏菌的筛选检测。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

GB 16885 布鲁氏菌病监测标准

GB 19489 实验室生物安全通用要求

WS/T 230—2002 临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用

3 缩略语

下列缩略语适用于本文件。

Betaine:甜菜碱

Bst酶:BstDNA聚合酶(大片段)[BstDNA polymerase(large fragment)]

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid)

dNTP:脱氧核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate)

EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid)

LAMP:环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification)

Triton X-100:聚乙二醇辛基苯基醚

4 生物安全措施

为了保护实验室人员的安全,应由通过生物安全培训并具备资质的工作人员检测布鲁氏菌,所有培养物和废弃物应参照GB 19489中的有关规定执行。

5 防污染措施

防止污染措施应符合WS/T 230—2002的规定。

6 技术概要

根据布鲁氏菌的特异性序列基因设计特异性内引物、外引物各一对,在特异性识别靶序列上的独立