【商检行业标准(SN)】 对虾杆状病毒(BP)检测方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1151.5—2003

对虾杆状病毒（BP）检测方法

Protocol of detection for Baculovirus penaei

2003-05-28 发布 2003-12-01 实施

中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局 发 布

前 言

本标准是采用 OIE 的《水生动物健康手册》2000 年版的检疫规程。

本标准的附录 A 是规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：江育林、陈莉莉、潘坤水、史秀杰。

对虾杆状病毒（BP）检测方法

1 范围

本标准规定了用直接显微镜镜检和聚合酶链式反应(PCR)技术检测对虾杆状病毒的方法。

本标准适用于对虾杆状病毒的鉴定及本病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682—1992 分析实验室用水规格和试验方法(eqv ISO 3696:1987)

GB/T 18088—2000 出入境动物检疫采样

SN/T 1151.3—2002 斑节对虾杆状病毒(MBV)诊断方法

3 试剂和材料

3.1 阳性病毒 DNA:由 OIE 参考实验室提供或由国家质量监督检验检疫总局指定的实验室提供。

3.2 水：应符合 GB/T 6682—1992 中一级水的规格。

3.3 Taq 酶：-20℃保存，不要反复冻融或温度剧烈变化。

3.4 dNTP:含 dCTP、dGTP、dATP、dTTP 各 10 mmol/L。

3.5 引物：有二对引物可选用。使用时浓度为 40 μmol/L。其序列如下：

3.6 异丙醇:分析纯，使用前预冷到 -20℃。

3.7 矿物油：要求无 DNA 酶和 RNA 酶。

3.8 DNA 分子量标准(Marker)。

3.9 样品缓冲液:按使用说明书中规定的比例与样品混合。

4 器材和设备

4.1 PCR 扩增仪。

4.2 电泳仪。

4.3 微量移液器及吸头。

4.4 紫外观察灯。

4.5 恒温培养箱。

4.6 普通冰箱和低温冰箱。

4.7 电动匀浆器。

4.8 普通显微镜。

4.9 离心机和离心管。

4.10 剪刀、镊子。