【商检行业标准(SN)】 马流行性淋巴管炎检疫方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1449—2004

马流行性淋巴管炎检疫方法

Quarantine method for epizootic lymphangitis

2004-06-01 发布 2004-12-01 实施

中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局  发布

前 言

本标准的附录 A和附录B均为规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：卢晓中、王作佳、徐彪。

本标准系首次发布的出境检验检疫行业标准。

SN/T 1449—2004

马流行性淋巴管炎检疫方法

1 范围

本标准规定了马流行性淋巴管炎的病原分离鉴定、酶联免疫吸附试验和皮内变态反应的检疫方法。

本标准适用于进出口马流行性淋巴管炎的检疫。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 4789.23 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 病原分离鉴定

3.1 器具

接种环，平皿，外科剪，镊子，恒温箱，高压灭菌器，铝盘，酒精灯，显微镜，超净工作台等。

3.2 培养基及试剂

3.2.1 动物脏器培养基：制备方法见附录 A。

3.2.2 灭菌生理盐水、革兰氏染液、动物脏器培养基、4%葡萄糖肉汤、酵母浸膏、明胶、蛋白胨水、配基质试剂、硫氰酸铁琼脂、链霉素葡萄糖蛋白陈水、生化乳等。

3.2.3 实验用水见 GB/T 6682。

3.3 采样

采集被检动物软化的未破溃的皮肢结节，化脓灶或病变淋巴结；消毒处理后无菌操作采取胶汁于无菌试管管或无菌平皿内，或直接无菌采取病变组织块于无菌平皿中。胶汁用灭菌生理盐水适当稀释后作为检验材料，干痂的痂皮须加适量的 10%～20%氢氧化钾（氢氧化钠）液或生理盐水，使其充分溶解后检查。

3.4 操作方法

3.4.1 显微镜检查

3.4.1.1 无染色压片标本镜检

3.4.1.1.1 用铂耳挑取处理过的材料于洁净的载玻片上，覆盖洁净的盖玻片。

3.4.1.1.2 在弱光下，先以显微镜（400倍～500倍）检查，然后再用油镜检查。脓汁中的流行性淋巴管炎马氏放线菌组织能聚成单层或双层圆形或梨形、一端或两端尖状，大小（3 μm～4 μm）×（2 μm～3 μm），菌体内为半液状，并可见到一条数个能活泼运动的小颗粒。

3.4.1.2 染色标本检查

3.4.1.2.1 用铂耳直接沾取被检动物化脓灶周边或病变淋巴结，树突结节组织渗出液涂片载玻片。

3.4.1.2.2 自然干燥后火焰固定。

3.4.1.2.3 依照 GB/T 4789.23 规定进行革兰氏染色。

3.4.1.2.4 镜检方法同 3.4.1.1.2。