【商检行业标准(SN)】 牛地方流行性白血病琼脂免疫扩散试验操作规程

SN

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1315—2003

牛地方流行性白血病琼脂免疫
扩散试验操作规程

Protocol of agar gel immunodiffusion test
for enzootic bovine leukosis

中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局发布

前 言

本标准的附录 A 为规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：陈世松、崔向东、赵增连。

本标准为首次发布的检验检疫行业标准。

牛地方流行性白血病琼脂免疫
扩散试验操作规程

1 范围

本标准规定了牛地方流行性白血病琼脂免疫扩散试验操作规程。

本标准适用于牛地方流行性白血病病毒抗体的检测。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682—1992 分析实验室用水规格和试验方法

3 缩略语

下列缩略语适用于本标准。

3.1 AGID Test

琼脂免疫扩散试验。

3.2 EBL

牛地方流行性白血病。

4 原理

抗原及特异性抗体在凝胶中从高浓度区域向低浓度区域扩散时所受阻力很小，基本上呈自由扩散形式。由于不同抗原分子的相对分子质量、结构、形状和电荷量不同，因此扩散系数不同，在凝胶中的扩散速度也就不同。当抗原与相应抗体经扩散后在凝胶中相遇，形成抗原-抗体复合物，若两者在相遇处比例适当，则形成最大的复合物。由于复合物的分子量增大，颗粒增大，因而不再继续扩散而形成沉淀，呈现线状，称为免疫沉淀线或免疫沉淀带。AGID Test即根据抗原与阳性血清之间出现的沉淀线来判定被检血清中是否存在特异性抗体。

5 试剂和器材

5.1 抗原

由感染EBL病毒的胎羊肾细胞（FLK）培养液经提取和浓缩制成，是以病毒囊膜糖蛋白(gp)为主，并含髓核蛋白(p)的混合抗原。病毒囊膜糖蛋白滴度不得低于四个单位。试验时与标准阳性血清之间必须在24 h内出现清晰的沉淀线，与标准阴性血清之间不得出现任何沉淀线。本抗原以冻干产品供应，用时加水溶解，并恢复到原体积。

5.2 标准阳性血清

能与标准抗原在24 h内产生明显的细直而致密的一条沉淀线(gp抗体)，末端接触二侧相邻孔的边缘。