【GB国家标准】食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验

本网站发布时间： 2025-08-01

GB/T4789.6—2003
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基本信息

标准号：
GB/T 4789.6—2003
标准名称：
食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验
标准类别：
国家标准(GB)
出版语种：
简体中文
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大肠埃希氏微生物学食品卫生致泻

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标准简介：

GB/T 4789.6—2003.
1范围
GB/T 4789.6规定了食品中致泻大肠埃希氏菌的检验方法。
GB/T 4789.6适用于食品和食物中毒样品中致泻大肠埃希氏菌的检验。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 4789.28一2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
3设备和材料
3.1冰箱:0℃~4℃。
3.2恒温培养箱:36℃士1℃,42℃.
3.3恒温水浴锅:100℃,65℃~～68℃,5o℃。
3.4显微镜:10×～100×。
3.5离心机:3 00o r/ min。
3.6酶标仪。
3.7均质器或灭菌乳钵。
6操作步骤
6.1增菌
样品采集后应尽快检验。除了易腐食品在检验之前预冷藏外，一般不冷藏。以无菌操作取检样25 g(mL),加在225 mL营养肉汤中,以均质器打碎1 min或用乳钵加灭菌砂磨碎。取出适量,接种乳糖胆盐培养基,以测定大肠菌群MPN,其余的移入500 mL广口瓶内，于36℃±1℃培养6 h。挑取1环,接种于1管30 mL肠道菌增菌肉汤内,于42℃培养18 h。
6.2分离
将乳糖发酵阳性的乳糖胆盐发酵管和增菌液分别划线接种麦康凯或伊红美蓝琼脂平板﹔污染严重的检样,可将检样匀液直接划线接种麦康凯或伊红美蓝平板,于36℃±1℃培养18 h~24 h,观察菌落。不但要注意乳糖发酵的菌落,同时也要注意乳糖不发酵和迟缓发酵的菌落。
6.3 生化试验
6.3.1自鉴别平板上直接挑取数个菌落分别接种三糖铁琼脂(TSI)或克氏双糖铁琼脂(KI)。同时将这些培养物分别接种蛋白陈水、半固体、pH?.2尿素琼脂、KCN肉汤和赖氨酸脱羧酶试验培养基。以上培养物均在36℃培养过夜。
6.3.2 TSI斜面产酸或不产酸﹐底层产酸﹐H,S阴性,KCN阴性和尿素阴性的培养物为大肠埃希氏菌。TSI底层不产酸,或H,S,KCN,尿素有任一项为阳性的培养物,均非大肠埃希氏菌。必要时做氧化酶试验和革兰氏染色。

标准内容

部分标准内容：

食品卫生微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验 GB/T4789.6—2003

前言
本标准对GB/T4789.6-1994《食品卫生微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》进行修订。本标准与GB/T4789.6—1994相比主要修改如下：按照GB/T1.1—2000对标准文本的格式和文字进行修改；修改并规范原标准中的“设备和材料”。本标准自实施之日起，GB/T4789.6—1994同时废止。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准起草单位：江西省卫生防疫站、中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。
本标准主要起草人：何晓青、冉陆、付萍、姚录会。
本标准于1984年首次发布，1994年第一次修订，本次为第二次修订。

范围
本标准规定了食品中致泻大肠埃希氏菌的检验方法。
本标准适用于食品和食物中毒样品中致泻大肠埃希氏菌的检验。

规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T4789.28—2003 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂

设备和材料
1 冰箱：0℃～4℃。
2 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃。
3 恒温水浴锅：100℃，65℃～68℃，50℃。
4 显微镜：10×～100×。
5 离心机：3000 r/min。
6 酶标仪。
7 均质器或灭菌乳钵。
8 架盘药物天平：0g～500g，精确至0.5g。
9 细菌浓度比浊管：MacFarland 3号。
10 灭菌广口瓶：500mL。
11 灭菌锥形瓶：500mL、250mL。
12 灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5mL（具0.1mL刻度）。
13 灭菌培养皿：直径90mm。
14 灭菌试管：10mm×75mm、16mm×160mm。
15 注射器：0.25mL，连接内径为1mm塑料小管一段。
16 灭菌的刀子、剪子、镊子等。
17 小白鼠：1日～4日龄。
18 硝酸纤维素滤膜150mm×50mm，0.45μm。临用时切成两张，每张75mm×50mm，用铅笔划格，每格6mm×6mm，每行10格，分6行，灭菌备用。

培养基和试剂
1 乳糖胆盐发酵管：按GB/T4789.28—2003中4.9规定。
2 营养肉汤：按GB/T4789.28—2003中4.8规定。
3 肠道菌增菌肉汤：按GB/T4789.28—2003中4.18规定。
4 麦康凯琼脂：按GB/T4789.28—2003中4.24规定。
5 伊红美蓝琼脂（EMB）：按GB/T4789.28—2003中4.25规定。
6 三糖铁琼脂（TSI）：按GB/T4789.28—2003中4.26、4.27规定。
7 克氏双糖铁琼脂（KI）：按GB/T4789.28—2003中4.28、4.29规定。
8 糖发酵管（乳糖、鼠李糖、木糖和甘露醇）：按GB/T4789.28—2003中3.2规定。
9 赖氨酸脱羧酶试验培养基：按GB/T4789.28—2003中3.12规定。
10 尿素琼脂（pH7.2）：按GB/T4789.28—2003中3.15规定。
11 氰化钾（KCN）培养基：按GB/T4789.28—2003中3.16规定。
12 蛋白胨水、靛基质试剂：按GB/T4789.28—2003中3.13规定。
13 半固体琼脂：按GB/T4789.28—2003中4.30规定。
14 Honda氏产毒肉汤：按GB/T4789.28—2003中4.34规定。
15 Elek氏培养基：按GB/T4789.28—2003中4.35规定。
16 氧化酶试剂：按GB/T4789.28—2003中3.18规定。
17 革兰氏染色液：按GB/T4789.28—2003中2.2规定。

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