【GB国家标准】 食品卫生微生物学检验菌落总数测定

ICS 07.100.30 C53 G 中华人民共和国国家标准 GB/T 4789.2—2003 代替 GB/T 4789.2-1994 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定 Microbiological examination of food hygiene - Detection of aerobic bacterial count 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会发布 前言 本标准对 GB/T 4789.2—1994《食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》进行修订。 本标准与 GB/T 4789.2-1994 相比主要修改如下：按照 GB/T 1.1—2000 对标准文本格式和文字进行修改，规范原标准中的“设备和材料”，将菌落总数的表示单位修改为 cfu/g（mL）。本标准自实施之日起，GB/T 4789.2—1994 同时废止。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。 本标准主要起草人：刘宏道、计融、计融、付萍、杨宝兰、姚景会。 本标准于1984年首次发布，1994年第一次修订，本次为第二次修订。 1 范围 本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。 本标准适用于各类食品中菌落总数的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡注日期的引用文件，其后续修改单或修订版均不适用，但鼓励使用最新版本。 GB/T 4789.28—2003 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 3 术语和定义 3.1 菌落总数（aerobic bacterial count） 食品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等），所得1mL（g）检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧菌群。 菌落总数主要用于判定食品污染程度，也可用于观察细菌在食品中繁殖动态，为食品卫生学评价提供依据。 4 设备和材料 4.1 冰箱：0℃～4℃ 4.2 恒温培养箱：36℃±1℃ 4.3 恒温水浴锅：46℃±1℃ 4.4 均质器或灭菌乳钵 4.5 架盘药物天平：0g～500g，精确至0.5g 4.6 菌落计数器 4.7 放大镜（4×） 4.8 灭菌吸管：1mL（0.01mL刻度）、10mL（0.1mL刻度） 4.9 灭菌锥形瓶：500mL 4.10 灭菌玻璃珠：直径约5mm 4.11 灭菌培养皿：直径90mm 4.12 灭菌试管：16mm×160mm 4.13 灭菌刀、剪子、镊子等 5 培养基和试剂 5.1 营养琼脂培养基：按 GB/T 4789.28—2003 中4.7规定 5.2 磷酸盐缓冲液：按 GB/T 4789.28—2003 中3.22规定 5.3 0.85%灭菌生理盐水 5.4 75%乙醇 6 检验程序 菌落总数检验程序：将样品制备成适当稀释液，选择2～3个适宜稀释度，每个稀释度取1mL加入灭菌培养皿，加入营养琼脂培养基，混匀后36℃培养48h±2h，进行菌落计数并报告结果。 7 操作步骤 7.1 检样稀释及培养 7.1.1 无菌操作取检样25g（mL），加入225mL灭菌生理盐水或其他稀释液，在含玻璃珠的灭菌瓶中充分振摇或均质处理，制成1:10均匀稀释液。 固体样品可在均质器中以8000r/min～10000r/min处理1min。 7.1.2 吸取1:10稀释液1mL加入9mL稀释液试管中，制成1:100稀释液。 7.1.3 继续按10倍递增方式进行系列稀释，每次更换灭菌吸管。 7.1.4 根据标准或污染情况选择2～3个适宜稀释度，每个稀释度做两个培养皿。 7.1.5 将稀释液加入培养皿后，加入约15mL冷却至46℃的营养琼脂培养基，轻轻转动混匀。