【SN商检标准】 草莓簇生植原体检疫鉴定方法

SN/T 3447-2012.Detection and identification of strawberry multiplier phytoplasma.
1范围
SN/T 3447规定了草莓簇生植原体检疫鉴定的基本原则和分子生物学检测方法。
SN/T 3447适用于草莓及草莓苗中草莓簇生植原体的检疫和鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 1193基因检验实验室技术要求
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3. 1聚合酶链式反应polymerase chain reaction
在聚合酶的作用下，以DNA为模板、dNTPs为底物、两条反向的引物对为起点,根据碱基配对原则,按照DNA的核苷酸顺序,合成与模板互补的DNA链的过程。PCR是一种体外基因扩增技术。
3.2SYBRGreen实时荧光PCR
SYBR Green realtime PCR
SYBR Green试剂中含有一种荧光染料,这种荧光染料可以与双链DNA结合而产生荧光,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程。随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过-一个循环，收集一个荧光强度信号,就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。在整个PCR反应完成后，会生成一条熔解曲线,峰值的高低可以确定PCR产物的量,单峰表示PCR扩增的强特异性。SYBR Green 实时荧光PCR跟普通PCR引物一样,而不需要另外设计探针。