【国家标准(GB)】 动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊酯农药多组分残留量的测定

ICS 67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T 5009.162-2008
代替GB/T5009.1622003
动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊酯农药多组分残留量的测定
Determination of organochlorinc pesticide and pyrethroid pesticidemultiresidues in animal original foods2008-12-03发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
2009-03-01实施
2原理
分析步骤
结果讨算
精密度
8原理
分析步骤
12结果计算
13精密度
附录A(资料性附录)
附录B（资料性附录）
第二法
第一法
气相色谱质谱法
气相色谱-电了-捕获检测器法(GC-ECD)第一法(GC-MS)中各日标化合物时间窗及定量离子色谱图
附录C（资料性附录)
方法的不确定度
合品伙网ht
GB/T5009.162—2008
GB/T5009.162—2008
本标准代替GB/T5009.162--2003动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊酯农药多组分残留量的测定》
本标准与CB/T5009.1622003相比主要修改如下：将GB/T5009.162一2003方法作为本标准的第二法，-增加以稳定性同位素六氯苯和灭数灵为内标的气相色谱-质谱法（GC·MS)作为阳性样品的确证方法（第一法），且增加穴氯苯，灭蚁灵，氯丹的异构体顺丹、反氯丹及其代谢产物氧氯丹，硫丹的异构体α-硫丹、β-硫丹和硫丹硫酸盐，异狄氏剂及其裂解产物异狄氏剂醛和光解产物异狄氏剂酮，五氯硝基苯及其代谢产物五氯苯基硫醚和五氯苯胺，丙烯菊酯，杀螨及甲氰菊酯组分的检测
提供全白动凝胶渗透色谱系统进行净化的方法，供选择使用。本标准的附录A、附录B、附录C为资料性附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口，本标准由中华人民共和国卫4生部负责解释。本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准主要起草人：第一法，灵永宁、正绪卿、赵云峰、陈惠京、杨欣、杨大进；第二法，王绪卿、陈惠京、林嫒真。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-G3/T5009.162—2003
ht
1范围
GB/T5009.162—2008
动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊酯农药多组分残留量的测定
本标准第一法规定了动物性食品中八八六，滴滴涕、六氯苯、七氯、环氧七氯、氛丹、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、火蚁灵、五氨硝基苯、硫丹、除螨酯、丙烯菊酯、杀螨、杀螨酯、胺菊酯、甲氰菊酯、氯菊酯、氟氰菊酯、氰戊菊酯、溴鼠菊酯的气相色谱-质谱（GC-MS)测定方法。本标准第二法规定了动物性食品中六六六、滴滴梯，五氯硝基苯、七氯、环氧七氯、艾氏剂、狄氏剂、除螨酯、杀螨酯、胺菊酯、氯菊酶、氯氰翁酯、α~鼠菊酯、溴氰菊酯的气相色谱-电了捕获器（(C-FCD）測定方法。
本标准第一法适用于肉类、蛋类、乳类食品及油脂（含植物油）中α-六六六、六氯苯、β-六六六、7-六六六、五氮硝基苯、8·六六六、五氯苯胺、七氯、五氯苯基硫醚、艾氏剂、氧氟丹、环氧七氯、反氯丹、硫丹、顾氯丹、P,p'-滴漓伊、狄氏剂、异狄氏剂、β-硫丹、P，P-滴滴滴、0,P-滴滴涕、异狄氏剂醛、硫丹硫酸盐、力，β-滴滴沸，异狭氏剂酮、灭蚁灭、除螨酯、丙烯菊酯、杀螨、茶杀螨酯、胺菊酯、甲氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴鼠菊酯的确证分析。本标准第二法适用于肉类，蛋类及乳类动物性食品中α-六六六、β-六六六、Y-六六六、-六六六，五氯硝基苯、七氯、环氧七氯、艾氏剂、狄氏剂、除螨酯、杀螨酷、P，P-滴滴伊、，力-滴滴滴、0.力-滴滴涕、P，P-滴滴涕、胺菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、凸-氰戊菊酯，溴氨翁酯等20种常用有机氯农药和拟除虫菊酷农药残留量分析。
本标准第一法的各种农药检出限（μg/kg）为：α-六六六0.20入氯举0.20；β-六八六0.20;-六六入0.20，五氯硝基苯0.50；3-六六六0.20；万氯苯胺0.50；七氯0.50，五氯苯基硫醚0.50；艾氏剂0.50氧氯丹0.20；坏氧七氯0.50；反氯丹0.20；m-硫丹0.50；顺氛丹0.20；P：p-滴滴伊0.20；狄氏剂0.20异狄氏剂0.50；P-硫丹0.50力，p°-滴滴滴0.20;0，力-滴滴沸0.20，异狄氏剂醛0.50；硫丹硫酸盐0.50P，p-滴滴涕0.20：异狄氏剂酮0.50，灭蚁灵0.20；除螨酯0.50；丙烯菊酯0.50；茶螨螨0.50；杀螨酯0.50；胺菊酯1.00；甲氰粥1.00；氯菊酯1.00;氯氰菊酯2.00；氰戊菊酯2.00；溴氰菊酯2.00。本标准第法的各种农药检出限（μg/kg）为：α-六六八0.25：β-六六六0.50；-六六六0.25；8-六六六0.25；五氮硝基苯0.25；七氟0.50；坏氧七氮0.50；艾氏剂0.25；狄氏剂0.50；除螨酯1.25；杀螨酯1.25；P+p-滴滴梯0.50;0，力-滴滴涕0.50：力，p-滴滴饼0.60;pp-滴滴滴0.75；胺菊酯12.50氯菊酯7.50;氯氰菊酯2.00Q-氰戊菊酯2.50;漠氰菊酪2.50。第一法气相色谱-质谱法
2原理
在均勾的试样溶液中定量加入13C-六氯苯和13C-灭蚁灵稳定性同位素内标，经有机溶剂振荡提取、凝胶色谱层析净化，采用选择离子监测的气相色谱-质谱法（GC-MS)测定，以内标法定量。3试剂
3.1内酮(CH，COCHg)：分析纯，重蒸。3.2石油醚：沸程30℃～60℃，分析纯，重热1
金品水伴区
GB/T 5009.162—2008
艺酸乙酯(CH.COOCH)：分析，重蒸3.3
3.4环己烷（CII）：分析纯，重蒸。3.5
正已烷（n-CH14）：分析纯，重蒸。氢化钠(NaCI)：分析纯
3.7无水硫酸钠（NazSO,）：分析纯，将无水硫酸钠置于干燥箱中，于120℃十燥4h，冷却后，密闭保存。
3.8避胶：BioBeadsS-x3200日~400百。3.9
农药标准品：见表1。
有机氯农药
农药组分
α-六穴六
六氯苯
β·六六六
-六六六
六六六
五氯苯胺
五氨苯基硫醚
艾氏剂
氧氯丹
氧七氣
反氧丹
r-碰丹
顺氟丹
力，力-滴滴桃
狄氏剂
异狄氏剂
品硫丹
力,如-滴滴滴
u-n'-滴滴涕
异狭氏剂醛
硫丹硫酸盐
-滴滴滞
异狄氏剂酶
灭蚊灵
表1农药标准品
英文名称
α benzenehexichloride (α- HCH)Hexachlurobetzene(HCB)
g-benzenchexachloridet β-HCH)y-henzenehexachloride(y-HCH)Pentachloronitrohenzene(PCNB)-benxenchexachloride(-HCH)
Pentachloraniline(PCA,
Heptachlor(HEPT)
Pentachlurophcnyl sulfide (FCPs)Adrin(ALD)
(Oxychlatdane
Heplachlor epoxide(HCE)
frans-chlardane
q-endosulfan
cis-chlordlenc
p,p-DRE
Dieldrin(DIE)
Endrin
β-endosulfan
p'-Dn)
o+P'-DDT
Endrin aldehyde
Endosulfan sulfate
Pp'-DT
Endrin ketone
农药纯度
≥99%
≥99%
拟除虫菊酯
同位素内标
农药纽分
除螨酯
丙烯菊酯
杀螨螨
杀螨酯
胺菊酯
甲鼠菊酯
氮氰菊酯
氰戊葡酯
溴鼠醋
aC-六氟苯
aChn-灭蚊灵
表1（续）
英文名称
Fenson
Allethrin
2,4-dichloraphcnyl benzensulfonateOvex
Tetramethrin
Fenpropathrin
Permethrin
Cypcrmethrin
Feuralerate
Deltamemhrin
13Ca-hexachlorobenzene(\Ce-HCB)Cro-rmirex (3Ca mitex)
GB/T5009.162—2008
农药纯度
≥99%
3.10标准溶液：分别准确称取上述农药标准品适量，用少量苯解，再用正已烷稀释成一定浓度的标准储备溶液。量适量标准储备液，用正已烷稀释为系列混合标准溶液。3.11内标溶液：将浓度为1000mg/I体积为1mI的13Cs穴氯苯和13C1灭蚁灵稳定性同位素内标溶独转移至容量瓶中，分别用正已烷定容至10.00mL,配制成100mg/L的标准储备液，20℃冰箱保存。取此标准储备液0.6mL，分别用正已烷定容至10.00ml-，配制成6.0mg/L.的标准工作液。
4仪器
4.1气相色谱-质谱联用仪（GC-MS)。4.2凝胶净化柱：长30cm、内径2.3cm～2.5cm具活塞玻璃层析柱，柱底少许玻璃棉，用洗脱剂乙酸乙酯-环已烷(1+1)浸泡的避胶，以湿法装人柱中，柱高约26 cm,使凝胶始终保持在洗脱剂中。4.3全自动凝胶色谱系统，带有固定波长（251nm）紫外检测器，供选择使用。4.4旋转蒸发仪。
4.5组织匀浆器。
4.6振荡器。
4.7氮气浓缩器。
5分析步骤
5.1试样制备
蛋品去壳，制成勾浆；肉品去筋后，切成小块，制成肉魔：乳品混勾待用。5.2提取与分配
5.2.1蛋类：称取试样20g（精确到0.0lg），置于200mLH塞角瓶中，加水5mL<视试样水分含量加水，使总含水景约20g。通常鲜蛋水分含量约75%，加水5mL即可），加人\C六氮苯（6mg/L)和GB/T5009.162—2008
1\C灭蚁灵（6mg/L)各5μL，加入10mL丙酮，搬摄30min后，加人氯化钠6g，充分擦匀，再加人30ml.在油醛，振30trin。静置分层后，将有机相企部转移至100mL具塞三角瓶中经无水硫酸钠干煤燥，并量取35mL于旋转蒸发瓶中，浓缩至约1mL，加2mL乙酸乙酯-环已烧（1十1)溶液再浓缩，如此重复3次，浓缩至约1mI.，供凝胶色谱层析净化使用，或将浓缩液转移牟全自动凝胶渗透色谱系统配套的进样试管中，用乙酸乙酯-环己烷（1十1）溶液洗涤旋转蒸发瓶数次，将洗涤液合并至试管中，定容至10 mI。
5.2.2肉类：称取试样2g（精确到0.0lg).加水6mL（视试样水分含量加水，使总含水量约为20g。通常鲜肉水分含量约70%，加水6ml.即可），加入\C六氯苯（6mg/L）和\Clu灭蚁灵（6mg/L）各5μL，再加入40mL内酮，振摇30min。其余操作与5.2.1从\加入氯化钠6g\开始的蛋类操作相同，按照执行。bzxZ.net
5.2.3乳类：称取试样20g（精确到0.01g，鲜乳不需加水，直接加丙酮提取），加人1sCs六氮苯（6mg/1）和Cio灭蚁灵（6mg/L）各5μL，再加人40mL内酮，振摇30min。其余操作与5.2.1从“加人氯化钠6g”开始的强类操作相同，按照执行。5.2.4油脂称取1g（精确到0.01g），加15C六氯米（6mg/L）和C灭蚁灵（6mg/L)各5μL，加入30mL石油醚振摇30min后，将有机相全部转移牟旋转蒸发瓶中，浓缩至约1ml.，加人2mL乙酸乙酯-环已烧（1十1)溶液再浓缩，如此垂复3次，浓缩至约1mL，供凝胶色谱层析净化使用，或将浓缩液转移至全自动凝胶渗透色谱系统配套的进样试管中，用乙酸乙酯-环已烷（1十1)溶液洗涤旋转蒸发瓶数次，将洗涤液合并至试管中，定容至10ml.。5.3净化
选择手动或全自动净化方法的任何一种进行，5.3.1手动凝胶色谱柱净化：将试样浓缩液经凝胶柱以乙酸乙酯-环已烷（1十1）溶液洗脱，弃去0tnL～35ml流分，收集 35mL～70ml流分。将其旋转蒸发浓缩至约1mL，再重复上述步骤，收集35mL～70mL流分，蒸发浓缩，用氮气吹除溶剂，再用正已烧定牟1mL，留待GC-MS分析。5.3.2全白动凝胶渗透色谱系统GPC)净化：试样由5mL试样环注入GFC柱，泵流速5.0mL/min用乙酸乙酯-环已烷（1+十1)溶液洗脱，时间程序为：弃去0min~～7.5min流分，收集7.5min~-15min流分，15min~20min冲洗GPC柱。将收集的流分旋转蒸发浓缩至约1mL用氮气吹至近干，以正已烷定容至 1 mL，留待 GC-MS分析。5.4测定
5.4.1气相色谱考条件
5. 4. 1. 1色谱柱:cP-sil 8毛细管柱或等效柱,柱长 30 m,膜厚 0. 25 μm,内径 0. 25 mm。5.4.1.2进样口温度：230C。
5.4.1.3柱温程序：初始温度50℃，保持1min，以30℃/min升至150℃，再以5℃/min升至185℃，然后以10℃/min升至280℃，保持10min。进样方式：不分流进样，不分流阀关闭时间1 in。5.4. 1.4
进样量：1μL
5. 4. 1. 5
5.4.1.6截气：使用高纯氮气（纯度>99.999%),柱前压为41.4kPa(相当于6psi)。5.4.2质谱参数
离了化方式：电了轰击源（EI).能量为70 eV，5. 4.2. 1
离子检测方式：选择离了监测（SIM)，各组分选择的特征离子参见录A。5, 4.2. 2
5, 4. 2. 37
离子源温度：250℃。
接口温度：285℃：
5.4.2.5分析器电压：150V。
5.4.2.6扫描质量范围：50u~450u。5.4.2.7溶剂延返:9in。
5.4.2.8扫描速度：每秒扫描1次。5.4.3测定
GB/T 5009.162—2008
吸取试样溶液1叫L进样，记录色谱图（参见附录B）及各目标化合物和内标的峰面积，计算目标化合物与相应内标的峰面积比。
6结果计算
试样中各表药组分的含量按式(1)进行计算：X=Axf
式中：
X--试样中各农药组分的含量，单位为微克每干克（ug/kg);A试样色谱峰与内标色谱峰的峰面积比值对应的月标化合物质量，单位为纳克（ng）；——试样溶液的稀释因了；
m一试样的坡样量，单位为克（g）。计算结果保留三位有效数字。
7精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%，方法测定不确定度参见附录 C。
第二法气相色谱-电子捕获检测器法（GC-ECD)8原理
样品经提取、净化、浓缩、定容，用毛细管柱气相色谱分离，电子捕获检测器检测，以保留时间定性，外标法定量。出峰顺序：α-HCH、B-HCH、-HCH、五氯硝基苯、3-HCH、七氯、艾氏剂、除螨酯、环氧七氯、杀螨酯、狄氏剂、P,p'-DDF、,P-DDD、0,β-DDT.,P-DDT、胺菊酯、氟菊酯、氯氰菊酯、α-氰戊菊酯、溴氰菊酯。
9试剂
9.1丙酶:重蒸，
9.2二氟甲烷：重蒸。
9.3乙酸乙酯：重蒸。
9.4环已烷：重蒸。
9.5正已烷：重蒸。
9.6石油醚：沸程30℃～60℃，分析纯，重蒸。9.7氮化钠。
9.8无水硫酸钠。
9.9凝胶：Bio-BcadsS-X3200月～400目。9.10农药标准品：见表2。
GB/T5009.162—2008
α六六大
六八六
号六六六
农药组分
，-滴滴沸
op滴滴递
，p\-滴滴伊
p,p滴滴滴
五氯硝基睾
环氧士氯
艾氏剂
敬氏剂
除螨酯
杀螨酯
胺菊酯
氯戊酯
漠氨菊酯
表2农药标准品览表
英文名称
α-HCH
Pp-DDD
Quintozenc
Huptachlor
Heptachlor epoxide
Aldrin
BDicldrin
Fenson
Chlarfensan
Phthalthrin
Permethrin
Cypermethrin
a-ferivalerate
Deltamethrin
标准溶液：分别谁确称取表2中标准品，用少量苯溶解，再以正己烷稀释成一定浓度的储备液。根据各农药在仪器上的响应情况，以正已烷配制混合标准应用液。10仪器
10.1气相色谱仪：具电子铺获检测器，毛细管色谱住10.2旋转蒸发仪。
10.3凝胶净化柱：长30cm、内径2.5ctm1具活塞玻璃层析柱，柱底挚少诈玻璃棉。用洗脱剂乙酸乙酯-环已烷（1十1）浸泡的凝胶以湿法装人柱中，柱高约26cm，使凝胶始终保持在洗脱液中。11分析步骤
11.1试样制备
蛋品去壳，制成匀浆；肉品去筋后，切成小块，制成肉糜；乳品混句待用。11.2提取与分配
11.2. 1 称取蛋类样品 20 g(精确至 0. 01 g),于 100 ml 具塞三角瓶中,加水 5 InL(视样品水分含量加水，使总水最约20名。通常鲜蛋水分含量约75%，加水5mL即可），加40mL丙酮，振播30min，加氯化钠6g，充分摇勾，再加30mL石油醚，振摇30tmin。取35tmL上清液，经无水硫酸钠滤于旋转蒸发瓶中，浓缩至约 1 mL,加2 mL乙酸乙酯-坏已烷(1+-1)溶液再浓缩,如此重复 3次,浓缩至约 1 mL。11.2.2称取肉类样品 20 g(精确至 0.01 g)，加水 6 mL(规样品水分含量加水,使总水量约20 g。通常鲜肉水分含量约70%，加水6mL即而），以下按照11.2.1蛋类样品的提取、分配步骤处理，6
合品伙体网t
GB/T5009.162-—2008
11.2.3称取乳类样品20g（精确至0.01g。鲜乳不需加水，直接加丙酮提取），以下按照11.2.1蛋类样品的提取、分配步骤处理。
11.3净化
将此浓缩液经凝胶柱以乙酸乙酯环已烷（1+1）溶液洗脱，弃去0mL～35mL流分，收集35mL~70mL流分。将其旋转蒸发缩至约11mL，再经避胶柱净化收集35mL～70mL流分，蒸发浓缩，用氮气吹除溶剂，以石油醚定容至1mI，留待GC分析。11.4测定
11.4.1气相色谱参考条件
色谱柱：涂以0V-1010.25μm，30m×0.32mm（内径）石英弹性毛细管柱。11. 4. 1, 1
11. 4. 1. 2
柱温;程序乃温
60 ℃(1 min)
40℃/min
2 C/min
170℃
11.4. 1.3进样口温度:270℃。
40/min
+280 C(10 min).
11.4.1.4检测器：电子捕获检测器（ECD)，300℃。11.4.1.5载气流速：氮气(N.)1ml/min，尾吹50mL/min。11.4.2色谱分析
分别量取1工混合标准液及试样净化液注人气相色谱仪中，以保留时间定性，以试样和标准的峰高或峰面积比较定量。
11.4.3色谱图
见图1。
-六六六：
2—3-六六六;
-六六六：
五氯硝基苯；
含-六六六
七氯，
艾氏剂；
除螨酯；
环氧七氣：
10-—杀酯磺；
图1色谱图
合品伙伴网ht
一狄氏剂；
，力-滴滴伊，
p,力-滴滴滴；
o.p滴滴沸：
p+p-滴滴沸；
胺鞘循；
氮菊酯；
氨鼠菊酯;
一α-氰戊翁酯;
溴氰菊酯。
GB/r5009.162—2008
结果计算
试样中各农药的含鼠按式（2)进行计算：m:X Vz×1 000
nxVx1000
式中；
样品中各农药的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）)；X
被測样液中各农药的含量，单位为纳克（ng)；样液最后定容体积，单位为毫升（mL）；V.
m—试样质量，单位为克(g)；
V，样液进样体积，单位为微升（μL）。计算结果保留两位有效数字。
精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。8
http：//foodmate.net+--(2
附录A
（资料性附录）
第一法(GC-MS)中各自标化合物时间窗口及定量离子第一法（GC-MS)中各月标化合物时间窗口及定量离子，见表A.1。GB/T5009.162—2008
第一法（GC-MS)中各尽标化合物时间窗口及定盘离子表A,1
离于通道
药组分
α-六六六
β六六六
六六六
六六六
六氣苯
1-入氯苯
五氯硝基苯
五氯苯胺
五氯苯基硫醚
艾氏剂
除螨酯
氧氧丹
环氧七氣
芮烯菊酯
反式鐵丹
顺式氯丹
a-硫丹
杀螨蝶
杀螨酯
异狄氏别
β-硫丹
异狄氏剂醛
P,p'-DDD
o,p-DDT
P,p'-DDT
硫丹硫酸酯
异狄氏剂酮
时间俯口/min
9. 0 ~12. 9
9. 0 -~12. 9
9.0~-12.9
9. 0~-12. 9
12. 9~14. 5
14. 5~15. 0
Is.0~~15.7
15, 0~~15,. 7
15. 7 ~17. 1
15. 7 ~-17. 1
15. 7 ~17. 1
15.7~-17.1
15. 7 ~17. 1
17. 1~-19. 0
17. 1 -~19. 0
17. 1--19. 0
19.0--20.1
定壁离子（m/z）
296,298
263、265
77、141
373、375
141、77
175、111
316、318
263、265
195、193
345、347
272、274
317、319
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