【农业行业标准(NY)】 小麦抗病虫性评价技术规范 第3部分:小麦抗秆锈病评价技术规范

ICS 65.020.01
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1443.3—2007
小麦抗病虫性评价技术规范
第3部分：小麦抗秆锈病评价技术规范Rules for Resistance Fvaluation of Wheat to Discases and Insect PestsPart3: Rale for Resistance Evaluation of Wheat to Stem Rust[Puccinia graminis (Pers. )f. sp. tritici Eriks. ct Henn.]2007-01-14发布
2007-12-01实施
中华人民共和国农业部
NY/T1443—20X07《小麦抗病虫性评价技术规范》为系列标准。m一第1部分：小麦抗条诱病评价技术规范；策2部分：小衰抗叶锈病评价技代规范；-第3部分：小麦抗释锈病评价技术规范；第4部分：小麦抗亦等病评价技术规范；第5部分：小麦抗纹粘病评价技不规范：第6部分：小麦抗黄矮病评价技长规范；-一第7部分：小麦抗蚜虫评价技术规范；第8部分：小友抗吸浆虫评价技术规范，本部分为NY/11443的第3部分，
本部分的附录A为资科性附录,附录B为规范性附录。本部分由华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：中国农业科学院植物保护研究所。本部分十要起节人：陈万杖、刘太国、陈巨莲、徐业岛：NY/T1443.3—2007
1范围
小麦抗病虫性评价技术规范
第3部分：小麦抗秆锈病评价技术规范本标谁规定了小麦抗秤锈病整定技术和抗性评价汀法。NY/T 1443.32007www.bzxz.net
本标准适用于普通小麦（包括选育品种/系、地方品种、特深遗传材料、近等基因系、重组自交系、DII群体）、杂交小麦、转基因小麦、其他栈培小麦种、野生小麦、小麦野生近缘种对小友锈病抗性的出问鉴定和评价。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准，2.1
抗病性disease resistance
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。2.2
慢锈性 slow rusting
在适于病害发生的环境条件下，寄主植物和病原物相.h.作用表现侵染型为3型一4型的感病反应，但口间病害发展速度相对较慢，终期病情指数低于30。2.3
致病性 pathogenicity
病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。2.4
人工接种artificial inoculation在适立条件下，通过人工操作将接种体放丁植物体感病部位并使之发病的过程。2.5
病情级别disease rating scale植物个体或群体发病程度的数值化描述2.6
抗性评价evalnatian of resistance根据采用的技术标推判别寄平植物对特定病虫害反应程度和抵抗水的描述。2.7
分离物　isulatc
采用人工方法从植物发病部位获得的在特定环境条件下培养的病原物。2.8
接种体inoculum
能够侵染寄主并引起病害的病原体。2.9
生理小种physiological race
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病原菌种、变种或专化型内的分类单位，各生理小种之间形态工无差异，但对具有不同抗病基因的鉴别品种的致病力存在差异：
鉴别寄主dirferential host
川于鉴定和区分特定病原菌生理小种或菌系的一套带有不同抗性基因的寄主品种。2.11
普遍率incidcuce
或称发病率，发病植物体单元数占调查植物体单元总数的百分率,用以表示发病的普遍程度。在本标准中，植物体单元为叶片。
严重度severity
发病植物单元上发病面积或体积占该单儿总面积或总体利的分率，亦可用分级法表示，即将发病的严重程度由轻到章划分出几个级别，分别用一些代表值表小，说明病害发生的严重程度。2.13
病情指数digease index
全而考虑发病率与严蛋度两者的综合指标。当严重度用分级代表值表示时，病情指数计算公式：(x: S)2
(X, S.x) ×100
其中，DI为病情指数，i为病级数（0~n)，X，为级的单元数，S：为级严重度的代表值，S为产重度最高级值，为累如符号，从口级(无病单位)并始累加。当严重度用有分率表示时，则用以下公式订算：DI = I × S ×100
其中，I为普通率，为平均严查度。2.14
侵染型 infectiou type
根据小麦过敏性环死反应有无和其强度划分的病斑类型，用以表示小变吊种抗条锈病程度，按0、1、2、3、4六个类型记载，各类型可附加”+“或””号，以表示偏重或偏轻。2.15
潜育期latent periodl
病原菌侵染小麦建立寄生关系后到被接种小麦表现症状之前的这一时期称为潜育期，2.16
whcat stem rust
小麦秤锈病
由小麦杆锈病菌Pucinia gruninis(Icrs.)f.sp.tritici Eriks.el Hem.引起的以秆或叶片上产尘欲锈状病斑症状的小友病卉。成株期小变科锈病正要发牛在叶鞘和萃秆上，过为叶片和穗部。夏孢子堆大，长椭圆形，深褐色或竭色，排列不规则，散让，常连接成大斑，成熟后我皮易破裂，表皮大片裂且间外翻成唇状，散山大量诱褐色粉木，即夏绝子。小麦成熟时，在夏孢子堆及其附近出现黑色概圆至长条形冬孢子堆，后期表皮破裂，散山色粉米状物，即冬抱子。3病原物接种体制备
3.1小麦秆锈菌分离
采华具有典型杆锈病病斑的小麦发病恐秤或叶片置于循有滤纸的培养咀中，平展叶片或禁秆，浸泡16h~-24h，用刀片刮项发病病斑，将刮下的夏孢子涂抹于感病品种Mcair701（LittleClub或铭竖169）2
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叶片t.,用清水均勾喷雾，臀于15℃～24℃的保湿问内黑暗保湿18h～24h,15d～17d后观察是否发病，获得分离物。分离物经形态学鉴定确认为Pucciniagraminis（Pcrs.)f.sp，triticiEriks.ctHenn.后，进行单孢(堆)纯化,致病性测定后,扩保存备用。3.2小麦杆锈菌分离菌株的生理小种鉴定将用」抗性鉴定接种的分离物芹先进行生小种鉴定。生埋小种鉴别寄主采用一套国际标准鉴别寄主、国内辅助鉴别寄主及含有 Sr5.Sr6.Sr76.Sr8a、Sr9b、Sr9e.Sr9g、Sr11.Sr17、Sr21S-30 和536的12个单基国系，根据杆锈菌与鉴别等主相.作用产生的抗病或感病模式，划分出不同的生理小种战致病奖型（见附录A,2)。
3.3小麦杆锈菌攀殖和保存
3.3.1育苗
秆锈菌夏孢了在MeNait701(Lilule Club或铭贤169)上繁殖，即选用首径为10 crr,高度为10 u的花盆,装富含有机质的上暖，每盆播种20)糍--25粒健康饱满感病品种Mc:Nair70i(IL.ittlcClub或铭贤169),覆十1cm,将育苗体置于盛水的育苗盘内，使水从育苗钵底部缓慢吸收至十表光伞漩润,移出，置十 15℃～20%;温室内培养 6 d--8 d,待用。3.3.2接种
接种在操作台（或接种间)内进行。首先用喷雾法净化空气，再用75%的乙醇对操作台（接种间）接种针和手逊行消毒：将待接种幼芯放在操作台（接种间)上，在幼萨转稀时要套装或采其他惜施阴止空气巾的孢子污染；写标签，记录接种日期及接种的菌种编号;用于取小友秆诱菌夏孢子（或者从标样保湿后刮取少最夏孢子），接种到无菌苗的第一叶片上：3.3.3保湿
将接种后的幼苗置保湿桶中，用消水喷穿，使叶片表面附着一层水膜，密封，15一24℃黑暗条件下保湿24hl
3.3.4菌种繁
菌种繁殖分为初繁和扩繁，
初繁：待光菌苗McNair701(Little.Club或铭竖169)第一叶片全部溅开，从液氮中取出装有菌利的蛋航瓶，在40温水中活化51nin～7mi\,之片打开敲瓶，置于綫有湿润滤纸的培养川中（柑对诞度火丁50%）了(20_5)℃黑暗条件下水化10 h--12hs涂抹法：此法主要在繁殖少量菌种或接种少量鉴材料时应用。从指形臂于取出少许锈菌夏孢于放在洁舒的毛玻璃，用滴管加人少最水，用接种针杆锈菌孢子与水拌备用：好外，用洁静的手指蘸清水或0.05%叫温20(Twccn20)水溶羧将麦苗的叶片摩擦数次，去掉叶片表面的蜡质和芹毛，以利于菌液吸附于叶而上。用消毒过的接种针上调制好的孢子悬浮液，涂抹于奏叶下表面，标签，记接种日期及所用菌利。接科后把支苗随即放入保湿桶中，再用清水喷雾，使支苗和保漩桶的内壁满雾滴即可，喷雾不能过量。喷雾后，马.上.蔬严塑料薄膜或玻璃，保湿桶置于（20士5)黑暗条件下保18 h--24 h.
在接种不同生理小种时，接种用的一切用具都要先行消毒，防比可能发生的污染：扩繁：可采用涂抹法、扫抹法、喷（撒）粉法或喷穿法接种。扫抹法：先将一叶期的McNai:701(LirtleClub或铭货169）置于接种稀内，用0.05%的Tween20水溶液叶面喷雾，然后将发病幼节倒置，使发病叶片在接种桶内的无菌节叶片上扫抹3次5次，再用0.05%的Tween20永溶被喷雾，使叶片表面附着-层均勾的露滴，密封，置于（20土5)C黑暗条件下保湿 18 h -- 24 h.
喷（撒)粉法：小喷粉器（或用双尽纱布封口的玻璃试管)经消毒、干燥后，按20--30：1比例均匀混合十燥滑不粉与秆锈菌夏孢了，接种前，用于蘸水将叶片拂擦数次，以去掉叶片蜡质，用喷等器在麦3
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苗十均句喷露滴，随即用喷粉器（或闭双层纱布过的玻璃试管）将上述稀释的夏趣了粉均勾地喷酒（或抖落）叶片，剂喷雾器喷雾，随即放入保涩桶中，盖料薄膜，置于（20工5）%黑暗条件下保湿 18 h--24 h.
喷雾法：用小型喷雾器将制备好的孢子悬浮液（取秆锈菌夏孢子置丁小烧杯内，先用少量清水湿润后，搅成糊状，按照2g抱子：1000mL比例川人水，转移至喷雾器内；或按10mg夏孢了：1mL无毒轻最矿物油一Soltrol7U的比例稀释成夏孢子悬浮液)喷在已去除蜡质的麦节上，白然下燥15min～30rrin然后将麦苗放于保湿内，置于（20=5)℃黑暗条件下保湿18h-24h喷(撤)粉法及喷雾法适于对大量材料的接种鉴定。3.3.5潜育发病
取出保湿的幼苗，置于可控制温度和光照的温室内潜育发病，保括尽温25℃~30℃，夜温18℃--25℃：光照强度6000Lux-10000Lax，光照时问16h，待叶片现斑时（接种后约7）剪去心[，期破璃率隔离保存。接种后约12d~15d,夏孢了即可成熟，待用。3.3.6菌种收集
空气净化利器具消寿操作同3.3.2，轻取产孢麦菌，小心模放，用接种针轻轻抖动其叶片，使菌种散落到玻璃罩内，移去麦苗，再轻敲玻璃留，将菌种集中，装人指形管3.3.7菌种保藏
根据待用时间的长短，菌种保藏可分短期保藏和长期保藏。3.3.7.1短期保藏
当菌种在5d~6d内使用时前短期保藏。将裂菌种的指形借放入盛有变色硅胶的下燥器内，置于0-5C冰箱中
3.3.7.2长期保藏
当菌种将在第二年或史长时间后使用时可采用长期保藏。将菌种置十盛有变色硅胶的十燥器内，放在0℃--5℃冰箱中十燥5d-·6d，移至安管中，抽真空30mi，封管，置于氮或-80℃超低温冰箱4田间抗性鉴定
由问抗性鉴定在鉴定内进行。
4.1鉴定圃选址
鉴定画应设置在小麦杆锈病适发区，选择备良好的白然发病环境和灌溉条件、地势平坦、土壤肥沃的地焕。
4.2监定感病对照品种和诱发行品种选择鉴定感病对照品种利诱发行品称均采用铭贤169。4.3鉴定圃田间配置及大田播神
4.3.1田间配置
采用开唯条播、等行距配置方式，畔宽50cm，睦宽250cm.睡长视地形、地势而定；距壁125cm处顺唑种1行诱发行，在诱发行两侧20cm横向种植馨定材料，行长100cm，行所33cm，章复1次～3次，顺序排列，编号，鉴定圃四周设100cm宽的保护区。4
说明：
4.3.2播种
避形症表示哦堰
：实线表示语发行和对照品种；表示鉴定利料。
图1鉴定田间配置示意图
4.3.2.1播种时间
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播种时间与大日生产一致，或适当调整不同材料的播期以使植株接种期和发病期能够与适宜的气候条件（湿度与温度）相遇。冬性材料按当地气候正常秋播，弱冬性材料晚秋播，春性材料顶凌春播。4.3.2.2播种方式及播种量
采用人下开沟条播方式。每份材料播科1行，每隔20份鉴定材料播种1行感病对照品种铭贤169，鉴定材料每行均匀播种100粒；诱发行按每100cm行长均匀播种100粒。4.4接种
4.4.1接种期
小变杆锈病抗性鉴定接种期为小发穗期，逃择啃明无风大的傍晚进行。4.4.2接种方法
采用夏孢子悬浮液喷零法、喷（激）粉法或注射法接种诱发行，利用诱发行发病后产生的夏孢子再传播侵染鉴定材料。根据鉴定需要选择单小种或混合小种。具体操作是将所浣生睡小种的夏孢子粉用数滴0.05%的Tween20水溶液调成糊状，接2g抱子11000mL水的比例稀释成夏孢于悬浮液，诱发行每隔500cm设100cm长的接种段，用乎持式喷雾器将夏孢了悬浮液均勾喷洒在接种段的小麦叶片.上，之后速盖塑料薄膜，四周用土压严，次口清晨揭去满膜。注射法。此法多用于支苗有：-定牛长高度的拔节期或孕穗期。接种前，应配制好孢子忌浮液，配制同喷雾法，一般在诱发行上每隔100cY在右选取10个20个单茎分别注射接种。其方法是用注射器将抱子悬浮液从小麦心叶与其下的展开叶叶鞘相接处以下11处江射，针头宜间下倾斜刺入，但不要刺穿，挤压少量悬浮液，以见到心叶处冒出水珠为度。孢了总浮液必须随用随搅拌或震荡。田间接种注射最好在阴天的傍晚逃行。如火气十早，接种后在接种点上挠水1次--2次，也可以在接种前或接种后适当灌水。再次接种时，间隔3d～5d，选择诱发行不同的接种段接种，4.5接种前后田间管理
在接种前6d--7应先进行间灌溉，或在雨后接种；接种后若遇持绞干早，应及时进行出门浇灌，不施用任何杀菌剂。
5病情调查
5.1调查时间
在小麦进人乳熟期至腊熟期进行调查。5.2调查方法
调查时每份材料随机抽样50垫，逐尘进行调查，记载严重度、侵染型，计算普遍率、平均严重度利病情指数，调查2次，间隔10d
5.3发病程度记载及标准
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5.3.1侵染型记载及标准
小麦成株期病斑侵染型按0、:、1、2、3.4八个类型划分，苗期病斑侵染型按0.；1、2,X、Y、7.3.4九个类型划分，用以表示小麦品种抗锈程度。侵染型类型及判别标准见表1，根据各级侵染型的症状描述,逐(叶)调杏记载侵染型，
表1小麦秆锈病侵染型级别及其症状描述侵染型
无爱孢于或者较大的侵黎点
症状萌迷
无夏孢子，但存在不同大小的过敏性坏死斑或者凝绿斑是均子班小，周围有茄死反应
夏孢了堆小到中等，周亚有失绿或坏死反虚继培养物接稗时不同大小的夏独子堆在单个叶片！随机分布小同大小的夏抱子璀魏则排刻，天宴孢了堆排列在叶尖不河大小的享孢子堆规则排列，大夏孢子堆排列在叶基部夏疱子虽中等大小,周周红织越绿低很少茄死夏孢了堆大而多，眉国组织无裤绿或枯死反应注：侵炎型级别经肾川郊下符号进行精细划分，即“二”，支孢子堆较止常侵染型夏孢子堀略小；“.”：夏泡了唯较正带侵染型夏抱子准略大；“C\：诞绿较止常侵染型多；“N\：坏死较正常侵染剂多。在单个叶片（蒙纤上有几种侵染型时可用”，开,主要慢染型记录在前,如4.;戒者2=,2+或者1,3C等。高梳CHR）
中抗（MR）
图2小麦秆锈病成株期侵染型分级图2
图3小麦秆锈病苗期侵染型分级图高感（H5）
5.3.2严重度记载及标准
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严重度用分缴法表示，设1%、5%、10%，20%、40%，60%80%、100%八级。调查时每份材料随机抽样调套50株小发，计算平肉严重度。S(%) =
其中，为平均严重度，为病级数（1～），X，为病情为：级的单元数，S为病情为：级的严重度值(如小麦秆锈病各级的百分数）。5.3.3普遍率记载及标准
每一鉴定材料随机调查50株，数发病尘秆数，计算普遍率普遍率（%）=（发病鉴数/调查总茎数）×100%6抗性评价
6.1鉴定有效性判别
当鉴定间中的感病或高感对照品种发病严重度达到6%以上时，该批次抗秆锈病鉴定视为有效：6.2童复鉴定
初次鉴定中表现为高抗、中抗的材料，次年需用相同的病原菌进行重复馨定。6.3抗性评份标准
依据凳定材料发病程度（病情指数和侵染型）确定其对条锈病的抗性水平，评价标准见表2。如果两年鉴定结果不一致，以抗性弱的发病程度为准，若一个鉴定群休中出现明显的抗、感类型差异，应在调查表中注明“抗性分离”,其比例以“/\隔并。表2小麦对秆锈病抗性评价标准
度染型
鉴定记载表格
病情指数
免度 Irintiune(IM)
抗性评价
近免疫Neetlyirmume(NIM)
高扰 Highly Resistant(HR)
中抗 Moderately trenistant(MR)俊锈Sloyrusting（SR）
中感 Moderately suscepible(MS)高感 Highly Sueceptible(HS)
小麦抗秆锈病鉴定原始记录,及结果记载表格见附录B。NY/T1443.3--2007
A.1学名和形态描述
附录A
【资料性附录】
小麦秆锈病病原菌和生理小种
小麦秆锈菌是禾柄锈菌小麦变种Pzuccinicgruznis(Pers.)f,sp，tritirz Erikes. Hetn,屑真菌界（Futigi）拒子菌（亚）门（Basidionyota），锈菌纲（Urecliniomycetes）柄锈菌科（Fuccinaceae），柄锈菌局(Puccinia）。菌丝丝状，有分隔，寄生在小麦细跑间隙，在小麦上产生夏孢子和冬孢子。夏孢子单胞，椭圆形,暗橙黄色，人小17 μm-·47 um×14 rm--22μm,表而生有棘状突起,中腰部有发芽孔4个。冬孢了双咆，棍摔形至纺锤形，人小35 μm--65 um×11um-22μm,顶端壁略厚,圆形或稍尖,柄长。该菌可产坐5种不同类型的孢。冬孢子萌发产生小孢子，小抱子为害转主寄主小檗，且在小檗叶片正血形成性孢广器及性孢子，在叶背面产生锈了器和綉孢了。小麦秆蘭致病性有生理分化现象，日前我国已命名4多个生理小种，其中21C3CKR、21C3CKTI、21C3CTR为优势致病类型。A.2生理小种鉴定方法
A.2.1 鉴别寄主
小麦秆锈菌牛理小种鉴别寄土采用国际标准鉴别宽主、国内辅助鉴别主及含有 Sr5,Sr6、Sr75、Sr8a、Sr9b、Sr9e、Sr-9g、Sr11、Sr17、Sr21、Sr30和Sr36的12个单基因系，开放式鉴别寄主包括：爱内亢（Finkon）、免宁52、明尼2761（Minncsota276l）、华东6号、如罗（Rulofen）、欧柔（Oofcn），根据秆锈菌与鉴别寄工相互作用产生的抗病或感病模式,划分出不同的生理小种或致病类型。A.2.2命名系统
小种命名采用复合命名法（表A,1)表A.1中国小麦秆锈菌生理小种类群在鉴别寄主幼苗上的侵染型生理小种及
致病类型
21C3CKII
21C3CKR
21C3CFH
21C3CFR
21C3CTH
21C3LIR
21C3C1H
21C3CPR
34MIFH
Rul. Oro.
鉴别窗及空单某因系
生理小种及
致病类型
34CIMEH
34CEMKR
34CIMFH
34C2MKH
34C2MKR
34C2MFH
34C2VFR
34C2MkK
注：“L\一低侵染型，\1I
高侵型。
表A.1（续）
鉴别资主及单基因察
NY/T 1443.3—2007
NY/T1443.3—2007
品种名称
注1鉴定地点
2：婆神病原菌分商物编号
注3:按种日期
4:播种H氓
注5:海拨高度
附录B
【规范性随录]
年小麦品种（系）抗秆锈病鉴定原始记录及结果记载表情级别
严重度(%)
退(%)
病情鉴定结果
151020405080100|均调查发病叶片数洞查总时片数平图拍数地势
生理心种类型
调查日期
鉴定技术负责人(签字)：
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