【农业行业标准(NY)】 小麦抗病虫性评价技术规范 第2部分:小麦抗叶锈病评价技术规范

ICS 65.020.01
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1443.2-2007
小麦抗病虫性评价技术规范
第2部分·小麦抗叶锈病评价技术规范Rules for Resistance Evaluation of Wheat to Diseases and Insect PestsPart2:Rule for Resistance Evaluation of Wheat to Leaf Rust [Pucciniatriticina (-P.recondita Roherge ex Desmaz. f. sp. tritici)]2007-01-14发布
2007-12-01实施
中华人民共和国农业部发布
NY/T1443.-2007小友抗病出性评价技术规范》为系列标准。-第1部分：小麦抗条锈病评价技术规范；第2部分：小麦抗叫锈病评价技术规范；第3部分：小麦抗秤病评价技术规范；-第4部分：小麦抗赤需病评价技术规范：一第5部分：小麦抗纹枯病评价技术规范：第6部分：小麦抗黄矮病评价技术规范：一第7部分：小支抗蚜出评价技代规范：一第8部分：小麦抗吸浆虫评价技术规范本部分为NY/T1443的第2部分。
本部分的附录A为资科性附录，附录B为规范性附录。本部分出中华人民共和国农业部提出并归。本部分起草单位：中国农业科学院植物保护研究所，本部分主起草人：陈权、刘太国、陈巨莲、徐推昌。NY/T1443.2—2007
1范围
小麦抗病虫性评价技术规范
第2部分：小麦抗叶锈病评价技术规范本标准规定了小麦抗叶锈病鉴定技术和抗性评价方法。NY/T1443.2--2007
本标准适用丁普通小麦（包括选育品种/系、地方品种、特殊遗传材料、近等基因系、重组自交系、LH群体）、杂交小麦、转基凶小麦、其他裁培小麦种、野牛小友、小麦野生近缘种对小麦叶锈病抗性的田间器定和评价。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本标。
抗病性disease resistanec
植物体所其有的能够减轻或,克服病原物效病作用的可遗传性状。2.2
瘦锈性skowrusting
在适于病害发生的环境条件下，寄主植物和病原物相点作用表现侵染型为3型-4型的感病反应，但出间病害发展速度相对较慢,终期病情指数低于30。2.3
致病性pathogenicity
病原物所具有的破坏寄主利引起病变的能力。2.4
人工接种artificialinoculalion2.5bZxz.net
在适宜条件下，通过人工操作将接种体放于枯物休感病部位并使之发病的过程。病情级别diseasc rating scale植物个休或群体发病程度的数值化描述。抗性评价 evaluntiun uf resistance根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病虫害反应程度和抵抗水平的描述：分离物isolate
采用人工方法从植物发病部位获得的在特定环境条件下培养的病原物接种体inocilum
能够侵染毒牛并引起病害的病原体。生理小种physiolngical race
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病原菌种、变种或专化型内的分类单位，各牛理小种之间形态上无差异，但对具有不同抗病基因的鉴别品种的致病力存在差异。
鉴别寄主differentialhost
用十鉴定和区分特定病原菌生理小种或菌系的一套带有不同抗性激闲的寄主品种2.11
普遍率incidence
或称发病率，发病植物体单元数占调查植物体单元总数的百分率，用以表示发病的普遍程度。在不标准中，植物体单元为叫片。
严重度severity
发病植物单无上发病面积或体积占该单元总而积或总体积的百分率，办可用分级法表示，即将发病的严重程度山轻到重划分出几个级则，分别用一些代表值表小，说明病辞发生的严重程度，2.13
病情指数diseasc index
全面考意发病率与严重度两者的综合指标。当严声度用分级代表值表示时，病情指数计算公式：DI = 2(X: : S)/2(X: - Smax) × 10)其中，DI为病情指数，为病级数(0一)，X为级的单元数，S为：级严重度的代表值，Sm为严重度最高级值，为累加符号，从0级(无病单位)并始累廊。当严重度用白分率表示附、则用以下公式计算：Dr-××100
其中，I为普遍率，5为平均严重度。2.14
侵染型infectiou type
根锯小麦过嫩性坏死反应有无和其强度划分的病斑类型，用以表示小麦品种抗叶锈病程度，按0、；、1、2、3、4六个类型记载，各类型可附加”\或-”号，以轰示偏革或偏轻。2.15
潜育期 latent period
病原菌侵染小麦建立寄生关系后到被接种小表现症状之前的这一时期称为潜育期，2.16
小麦叶锈病wheatleafrustorhrownrnstH小麦锈病菌Puceinia triticina（-P.mcnndita Raberge ex Dinaz.f.sp.tritiez)引起的以叶部产生铁锈状病斑症状的小麦病害。成株期小麦叶诱病主要为害小麦叶片，产生疱疹状病斑，很少发生在叶鞘及秆上：夏孢了堆画形至长椭圆形，橘红色，比秆锈病小，较条锈病人，虽不规则散生，在初坐夏孢了堆周围有时产生数个次生的夏孢子堆，般多发生在叶片的正而，少数可穿透叶并。成熟后表皮开裂菌，散叫橘黄色的夏孢了；冬孢了维丰要发尘在叶片背而利叫鞘干，圆形或长椭圆形，黑色，扁平，排列教乱，但成熟时不破裂，有」秆锈病和条锈病。3病原物接种体制备
3.1小麦叶锈菌分离
采集只有典型叶锈病斑的小麦发病叶片置于销有滤纸的培养血皿，平展叶片，漫池1611～24h，用2
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小片轻刮发病病斑，将利下的夏孢子涂抹十感病品种郑州5389（或诺贤169）-，用清水均均喷雾，置于(20±5)℃的保湿间内黑暗保湿1811～24h.14d后观察发病情况，获得分离物。分离物经形态学鉴定确认为Puccinia triticina（=P.rucandita Roberge ex Dcsmaz.f,sp.tritici)后，逊行分单孢纯化，经致病性测定后，扩繁保疗备用。
3.2小妻叶锈菌分离菌株的生理小种鉴定将用丁抗性鉴定接种的分离物首先逊行生理小种鉴定。生理小利鉴别寄主采用一套以1hacher为背景的分别含有Lr1、Lr2a、Lr2c、Lr3、L-3ka、Lr9、Lr11、L16、Lr17.Lr24、Lr-26和L.r30共12个抗病基闪的小麦材料，根叶锈菌与鉴别寄主相互作用产生的抗病或感病模式，划分出不尚的生理小种或致病类型（见附录A.2.3）
3.3小麦叶锈菌繁殖和保存
叶锈菌夏孢了在郑州5389（或铭贤169)上繁殖，即选用直径为10cm，尚度为10cm的花盆，装富含有机质的上壤，每贫播种20粒25粒健康饱满感病品种郑州5389（或铭贤169），覆上1cm，之后将育苗钵置于盛水的育盘内，使水从育苗钵底部缓慢吸收至让体表而完全湿润，移出，暨于（20+5)温室内培养6d~8d,待用
3.3.2接种
接种在操作台（或接种间)内进行，首先用喷等法净化空气，再用75%的乙醇对操作台（接种问）、接种针和手进行消毒：将待接种幼苗放在操作台（接种问）上，在幼节转移时要套装或采取其他措施防止空气中的孢广污染：写标签，记录接种口期及接种的菌种编号；用于取小麦叶锈菌夏孢了（或者从标样保湿后刮取的少量夏孢了),接种到无菌苗的第一叶片上。3.3.3保湿
将接种启的幼苗置于接种桶中，用清水喷雾，使叶片表面附着一层均句的雾滴，密封，在（20士5)黑暗条件下保湿18h--24h.
3.3.4菌种繁殖
初繁：待无菌苗郑州5389（或铭贤169)第-叶片全部展州后，从液氟中取出装有菌种的安瓶，在40℃温水中活化5min-7min之后置于盛有湿润滤纸的培养血+（相对湿度大于50%）了（20土5)黑暗条件下水化10h~12h
初繁采取涂抹法。此法主婴在繁殖少量菌种或接种少量鉴定材料时应用，从指形管中取出少许叶诱菌夏孢子放在洁净的毛玻璃上，用滴管加人少量水，用接种针将叶锈菌夏孢子与水拌勾备用，另外，用洁净的手指蘸清水或0.05%吡温20(Tween20)水溶液将麦苗的叶片摩擦数次，去掉叶片表面的蜡质利芹毛，以利于菌液吸附」叶而工。用消毒过的接种针蘸上调制好的孢子忌浮滋，涂抹」麦叶正面，插标签，记录接种期及所用菌种。接种后把麦苗随即放人保漩桶中，再喷雾清水，使麦苗利保湿桶的内壁沾满雾滴，位喷雾不能过量。喷雾后，上盖严塑料薄膜或玻璃，保湿桶置于（20+5)C黑暗条件下保湿18 h--24 hc
在接种不同生迎小种时，接种用的切用具部要先行消毒，防止可能发尘的污染。扩繁：可采用涂抹法、扫抹法、喷(撤)粉法崴喷雾法接种。扫报法：先将一叶期的郑州5389（或铭贤169）管于接种桶内，川前喷0.05%的TwCm20水溶液，然后将发病幼苗倒置，使病叶片在接种桶内的菌苗上扫抹3次～5次，再用0.05%的Tween.20水溶液喷雾，使叶片表面附着层均匀的雾滴.密封，置于（20+5)黑暗条件下保湿1824h喷（撒)粉法：小喷粉器（或用双层纱布封口的玻试管)经消毒、干燥底，按20~30:1的比例均句混合干燥滑石粉与叶锈菌夏孢子。接种前，用手蘸清水将叶片拂擦数次，以去掉叶片蜡质，用喷等器在麦苗上均分喷上雾滴，随即用喷粉器（或用双层纱布封口的玻璃试管）将上述蒂释的孢了粉沟勾地喷洒（或3
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抖落)于叶片上，再喷雾清水，随即放人保湿栖中，使麦白、保湿桶内赔及塑料薄膜内表面都沾工水滴，学握水滴不下滴为度，盖上塑料薄膜，于（205）C黑暗条件下保湿181~24h喷雾法：用小型喷雾器将制务好的新解孢子悬浮液（取叶诱菌夏孢子置于小烧杯内，先用少量满水湿润后，搅成糊状，按照2g孢子：1000ml.比例加入水，转移系喷雾器内；或按10mg夏孢了：1ml.无毒轻量矿物油一Soltro1170的比例稀释成度孢了总浮液)喷在己去除蜡质的发苗.上，自然干燥15mir30min.然后将表当放于保桶置于（20±5)让黑暗条件下保湿18h--24h喷(撒)粉法及喷雾法透于对大量材料的接种鉴定，3.3.5潜育发病
取出保湿的动苗，置于可控制温度的温室内潜食发病，冬季光照不足，需每火增加一定时间的人辅助光照，温度范圆：昼20%--25℃，夜15℃～20℃：光照强度：6000Lux-1000)1ux，光照时间：16h。待侵染点始现时（接种后4d)，剪去心叶，加玻璃军隔离：接种后约12d-15d.夏孢子邸可成熟，待用。
3.3.6菌种收集
空气奇化和器具消萨操作同3.3.2，轻取产疤麦苗小心横放，用接种针轻轻抖动其叶片.使岗种散落到玻璃罩内，移去友苗，心轻敲玻璃罩,将茵种集中，装人指形管。3.3.7菌种保藏
根据待用时间的长短，菌种保藏可分短期保藏和长期保藏3.3.7.1短期保藏
当菌种在5d～6d内使用时可短期保藏：将装菌和的指形管政人盛有变色碎胶的干燥器内，量于o℃5℃冰箱中备用。
3.3.7.2长期保藏
当菌种将在第二年或更长时间后使用时可采用长期保。将菌种置于有变色佳皎的干燥器内，放在0℃-5℃冰箱中下燥5l~6d.移至安管小，抽真空30min，封管，置了液氮或·80℃超低温冰箱4田间抗性鉴定
间抗性鉴定在鉴定内进行。
4.1鉴定囤选址
定应设置在小麦叶锈病适发区，选择具备良好的白然发病环境和湾溉条件、地势平坦、十壤肥选的地块：
4.2鉴定感病对照品种和诱发行品种选择鉴定感病对照品种和诱发行品和均采用铬贤169。4.3鉴定圈田间配置及大田播种
4.3.1田间配置
采用元睡条播、等行距配置方式。唯埋宽5)cim，睦宽250cIm，硅长视地形、地势而定；距旺使125m处顺吐种1行诱发行，在诱发行两侧20cm横向利植鉴定材料，行长100cm，行距33cm，重复1次~3次，顺疗排列，编号，鉴庭删叫周设100cm宽的保护区。4
4.3.2播种
说法：
：矩形症表示哦速；
：实线表示诱发行和对照显种：：表示监定村料，
图1鉴定函田间配置示意图
4.3.2.1播种时间
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IIIII!
播神时间与人田牛产-致，或适当调整不同材料的播期以使植株接种期和发病期能够与适立的气候条件（湿度与温度）相，冬性材料按当地气候止带秋播，弱冬性材料晚伙播，存性材料顶凌套播4.3.2.2播种方式及播种量
采用人下开沟条播方式。每份材料播种1行，每隔20份鉴定材料播种1行感病刘照品种铬贤169鉴定材料每行均匀播种100粒；诱发行按每100cm行长均勾拼种100粒。4.4接种
4.4.1接种期
小麦叶锈病抗性整定接种期为小麦拔节期，选择晴朗无风关的傍晚进行。4.4.2接种方法
采夏跑产悬浮液喷雾法、喷（撒）粉法或活射法接种诱发行，利用诱发行发病后产生的夏拖子再传播侵染鉴定材料。根据馨定诺要选择单小种或混合小种。具体操作是将所选生理小利的夏孢了粉用效滴0.05%的Tween20水液调成糊状，按2乌孢子：1000mL水的比例稀释成夏孢子悬浮液：诱发行每隔500cm设100cm长的接种段，用手拆式喷雾器将夏孢子悬浮液均勾喷酒在接种段的小麦叶片上，之后速覆盖塑料薄膜，四周用上压严，次口清晨揭老薄膜。注射法：此法多用于麦苗有一定生长高度的拔节期。按种前，应配制好孢子悬浮波（配制方法同喷露法），般在诱发行上每隔100cm左右选取3个一5个单禁分注射接种。其方法是用注射器将孢子悬浮液从小表心叶与其下的展开叶叫鞘相接处以下约1cm处注射，针头立向下倾斜刺人，不要刺穿，推进少量悬浮液，以见到心叶处冒出水珠为度。抱子悬浮液必须随用随搅拌或振荡，口间接种注射最好在阴天的榜晚进行。如大气干早，接种后在接种点上浇水1次2次，也可以在接种前或接种后适当灌水：
再次接种时，间隔3d～5d，并选择诱发行不同的接种段接种。4.5接种前后田间管理
在接科前6d7d应先避行田间灌溉，或在雨后接种；接种后若持续于早，应及时进行用间浇灌不施用征何杀菌剂。
5病情调查
5.1调查时间
在小麦进人乳熟期进行调查。
5.2调查方法及项目
调套时每份材料随机拍样50片叶（主要为旗川），逐叶进行调查，记载严重度俊染型，算普率5
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平均严重度和病情指数，谢查2次，间隔10ds5.3发病程度记载及标准
5.3.1侵染型记载及标准
小麦成株期病斑侵染型按0.1.2.3.4六个类型划分，苗期病斑侵染型可按0、1、1.2.X.Y、2、3、4九个类型划分，其划分标准见表1,各类型可附如”+\或“-\号，以表示偏重或偏轻，用以表示小麦品种抗锈程度。根据各级侵染型的症状，遂叶调查记裁侵染型。表1小麦叶锈病侵染型级别及其症状描述侵染型
无症状
产生枯死亲点或失绿反虚，不产尘夏孢子症状述
夏孢子堆很小，激甲很少，常不破裂，周围有粘死反应豆孢子雄小到中等，周患有失绿反成不同大小的夏饱了堆随机分有
不尚大小的克跑子堆规则排列，大夏孢子堆排列在叶尖不同大小的夏施于堆规则排列.大夏孢子排排列在叶基夏孢子握中等大小,周围组织无桔死反应,但有轻微失缘现象爱孢了塔大而多，周围组织光无粘死或摄绿反应注：侵染型级别经常用妇下符号进行精组划分，即”“，夏孢子堆较正常侵染型夏报子略小；“+\：复孢了堆较正常俊梁型孢子略人；“C\：褪绿较正常饺染型密；\I\:坏死较正常侵染型多。在单个叶片工有儿种侵染型附可用\，“隔开主要侵梁型范录在前，如4，或者2一,2十或者1,3心。高流（HR）
中航（MR)
图2小麦叶锈病成株期侵染型分级图高感（HS】
5.3.2严重度记载及标准
图3小麦叶锈病苗期侵染型分级图NY/T 1443.2—2007
严重度用分级法表示，设1%5%、10%、20%，40%、60%，80%、100%八级，调查时份材料随机抽调查50片叶，记载严重度，计算平均严重度。Z(x . S)/2x
其巾,5为平均严重度，为病级数(1-n),X为病情为级的单元数，S,为病情为1级的\重度值（如小变叶锈病各级的百分数）。5.3.3普遍率记载及标准
每一鉴定材料随机调查50片叶，计数发病时片数，计算曾遍率。普遍率（%）=（发病叶片数/调查总叶片数)×100%6抗性评价
6.1鉴定有效性判别
当鉴定用中的感病或高感对照品种发病严重度达到60%以上时，该批次抗叶锈病鉴定视为有效。6.2垂复监定
初次鉴定中表现为免疫、高抗、中抗的材科，次午錦用相同的病原菌进行复鉴定。6.3抗性评价标准
依据鉴定材料发病程度（病情指数利侵染型）确定其对叶锈病的抗性水平，评价标推见表2。如果两年鉴定果不一致，以抗性射的发病程度为准。一个鉴定群体中出现明显的抗、感类型差异，应在调查表注明“抗性分离”，其比例以“/“随开。NY/T1443.2---2007
鉴定记载表格
病惰指数
表2小麦对叶锈病抗性评价标准
抗性评价
免费 Innune(1)
近免疫Nrarlyimnruue(VTM)
高抗 Highiy Reistrsnt(HR)
中抗 Moderately resistant(MR)慌诱 Slow rusting( SR)
中感 Modrrately susccptihlc(Ms)高感 Higlhly Suzcepribie(HS)小麦抗川锈病鉴定原始记录及结果记载表格见附录B8
A.1学名和形态描述
附录A
(资料性附录）
小麦叶锈病病原菌和生理小种
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小麦隐匿柄锈菌 Puecinia triticina(=P,recondilu Robcrge ex Desmaz.I.sp.tritici)异名:Pucciniatriticina Eriks..Pucrinza tritici curi Viermot-Bourgin属真蘭界（Fungi）、担子菌（亚）门（Basidiomycora）、锈菌纲（Urediniotryuectos）、柄锈菌科（Pucci-naceae)柄锈菌属（Puxinia），小麦叶锈病菌是转主寄主的长牛活史型锈菌，唐松草、小.乌头足叶锈病菌的转土寄主。夏孢子单胞，球形至近球形，黄褐色，表面具细刺，有散生发芽孔6个8个，大小18um~-29μm×17μm-22jm;冬孢子双胞，棒状，平，柄短暗褐色，大小39μm-57im×15μm~18m。冬独子萌发时产生4个扭孢子，侵染转主寄主，产生锈子器和性了器。性子器橙黄色，球形至扇球形，直径80um～145tm，埋生在寄主表皮下产生橙黄色椭圆形性孢子。锈了器生在对应的叫背病斑处，能产生链状球形锈孢了，大小16um-26um×16m~20umcA.2生理小种鉴定方法
A.2.1采用的鉴别寄主
生理小种鉴别寄士采用以Thacher为背景的分别含有Lr1、Lr2u、Lr2cLr3、Lr3元a、Lr9.Lr11、Lr16.Lr17、L24、Lr26,Lr30壮12个抗病基因的小麦材料。A.2.2叶锈菌生理小种密码命名系统参照比美小麦叶钙菌生理小种密码命名蔡统进行命名（表A，1)。表A.1叶锈菌生理小种密码命名系统在抗叶锈病近等基因系上的侵染型第1套鉴别奇主
第2套鉴别寄主
第3登览州寄主
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第1套能别宦主
第2套湖寄主
第3套路别寄主
表A.1（续）
在抗呼锈病近等菌因系上的设染型2n
注：叫锈当生埋小种名称由在第1套、第2套和第3龚鉴别寄主上侵染型的代码凯成。：“L\表示抗病侵染奥(0～Z)；“H求感慢类测（3-·4)
A.2.3生理小种命名
根据在繁别寄主上接种后的病斑类型确定抗性反应，以叶锈菌密码系统对生理小种进行命名（表A.2)
表A.2小麦叶锈病病原菌生理小种鉴别牛理
Lr2n7.r2c
抗性基因侵裂型
Lr17Lr30
毒力公式（有
效抗病基因/无
激就病基因)）
9,24/1,2a,2c,
3,16,26,3Ka
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