【国家标准(GB)】 蜂蜜中十四种喹诺酮类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

1范阁
蜂蜜中十四种喹诺酮类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法
GB/T 20757--2006
本标准规定丫峰发中十四种生诺类药物残留照液相色谱-串联质谱测定方法。本标雅适用于择蜜中十四种噬诺两类药物残留置的谢定本标准的方法检出限：十四种谨谱酮类药物均为2g/kg。2规范性引用文件
下列文作甲的条款道逃举标准的用而成为本标谁的条款。凡是法日期的「用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内睿器订版均不语思于衣标准，然顶戴勋根据李标准成协议的各方研究是否可使用这些文件的没新胶率。凡浏堂有法与结果
GB/T 6378. 1
(GB/T 6379.1—2004,ISO5725-1:19GB/T 6379,2测盘方法与结果
性与再现性的基本方法3/6379
GB/T6582分板实验家用水爆耀
3原理
蜂蜜中诺酮馨药物残留用
萃取柱净化，用氢氧化铵中醇溶液淡色谱-串联质谱仪定然标法定罩。A试剂和材料
除男有说明外，所用试剂均为优毅4.1甲醇；色谱纯。
4.2艺：色谱纯。
4.3磷酸。
4.4乙酸。
4.5氢氧化铵。
4.6磷酸氢二钠。
4.7磷酸二氢钾。
家正确度与精密
新版本适用于本标准。
第1部分：总则与定义
部分：确定标准测冠方法置复
200415057251
验方器
卡，残道用楚容波溶痛
2品拍
neq 1S0 3696:1987)
格，经QaRis真LB域相当的国相
2m滤膜后，样品漆液供液相
4.8磷酸缺缓冲溶液：0.05mo)/1称取5.68s磷酸氢二钠（4.6)和1.3G8磷酸二氢铆(4.7)，放人1000rnL烧杯中，加人800L水溶解，用磷酸（4.3)调至I=3.0,再用水定容至1000mL。4.9氢氧化铵甲醇液：(1+19）。吸取10mL氢氧化铵（4.5)与190ml.甲醇(4.1)混合。4.10定容液：乙腈+0.01mol/L乙酸溶液（1+4)。取1.00trL乙与400ml.0.0）mal/L乙酸溶液混合。
4.11依诺沙星、诺氟沙星、麻保沙星、窥罗沙丝、环丙沙星、氧氟沙星、单诺沙层、恩谱沙虽、奥比沙暴、沙拉沙星、司帕沙星、双氧沙星、腰喹酸、筑甲喹标准物质：纯度≥95%。GB/T 20757-2006
4.12噬诺酮标谁储备溶液：1动g/mL。准确称取适罩的每种噻说标催物质，用氢领化铵中醉溶液(4.9)配成1mg/mL的标准储备溶液，该溶液在4℃保存可使用6个月。4.13中间浓度壁诺酮混合标准借备：10mg/1。分别吸取0.1㎡L标推储备溶液（4.12)放入19nI.等服瓶中用定容液(4.10)定容至刻度4.14唑诺酮基质混合标雅工作溶液：吸取不同体积中间浓度混合标准储备游(4.13)，用空白样品取液配成5 ng/mL10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL 不同浓度的基质混合标锥工作溶液。当关鼠制。4. 15 Oasis HLB固相萃取柱或相当者:500 mg,6 ml。用前分别用 6 mL, 甲醇、10 mL 水和 5 mL 磁燮盐缓冲辫液(4.8)处理。保持杜体湿润。4. 16滋膜:0. 2 μm。
5仪器
液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离了源。5.2固相萃取装置。
氮气浓蟾仪。
5.4激体混匀器。
5.5分析天平：感量0.1mg.0.01g。其空：最大负压80kPa：
5.7PH计量带度0.02.
玻璃赠液器：50mL。
6试祥谢备与保存
6.1试样前制备
对光结晶的实验室禅品，将其缆排均勾。对有结的样品，在密销况下，置于不超过60℃的求欲中溢热.振落，待样品全部化后搅匀，冷却至室湿。分出0.5k为试样，制备好的试样置于样品瓶，懿封，并做上标记。
6.2试祥的保存
将试样于常温下保荐。
了测定步骤
7.！提职
称取5g试样，精确至0.01g。翌于150mL三角瓶小，加人30mL酸盐缓冲溶液（4.8）.于被你混勾器上快速混匀1min,使试伴宪全落解，7.2净化
将塞有玻璃棉的玻璃延液器连到（3asisHJ.8固相萃取柱（4.15）上，把栏液倒入玻璃液器（5.8）中，调节流速≤3nL/inin使样液通过QasisHILB固相苯取拉，待样液完全流出后，分别用5mL水和5ml.甲尊+水（3十7）洗杜杠，弃去全部流出液。相举取柱在65kp负压下，减压抽干80min，然后用5mL氢氧化铵甲醇落液（4.9）洗脱，收集洗脱液于10mL锥形试管中，在50℃用愈气浓缩仪吹于。准确圳人 1.0 mI.定容波溶解残道，过0.2μm滤膜后,供液相色谱-串联质谱仪测定。按7.1和7.2操作步骤，制备用于配制系列基质标推工作溶液的样品充自提取液。7.3色谐测定
7.3.1液相色谱条件
a）色谱柱：Inertsil ph-3,5μm:150 mm×2.1 mm(内径)或相当者：）柱溢：40℃；
进样量：40±E：
流动相：A：乙，B：0.01mal/LZ酸熔液。梯度洗脱条件见表1。梯度洗脱条件
时间/min·
质谱条件
流速/(inl/min)
离子源：电暖雾离子源：
扫描方式：正离手扫描；
检测方式：多反应监测：
电喷等电压：5500V；
募化气压力：0.083MPa
气带气压力：0.069 MPa:
助气流速：61/xin
离子源湿度：590℃：
去簇电压：45V
A:乙/(%)
GB/T20757—2006
B:0.心i.ael/i.艺酸游液代%）
定性离子对、定量离子对、碰擦气能照和碰撞池出口电压见表2。表2十四种魔谐酮的定性商子对、定凝离子对、碰搅气能盘和碰揽池出口电压药物名称免费标准bzxz.net
依浩沙器
说颜沙岳
滁保沙显
氨罗沙里
环医沙菜
氧狐沙呆
￥诺沙号
恩诺妙
英文名称
enoxarin
norFoxerin
marhofloxacin
leroxaciy
ciprofloxacin
afloxaein
danofioxacin
etroflexacin
症性离于对
$21/234
321/257
320/276
320/233
363/320
363/277
370/326
370/269
332/288
332/2415
362/318
362/26
358/314
355/283
350/316
360/245
定盘离子对
(tn/2）
321/334
3207276
383/320
870/326
332/288
362/318
858/314
360/316
性气能盘/
避拉池出可电压/
GB/T 20757---2006
药物名称
奥比沙乐
沙拉沙昱
司帕沙墓
双氣沙黑
英文名称
arbifloxaein
sarafloxacin
sparfloxncin
rlifloxacir
oxolinic acidl
7.3.3液相色谱-审联质谱测定
定性离子对
395/352
396/295
386/342
386/299
393/349
393/292
4067356
400/299
12527244
262/216
轰2(续）
定划离子对
(2n/元)
3957362
385/342
334349
403356
262/244
碰拉气能匠
猛池出电压?
用基质混合标准主作落波（4。14)分别避催以工作落液浓度（1）为横坐标，峰面积为纵垒标，绘制标准工作函线，市推工作形线对样品进行定量，伴品溶凝中上四种喷诺翻的闲应值均应在仪服测定的线性范闹内。样上述色谱条伴和南作四神唑诺酶的的标准物质多反质蓝测（MRM)色湾图图
馨物名称
依浩沙尾
城越是
凝侃沙罩
环丙沙
氧筑沙
单诺沙
恩诺沙型
沙拉沙望
司的沙莹
双鼠沙呆
氣甲唑
7.4苹行试验
四种嚒诺酮参考保留时
碧保留时间见装十凹神喹诺
得留时同/min
按以上步骤，对同一试择进行平行试验测定4
7.5空白试验
除不称取样品外，均按上述步骤进行。.8结果计算
结果按式(1)计算：
武中：
X--试样中摄测组分残留量，单位为微克每于克gg)；一从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL)；V—-试样溶液定容体积单位为童升rnan一试样溶液所代囊试样的质室，单位为克（g）。2
注：计算结果应扣除宝含值
9精密度
本标准的精密度数循是按照B
值以95%的可信度录计解，
9.1重复性
在重复性条性成，获得的诱次
量范国及惠复性方程见表4。
药物名称
液谱沙桌
谐氮沙泉
深保沙是
氣罗沙虽
环丙沙垦
筑筑沙显
单谱沙皇
恩诺沙垦
奥比沙星
沙拉莎里
司拍沙呆
双氟沙显
呕喹酸
GB/T 20757—2006
的规定确定的其复性和再现性的兰刻试结采的绝对差借不超重复性限实，蜂密中十四种谱诺隔合合赢造萄发造复性和再现性方程合置范用（）
2. 0 ~ 20. 0
2. 0~20.8
正真性限
Weioiddn
T082 41
lgr0. 937 .61g
22. 0 ~-20.
2. 0~ 20. 0
2. 0 ~-20, 0
2. 0 ~ 20. 0
注：“为两次侧定值的穿术平均值，创
T/0/82e 4igm -11041
Jgr 1, 081 2lgm-- 1. 374 2
Igr=c. 811 0lgm-1. 068,3
Igr=1. 003 21gn-3:336 6
gr0x914务—1.204,g
Igr-1. 084 41gnged:344 4
1gp8:708 71gm-1. 033 6
gr- 1. 099 8lgm—1. 439 8
Igr=0.941 11gm-1.166 8
清现性限R
IgR1. 1213g1-0. 617 8
I2%-0. 98 4lgm-0. 694 5
luR=1. G06 8lgm--c0. 562 1
1ER-1/085 41gm -0. 805 7
AgR--0. 790 9lgr-- 0. 586 3
IgR).31111gm-0.9888
IgR-c. 856 9tgm--0. 716 8
1gR-1.300 21g—0. 932 1
IgR=1. 290 2lgm-0.926 5
IgK=0. 767 5lgm1 -0, 589 -1
IglR0.8562igm-0.6052
IgR--0. 033 9lgm--0. 598 6
IgR-0.85701gm-0.613 9
igR-1. 073 3lgm--0. 77R 2
如果差值超过重复性限1。应含弃试验结桌并重新完成两次单个试验的测定。现性
在再现性条件下，获得的两淡独立测试结果的绝对差值不超过再现性限R，蜂蜜中十网种隆诺麗的含量范围及再现性方程见表4.
GB/T20757--2006
附录A
（资料性附业）
标淋物质多反应监测（MR限）色谱图十四种喹诺酮多反应监测（MRM)色谱图，见阁A.1。3. RE
依诺沙量
ffinin
须罗沙眠
沙拉沙皂
嘧酸政
2,0106
讲薇沙堡
环两沙里
谐沙呆
司莎星
t/maur
氛甲崎
B1012s/mir
1412 /mim
图A.1十四种隆诺酮多反应监测(MRM)色谱图4. 65
麻保沙足
681012
氧氨沙尔
契比沙尼
双氮沙厚
（资料性附录）
回收率
本方法中十四种喹诺配添加浓度及其平均回收率的试验数据，见表B.1.轰B.1十四种座诺酮添加浓度及其平均回收率的试验数据药物名称
依诺沙星
请敏沙星
陈保沙品
無容沙量
环闪沙冕
单诺墨
恩诺沙星
添加浓度//kg）
GB/T 20757--200a
乎询回收童（光）
GB/T 20757---2006
药物名称
奥比沙是
沙拉沙墨
双熟沙湿
GB/T 20757-2006
兼B.1(续）
加浓废/g/kg)）
乎与回收率（%)
版权专有假权必究
书号：155066：1-28945
定价：
14. 00元
252U6 1
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