【国家标准(GB)】 动物源食品中阿维菌素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法

ICS67.120
中华人民共和国国家标准
GB/T21320--2007
动物源食品中阿维菌素类药物残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
Determination of avermectins residues in foodstuffs of animal origin-LC-MS/MS
声明：本资料仅供学习和交流，严禁用于商业用途！目录下载：http：//biaozhun.ys168.com2007-10-29发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2008-04-01实施
1范围
动物源食品中阿维菌素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法
GB/T21320—2007
本标准规定了动物源食品中阿维菌素类药物残留试的液相色谱-串联质谱检测法。本标准适用于牛肝脏和牛肌肉中埃普利诺菌紫、阿维菌素、多拉菌素和伊维菌素残留量的测定。本标准的方法检测限：埃普利诺菌素、阿维菌索、多拉菌案和伊维菌素均为1.5g/kg2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括动误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标达成协设的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（CB/T6682—1992neISO36961987）3原理
用乙脑提取试样中的4种阿维菌素类药物，经C周相萃取柱和C固相苯取柱净化后，用液相色诺-中联质谱法测定，外标法定量。4试剂和材料
除有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/个6682规定的-级水。4.1乙膀：色谱纯。
4.2三乙胺。
声明：懿舒继学习和交流，严禁用于商业用途！目录下载：http：//biaozhun.ys168.com4.4埃菁利诺菌素标准品：纯度≥98%。4.5阿维菌素标准品：纯度≥98%。4.6多拉菌素标准品：纯度≥94.3%。4.7伊维菌素标准品：纯度≥98%。4.8C固相萃取柱：500mg.3ml
4.9C同相萃取柱：500mg.10mL。4.10样品稀释液：水十三乙胺（30+0.045，体积比）。4.11Cs周相苯取柱洗液：乙十水十三乙胺（40十60+0.1，体积比）。4.12C固相苯取柱洗涤液：乙+水十三乙胺（30十70十0,1，体积比）。4.13埃酱利诺菌素、阿维菌素、多拉菌素和伊维菌素标准储备液：100μB/ml。分别准确称取0.010g埃普利诺菌素，阿维菌素、多拉菌索和伊维菌素标准品（4.4~1.7)于四个100mL容量瓶，用乙腈溶解稀释至刻度。--20℃保存六个月。4.14混合标准储备液：1赠/mL。取四种标准储备液（4.13）各1,0mL于100mL容瓶中，用乙肪稀释至刻度，4℃保存兰个月。
4.15标准工作液：分别量取适量上述混合标准储备液（4.14）.用乙肺稀释成浓度为1、5、10、20.50、100和200ng/mL的系列标准工作液。1
GB/T21320—2007
5仅器
5.1液相色诺-中联四级杆质谱仪：配有电喷雾电离源（electraysprayionozition，Esi)。5.2商心机。
5.3振药器。
5.4涡动仪。
5.5氮吹仪。
5.6组织匀浆机。
6试样制备与保存
取新鲜或解冻的动物组织，剪碎，10000z/min匀浆1min。一20℃下保存。7分析步骗
7.1提取
称取试样2.5g（精确到0.01g），于50mL离心管中，加8mL乙腩，涡动0.5min，2000r/min离心2min，敢清液，残清用8mL之脂童复提取一次，合并两次上清报，加30mL样品稀释（4.10），涡动混合均匀，为样品提取液，备用。7.2净化
取C固相萃取柱、依次用5mL乙肺、5mL.C固相苯取柱洗涤液（4,11)活化。将备用的样品提取液（7.1）过柱，用20mLCl8固相萃取柱洗落液（4.11游洗，抽子再用3mL正已烧淋洗，抽干。2tmL乙腊洗脱，收集。加人4mL样品稀释液（4.10)，混合均匀，备用。取C固栅萃取柱，依次用5ml.乙睛和C周相萃取柱洗涤液（4.12)平衡，取备用液过柱。用10mLC固相苯取柱洗涤液（4.12）淋洗，挤干，再用8mL正已烷淋洗，挤干；用2mL乙睛洗脱，收集洗脱液。于50℃下氮气吹干，加0.5mL乙溶解。过0.2μm滤膜，进样分析。注：1样济液、淋洗液和洗脱液的流速均控制不超过1mL/min。7.3基质添加标准工作液的制备
声明最季释利化楚用脱毅最：o.箱浓度的标耀生作锻m（4.15），氮吹、定容后作为基质添加标准工作液，供液相色谱-书联质谱仪测定。7.4测定
7.4.1液相色谱条件
色谱柱：Cs，150mm×2.1mm，粒径3μm，或相当者。流动相：乙精十水+甲酸（95十5+0.1，体积比）。流速：0.2mL/min.
柱温：案温。
进样盘：10μL。
7.4.2质谱参考条件
离子化方式：电喷雾离子源，正离子扫描（ESI十）。毛纳管电压：3.2kV。
离子源温度：120℃，
等化气：300℃。
倍增器电压：650V。
碰擦气：氩气。
其他参数见表1，
埃营利诺茵囊
阿维菌紫
多拉荫索
伊维菌素
a定册离子.
母离子
7.4.3液相色谱-串联质谱测定
表1质谱参数设置
子离子Www.bzxZ.net
驻留时间/
碰撞能盘/
GB/T21320—2007
维孔电压/
根据样品落液中药物的残留量，选择峰面积相近的标准工作液作为随行标样。对标准工作液和样虽溶液等体秘参插进样进行测定，4种药物的离子色谐图见附录人。7.4.3.1定性测定
通过液相色谱保留时间与中联质谱选择离子共同定性。待测样品的保留时间与外标标准样品保留时间的相对偏差不大于2.5%，且与外标标准品相比，样品中待测组分两个定性子离子的相对丰度比不大于10%。
7.4.3.2定量测定
声明分凝盘钱科滋浓酵质新棕凝诠作最单热校雅以包增峰备积积芬是量om标准工作液及试样液中阿维菌索类药物的响应值均应在仪器检测的线性范围之内，试样液进样测定过程中应参插标准工作液，以便准确定量。标准溶液离子色谱图见附录A。8结果计算与表达
按式（1)计算试样中阿维菌素类药物的残留垦。A. XVXc.
试样中药物的残留，单位为微克每千克（uR/kg）；A试样特征离子峰面积；
V试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL)：c，——基质标准溶液浓度，单位为微克每升（g/L)；A，—基质标准溶液特征离子峰面积：一试样质量，单位为克（g)。
注：计算结果需扣除空白值，双定结果用平行测定的算术平均值表示，保畜至小数点后2位。（1）
GB/T21320—2007
精密度
本方法的批内变异系数≤20%，批间变异系数≤30%。声明：本资料仅供学习和交流，严禁用于商业用途！目录下载：http：//biaozhun.ys168.com100250
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附录A
(资料性附录)
标准溶液色谱图
936.6>490
936.6>352
5.53 5. 93
921.5>449
921.5>353.2
895.6>449.3
GB/T21320—2007
17.5>753.3
897.5>329.1
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声明：牵料仅供学习和交流，严禁用于商业用逐录载：http://biaozhun.ys168.com0
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埃普利诺南素m/2490选择离子色谱图：埃普利诺菌素m/z352选择离子色谐图：多拉菌索m/z449选择离子色讲围：多拉菌索m/z353.2选择离了色谱图；伊维菌素m/z753.3选择离子色谱图；伊维激素m/z329.1选择离子色图；阿维菌素rn/z449.3选择离子色讲图；阿维菌素m/z327.4选择离了色讲图：四种药物的总离子流色谐图。
阿维菌素类标准溶液的离子色谱图8.00
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