【国家标准(GB)】 SPF鸡 胚敏感试验

GB/T 17999. 6... 1999
禽脑脊髓炎病毒（AEV)感染常用的监测方法有琼脂扩散试验(AGP)和胚敏感试验(ES)，二者均可对AEV感染做出确诊。ES已在我国SPF鸡场的AE监测中得到应用和验证，本标准在此基础上，规定了SPF鸡胚敏感试验。
SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准，包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检测方法。本标准为《SPF 鸡胚敏感试验》。SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分：GB/T 17999. 1-- 1999
GB/T 17999. 2.
GB/T 17999. 3-
GB/T 17999.4-1999
GB/T 17999. 5--- 1999
GB/T 17999. 7 -1999
GB/T 17999.8-
3---1999
红细胞凝集抑制试验；
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
SPF鸡
SPF 鸡
血清中和试验；
血清平板凝集试验；
琼脂扩散试验；
酶联免疫吸附试验；
鸡白痢沙门氏菌检验；bzxZ.net
试管凝集试验；
间接免疫荧光试验。
GB/T 17999.9 -1999
SPF 鸡
本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出。本标准由农业部畜牧兽医司归口。本标准起草单位：农业部实验动物研究中心、山东省农科院家禽研究所。本标准主要起草人：赵立红、陈德威、张秀美、张冰、李军。83
1范围
中华人民共和国国家标准
胚敏感试验
SPF鸡
SPF chickenEmbryo susceptibility test本标准规定了胚敏感试验所用试剂、材料，操作程序及结果判定等。本标准适用于 SPF鸡感染禽脑脊髓炎病毒后的抗体监测。2原理
GB/T17999.6--1999
Van Roekel 毒株是禽脑脊髓炎病毒的-株胚适应毒株，具有高度嗜神经性。对非免疫鸡群的鸡胚有致病性，引起肌肉营养不良、运动性降低、足趾卷曲等特征性病变。免疫鸡群的鸡胚对经卵黄囊接种的病毒有抵抗力。
3试剂和器材
3.1试剂
3.1.1AE-VanRoekel病毒(0.2mL含100EIDso)。3.1.2 SPF 蛋。
3.1.3被检蛋。
3.2器材
3.2.11mL注射器。
3.2.27\针头。
3.2.3恒温培养箱。
3.2.4超净工作台。
3.2.5小型孵化器。
4操作程序
4.1取被检蛋及SPF蛋孵至6日龄。4.2取6龄被检鸡胚，每胚经卵黄囊接种0.2mL含100EIDso的AE-VanRoekel病毒液，接种完毕用蜡封孔，同时取6日龄SPF鸡胚接种与不接种病毒作为对照。4.3接种后的鸡胚，置37℃～37.5℃孵化器中孵化，每天照蛋一次，取出死亡鸡胚，接种后第12d取出全部鸡胚待检。
4.4观察病变：非免疫鸡的鸡胚感染VanRoekel后出现特征性病变，早期为胸腹部肌肉、皮下水肿，当接种后10d～12d解剖活胚时，见腿肌萎缩、足趾卷曲，注意与接种、不接种SPF对照鸡胚对比观察。5结果判定
5.1当接种SPF对照鸡胚均呈禽脑脊髓炎病毒所致的特异病变,不接种SPF对照鸡胚无特异病变时，国家质量技术监督局1999-11-10批准84
2000-04-01实施
试验结果可靠。
2判定
GB/T17999.6--1999
阴性：100%鸡胚有特征性病变，表明此鸡群无禽脑脊髓炎病毒抗体，属非感染鸡群阳性：50%以下的鸡胚有特征性病变，表明此鸡群有禽脑脊髓炎病毒抗体，属感染鸡群。8.5