【国家标准(GB)】 饲料中霉菌检验方法

中华人民共和国国家标准
饲料中霉菌检验方法
Method fordetermination of
Molds in feeds
1主题内容与适用范围
本标准规定了饲料中霉菌的检验方法。本标准适用于饲料中霉菌的检验。2原理
GB13092--91
根据霖菌生理特性，选择适宜于霉菌生长而不适宜于细菌生长的培养基，采用平皿计数方法，测定霉菌数。
3设备及材料
3.1天平：感量1g，最大秤量1000g。3.2显微镜：1500×。
3.3温箱：25～28±1℃。
3.4冰箱：普通冰箱。
3.5高压灭菌器：2.5kg。
3.6千燥箱：50~250±1℃。
3.7水浴锅：45～77±1℃。
3.8振荡器：往复式。
微型混合器：2900r/min。
电炉。
酒精灯。
接种棒：镍铬丝。
温度计：100±1℃。
载玻片。bZxz.net
盖玻片。
乳钵。
试管架。
玻璃三角瓶：250，500ml。
试管：15×150mm。
平Ⅲ：直径9cm。
吸管:1,10 mL。
玻珠：直径5mm。
国家技术监督局1991-07-16批准170
1992-04-01实施
3.23广瓶：100,500mL。
3.24金属勺、刀等。
3.25橡皮乳头。
4培养基和稀释液
4.1高盐察氏培养基。
4.2稀释液。
4.3试验室常用消毒药品。
5检验程序
霉菌检验程序如下：
6操作步骤
6.1采样
块状饲料
GB 13092--91
谷物饲料
加无菌聘释液10倍转释振荡30 min做成几个适当倍数的稀释液
选择3个适当稀释度，各以1mL加入灭菌平血内每胆加入适量高盐察氏培养基
25 ~ 28 ± 1 C培养 1周
菌落计数
粉状饲料
采样时必须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具，如灭菌牛皮纸袋或广口瓶，金属勺和刀，在卫生学调查基础上，采取有代表性的样品，样品采集后应尽快检验，17
否则应将样品放在低温干燥处。GB13092—91
根据饲料仓库、饲料垛的大小和类型，分层定点采样，一般可分三层五点或分层随机采样，不同点的样品，充分混合后，取500g左右送检，小量存贮的饲料可使用金属小勺采取上、中、下各部位的样品混合。
海运进口饲料采样：每船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品，每层从五点取样混合，如船仓盛饲料超过10000t，则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。6.2以无菌操作称取样品25g（或25mL），放入含有225mL灭菌稀释液的玻塞三角瓶中，置振荡器上，振摇30min，即为1：10的稀释液。6.3用灭菌吸管吸取1：10稀释液10mL，注入带玻璃珠的试管中，置微型混合器上混合3min，或注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次，使霉菌孢子分散开。6.4取1mL1:10稀释液，注入含有9mL灭菌稀释液试管中，另换一支吸管吹吸5次，此液为1:100稀释液。
6.5按上述操作顺序作10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸管，根据对样品污染情况的估计，选择三个合适稀释度，分别在作10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平中，每个稀释度作两个平血，然后将凉至45℃左右的高盐察氏培养基注入平Ⅲ中，充分混合，待琼脂凝固后，倒置于25～28土1℃温箱中，培养3d后开始观察，应培养观察一周。6.6计算方法
通常选择菌落数在30～100个之间的平皿进行计数，同稀释度的2个平血的菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克(或每亳升)检样中所含菌数。6.7报告
每克(或每毫升)饲料中含霉菌数以个/g(个/mL)表示。172
GB13092—91
附录A
培养基和稀释液制备
（补充件）
除特殊规定外，本标准所用化学试剂为分析纯或化学纯；生物制剂为细菌培养用；水为蒸馏水。高盐察氏培养基
A1.1成分
硝酸钠（GB636）
磷酸二氢钾（GB1274）
硫酸镁(MgSO7H,O,GB 671)
氯化钾（GB646）
硫酸亚铁（GB664）
氯化钠（GB1266）
蔗糖（HG3—1001)
蒸馏水
A1.2制法
加热溶解，分装后，115℃高压灭菌30min。必要时，可酌量增加琼脂。2稀释液
A2.1成分
氯化钠（GB1266)
蒸馏水
A2.2制法
加热溶解，分装后，121℃高压灭菌30min。附加说明：
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。本标准由中国鲁药监察所负责起草。本标准主要起草人李公喆、杨玮云。2g
1000mL
1000mL
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