【医药标准】 食品添加剂 葡萄糖酸亚铁

4 检验方法

本标准所用的试剂未经特殊注明，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或相当纯度的水，溶液为水溶液，仪器设备为一般实验室设备。

4.1 鉴别

4.1.1 试剂和溶液

4.1.1.1 乙酸(冰醋酸)(GB 676)。

4.1.1.2 苯肼

4.1.1.3 10%铁氰化钾溶液：取铁氰化钾(GB 644)10g，加水溶解并稀释至100mL，本液临时新配。

4.1.2 鉴别方法

4.1.2.1 取样品的水溶液(1→10)5 mL，加乙酸6.5 mL和新蒸馏苯肼1 mL，在水浴上加热30 min，冷却后，用玻璃棒摩擦试管内壁，则析出结晶。

4.1.2.2 取样品的水溶液(1→20)5 mL，滴加10%铁氰化钾溶液生成蓝黑色沉淀。

4.2 葡萄糖酸亚铁含量测定

4.2.1 试剂和溶液

4.2.1.1 锌粉

4.2.1.2 稀硫酸溶液：取硫酸(GB 625)5.6 mL，缓慢加入适量水中，并不断搅拌，然后加水稀释至100mL。

4.2.1.3 硫酸钾(0.1 mol/L)标准溶液：采用GB 601中规定方法配制与标定。

4.2.1.4 邻非啰啉指示液，取硫酸亚铁(GB 664)0.5 g，加水100 mL使溶解，加硫酸(GB 625)2滴与1,10-菲啰啉(GB 1293)0.5 g，摇匀。

4.2.2 测定方法

称取样品约1.5g(精确至0.0002g)，溶解于水75 mL和稀硫酸溶液15mL的混合液中，加锌粉250 mg，以小烧杯盖住锥形瓶，置室温放置20min。用表面铺有薄薄一层锌粉的垂熔玻璃漏斗过滤，以稀硫酸溶液10mL和水10mL分别洗涤垂熔玻璃漏斗，合并滤液和洗涤液，以邻非啰啉为指示剂，迅速以硫酸钾(0.1 mol/L)标准溶液滴至终点，同时做空白实验以消除误差。

4.2.3 分析结果的表述

$X_1(\%) = \frac{c_1 \cdot (V_1 - V_2) \times 0.04462 \times 10}{m_1 \cdot (1 - X_2)} \times 100$ ………………（1）

式中： $X_1$ ——葡萄糖酸亚铁(以 $\text{C}_{12}\text{H}_{22}\text{FeO}_{14}$计)含量；
$c_1$——硫酸钾标准溶液浓度，$\text{mol/L}$；
$V_1$——样品硫酸钾标准溶液用量，mL；
$V_2$——空白硫酸钾标准溶液用量，mL；
$m_1$——样品质量，g；
$X_2$——样品干燥失重，%；

0.04462——与1.00 mL硫酸钾标准溶液[$c(\text{CeSO}_4)=0.1 \text{ mol/L}$]相当的$\text{C}_{12}\text{H}_{22}\text{FeO}_{14}$的质量，g。

4.3 干燥失重

4.3.1 测定方法
称取样品细粉约1 g(精确至0.0002g)，置于已经在105°C干燥至恒重的称量瓶中，精密称定，再置于105°C电烘箱内干燥4h，置干燥器中冷至室温，称重。

4.3.2 分析结果的表述

$X_2(\%) = \frac{m_2 - m_3}{m_1} \times 100$ ………………（2）

式中：X₂——葡萄糖酸亚铁的干燥失重；

m₂——干燥前样品和称量瓶的总质量，g；

m₃——干燥后样品和称量瓶的总质量，g；

m₄——称量瓶质量，g。

4.4 三价铁盐的测定

4.4.1 试剂和溶液

• 4.4.1.1 碘化钾(GB 1272)。
• 4.4.1.2 盐酸(GB 622)。
• 4.4.1.3 硫代硫酸钠(0.1 mol/L)标准溶液：采用 GB 601 中规定方法配制与标定。
• 4.4.1.4 淀粉指示液：取可溶性淀粉 0.5 g，加水 5 mL 搅匀后，缓缓倾入沸水 100 mL 中，随加随搅拌，继续煮沸 2 min，放冷，倾取上清液即得。

4.4.2 测定方法

称取样品 5 g(精确至 0.000 2 g)，置于碘量瓶中，加水 100 mL 和盐酸 10 mL 供溶解，加入碘化钾 3 g，振摇溶解，置暗处 5 min，迅速以硫代硫酸钠(0.1 mol/L)标准溶液滴定，近终点加入淀粉指示液 0.5 mL，滴至溶液蓝色消失，即得。

4.4.3 分析结果的表述

X₃(%) = \frac{c_2 \cdot V_2 \times 0.005\,585 \times 10}{m_5} \times 100 \quad\dots\dots\dots\dots\dots\dots\dots (3)

式中：X₃——葡萄糖酸亚铁样品中三价铁盐含量；

c₂——硫代硫酸钠标准溶液浓度，mol/L；

V₂——硫代硫酸钠标准溶液用量，mL；

m₅——样品质量，g；

0.005 585——与 1.00 mL 硫代硫酸钠标准溶液[c(Na₂S₂O₃)=0.1 mol/L]相当的 Fe³⁺质量，g。

4.5 草酸盐的检查

4.5.1 试剂和溶液

• 4.5.1.1 盐酸(GB 622)。
• 4.5.1.2 乙醚(HG 3-1002)。
• 4.5.1.3 36%乙酸(HG 3-1095)。
• 4.5.1.4 5%乙酸钙溶液：取乙酸钙 5 g，加水溶解并稀释至 100 mL。

4.5.2 检查方法

溶解样品 1.0 g 于水 10 mL 中，加盐酸 2 mL，移入 125 mL 分液漏斗中，分别用乙醚 50 mL、20 mL，提取二次，合并醚层，并加入水 10 mL，在水浴上蒸去乙醚，加 36%乙酸 1 滴和 5%乙酸钙溶液 1 mL。5 min内不得产生浑浊。

4.6 还原糖的检查

4.6.1 试剂和溶液

• 4.6.1.1 3 mol/L 盐酸溶液：取盐酸(GB 622)24 mL，加水稀释至 100 mL。
• 4.6.1.2 6 mol/L 氨溶液：取氨水(GB 631)40 mL，加水稀释至 100 mL。
• 4.6.1.3 10.5%碳酸钠溶液：取碳酸钠(GB 639)10.5 g，加水溶解并稀释至 100 mL。
• 4.6.1.4 斐林溶液：采用 GB 603 中规定方法配制。
• 4.6.1.5 乙酸铅试纸：取无灰定量滤纸，以 5%乙酸铅(HG 3-974)溶液浸湿，在阴凉处干燥，保存于密闭容器中备用。
• 4.6.1.6 硫化氢气体：取少量硫铁矿细粉，加稀盐酸适量，将产生硫化氢气体导出。

4.6.2 检查方法

溶解样品 500 mg 于水 10 mL 中，温热，加入 6 mol/L 氨溶液 1 mL 使溶液呈碱性，通入硫化氢气体沉淀铁离子，静置 30 min，过滤，以水 10 mL 分二次洗涤，合并滤液洗涤液，用盐酸酸化，再加入 3 mol/L 盐酸溶液 2 mL，煮沸，直至蒸气不使润湿的乙酸铅试纸变黑，继续煮沸使溶液体积约为 10 mL，冷却，加入 10.5% 碳酸钠溶液 5 mL 和水 20 mL，过滤，滤液加水稀释至 100 mL。吸取溶液 5 mL，加入斐林溶液 2 mL，煮沸 1 min 不得产生红色沉淀。

4.7 汞的测定

4.7.1 试剂和溶液

4.7.1.1 1% 硝酸溶液：取硝酸 (GB 626) 1 mL，加水稀释至 100 mL。

4.7.1.2 25% 柠檬酸三钠溶液：取柠檬酸三钠 (HG 3-1298) 25 g，加水溶解并稀释至 100 mL。

4.7.1.3 20% 盐酸羟胺溶液：取盐酸羟胺 (GB 6685) 20 g，加水溶解并稀释至 100 mL。

4.7.1.4 氢氧化钠-乙二胺四乙酸二钠溶液：8% 氢氧化钠 (GB 629) ($W/V$): 5% 乙二胺四乙酸二钠 (GB 1401) ($W/V$) = 19:1。

4.7.1.5 双硫腙使用液：采用 GB 8449 中规定方法配制。

4.7.1.6 汞标准溶液：精密称取经干燥器干燥过的二氯化汞 0.135 4 g，加 0.5 mol/L 硫酸溶液使其溶解后，移入 100 mL 容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 1 mg 汞。

4.7.1.7 汞标准使用溶液：吸取 1.0 mL 汞标准溶液，置于 100 mL 容量瓶中，加 0.5 mol/L 硫酸溶液稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 10 $\mu$g 汞。再吸取此液 5.0 mL 于 50 mL 容量瓶中，加 0.5 mol/L 硫酸溶液稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 1 $\mu$g 汞。

4.7.2 样品溶液

称取样品 2.5 g 加 1% 硝酸溶液溶解并稀释至 50.0 mL。

4.7.3 测定方法

精密吸取 4.7.2 样品溶液 20.0 mL (相当于样品 1.0 g)，置 125 mL 分液漏斗中，加 1% 硝酸溶液 30 mL。

精密吸取汞标准使用液 0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0 mL (相当于汞 0, 1, 2, 3, 4, 5 $\mu$g)，置于 125 mL 分液漏斗中，加 1% 硝酸溶液至 30 mL。

于样品溶液、汞标准溶液和试剂空白液中各加 25% 柠檬酸钠溶液 20 mL，20% 盐酸羟胺 1 mL，摇匀，加入双硫腙使用液 10.0 mL，剧烈振摇 1 min，静止分层，弃去水层；三氯甲烷层用氢氧化钠-乙二胺四乙酸二钠溶液洗涤 3 次，每次 20 mL，将三氯甲烷层经脱脂棉滤入 1 cm 比色杯中，以零管调节零点，在波长 490 nm 处测定吸光度，绘制标准曲线比较。

4.7.4 分析结果的表述

$X_4(\%) = \frac{A_1 \times 10^6}{m_0 \cdot \frac{V_4}{V_5}} \times 100$

4.8 铅的测定

4.8.1 测定方法

精密吸取 4.7.2 样品溶液 10.0 mL (相当于样品 0.5 g)，采用 GB 8449 中定量法测定。