【商检行业标准(SN)】 水貂阿留申病对流免疫电泳操作规程

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1314—2003

水貂阿留申病对流免疫电泳操作规程

Protocol of counter immunoelectrophoresis for mink aleutian disease

前 言

本标准电泳操作方法参考农业部《动物检疫操作规程》(1988年版)的检疫方法，并制定了样品加样前处理方法。

本标准的附录A为规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：赖平安、张鹤晓、刘艳华。

本标准系首次发布的检验检疫行业标准。

水貂阿留申病对流免疫电泳操作规程

1 范围

本标准规定了水貂阿留申病对流免疫电泳试验操作规程。

本标准适用于用对流免疫电泳方法检测进、出境水貂阿留申病抗体。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 材料准备

3.1 仪器与器材

3 mm厚100 mm×45 mm玻璃板；电压0 V～300 V，电流0 mA～50 mA的电泳仪；宽100 mm的电泳槽；直径3 mm的打孔器；100 μL微量可调移液器及配套吸头；塑料毛细采血管。

3.2 pH8.5～8.6 的三羟甲基氨基甲烷（Tris）-巴比妥钠缓冲液

各成分加入适量二级水（符合GB/T 6682）中溶解后，用盐酸将pH值调至8.5～8.6，最后用二级水（符合GB/T 6682）定容至1 000 mL。

3.3 琼脂糖

国产或进口电泳用分析纯琼脂糖。

3.4 抗原

由阿留申病毒国际标准毒株Utah-1的猫肾传代细胞培养物制备而成。由指定单位提供。

3.5 血清

3.5.1 阳性血清：由指定单位提供。

3.5.2 阴性血清：由指定单位提供。

3.5.3 被检血清：用塑料毛细管在貂趾尖采血，将管两端烧融封口，放20℃～30℃环境静置1 h，再放4℃冰箱18 h～20 h，析出血清后加入0.5 mL或1.5 mL离心管中，3 000 r/min离心5 min，取上清液备用。

4 操作规程

4.1 铺板

取3 mm厚100 mm×45 mm水平无划痕的玻璃板，将油污洗净后，平放于水平桌面上，用10 mL吸管吸取已溶化并冷却到70℃左右的0.8%琼脂糖缓冲液，均匀地铺于玻璃板上，厚度为3 mm，在铺板时在玻璃板四周夹上挡板。待冷却凝固后备用，限当日用完。