【商检行业标准(SN)】 食品中过敏原成分检测方法　第1部分:酶联免疫法检测花生成分

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1961.1—2007

食品中过敏原成分检测方法
第 1 部分：酶联免疫法检测花生成分

Detection of allergen components in food—
Part 1: Protocol of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
for detecting peanut component

2007-08-06 发布 2008-03-01 实施

前 言

SN/T 1961《食品中过敏原成分检测方法》分为两个部分：

• ——第 1 部分：酶联免疫法检测花生成分；
• ——第 2 部分：实时荧光 PCR 法检测花生成分。

本部分为 SN/T 1961 的第 1 部分。

本部分检测方法参照国际公职分析化学家协会（AOAC）和美国食品药品监督管理局（FDA）推荐使用的 Neogen 公司生产 Veratox®过敏原花生生成成分定量检测试剂盒的相关检测方法，经试验评估验证后编写提出。

本部分附录 A 为资料性附录。

本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本部分起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。

本部分主要起草人：罗茂凰、张霞、张海英、郑文杰、张海滨、高旗利、黎径。

本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

食品中过敏原成分检测方法
第 1 部分：酶联免疫法检测花生成分

1 范围

SN/T 1961的本部分规定了食品中过敏原花生成分的酶联免疫检测方法。

本部分适用于定量检测糕点、糖果、冰淇淋等食品中的过敏原花生成分，其他食品可参照使用。

2 检测方法

2.1 方法提要

本方法的检测原理是夹心式酶联免疫吸附方法。将样品中提取出的花生蛋白质与抗体结合，加入酶标记的检测抗体，与已结合的花生蛋白质结合，结合的检测抗体与底物反应显现颜色，在酶标仪上读取吸光度，用标准对照物的吸光度作标准曲线，通过标准曲线计算出样品中过敏原花生成分的含量。

2.2 仪器设备及器具

2.2.1 天平：量程 2 kg，感量 0.1 g。

2.2.2 均质器。

2.2.3 水浴、加热板或能保持 60℃±1℃的相当热源。

2.2.4 振荡器。

2.2.5 离心机。

2.2.6 50 μL~200 μL 可调移液器。

2.2.7 酶标仪：波长 650 nm。

2.2.8 研钵及粉碎装置。

2.2.9 试剂瓶，容量 1 L。

2.2.10 过敏原花生成分定量检测试剂盒，其组成参见附录 A。

2.2.11 洗板机。

2.3 试样制备

取试样 25 g，用洁净研钵或合适的粉碎装置将样品粉碎至粉末状。

2.4 试样提取¹⁾

2.4.1 提取液的预处理：取 1 L 10 mmol/L 磷酸盐缓冲提取液，加盖，摇动混匀，置于水浴中，使提取液预热到 60℃。

2.4.2 取 5 g 试样（液体试样取 5 mL）加到样品提取杯中，每个样品同时做两份平行样。

2.4.3 每个样品提取杯中加入 1.0 g 花生提取添加剂、125 mL 预热到 60℃的提取液，盖紧杯口。

2.4.4 在 60℃水浴中以 150 r/min摇动提取杯 15 min，之后静置 5 min使部分样品沉淀。

2.4.5 取 5 mL 提取液于 14 000 r/min离心 5 min（或低速 2 500 r/min离心 20 min），取上清液放至室温即可用于测试。

2.5 测试方法²⁾

2.5.1 测试前应将所有的试剂恢复至室温（18℃~30℃）。

1) 给出该信息是为了方便标准使用者，并不表示对产品操作步骤的认可，如其他产品操作步骤有不同，应经试验评估验证后采用。

2) 给出该信息是为了方便标准使用者，并不表示对产品操作步骤的认可，如其他产品操作步骤有不同，应经试验评估验证后采用。