【商检行业标准(SN)】 牛传染性胸膜肺炎补体结合试验方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

牛传染性胸膜肺炎补体结合试验方法

Method of complement fixation test for
contagious bovine pleuropneumonia

前言

本标准的附录A、附录B是规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国四川出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：李玉冰、严玉宝、曹宗君、胡娟、马勇。

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

牛传染性胸膜肺炎补体结合试验方法

1 范围

本标准规定了牛传染性胸膜肺炎补体结合试验方法。

本标准适用于牛传染性胸膜肺炎的血清学诊断。

2 试剂和材料

2.1 材料

• 2.1.1 玻璃试管。
• 2.1.2 96孔血凝板。
• 2.1.3 可调式加样器。
• 2.1.4 试管架。
• 2.1.5 普通离心机，96孔板离心机。
• 2.1.6 水浴锅。
• 2.1.7 普通冰箱、普通冰柜。
• 2.1.8 微量振荡仪。

2.2 试剂

• 2.2.1 稀释液：灭菌巴比妥缓冲液（简称VB液）见附录A。
• 2.2.2 牛传染性胸膜肺炎补体结合试验抗原：由世界动物卫生组织（简称OIE）牛传染性胸膜肺炎参考实验室提供，使用时按说明书使用。
• 2.2.3 牛传染性胸膜肺炎补体结合试验标准阴性血清、标准阳性血清：由OIE牛传染性胸膜肺炎参考实验室提供。使用前做1:10倍稀释，56℃水浴灭活30min。
• 2.2.4 溶血素。
• 2.2.5 补体。
• 2.2.6 6%绵羊红细胞悬液：见附录H。
• 2.2.7 被检血清：按常规方法采集、分离、运输和保存。使用前做1:10倍稀释，56℃水浴灭活30min。

3 预备试验

3.1 溶血素效价的测定

3.1.1 1:20补体的配制
0.5mL补体加入9.5mL VB液稀释成1:20补体置冰浴中，待用。

3.1.2 1:100的溶血素的配制
取溶血素原液0.1mL加入VB液8.9mL混匀制成1:100倍稀释的溶血素。

3.1.3 不同稀释度的溶血素溶液的配制
用1:100的溶血素，按表1用VB液稀释溶血素并混匀。