【其他行业标准】 大豆食品中异黄酮含量的测定

ICS 67.060 X 04 QB 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 5397—2019 大豆食品中异黄酮含量的测定 Determination of soybean isoflavones in soyfoods 2019-08-02 发布 中华人民共和国工业和信息化部发布 2020-01-01 实施 前言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由中国食品工业协会提出并归口。 本标准起草单位：苏州金记食品有限公司、中国食品工业协会豆制品专业委员会、国家大豆产业技术研发中心加工研究室、吉林农业大学食品科学与工程学院、四川省食品药品检验检测院、祖名豆制品股份有限公司、上海清美绿色食品（集团）有限公司、深圳市福荫食品集团有限公司、山东禹王生态食业有限公司、长春维石检测技术服务有限公司、上海市豆制品行业协会、合肥市豆制品行业协会。 本标准主要起草人：吴月芳、金兴仓、于寒松、曾祥博、岳清洪、韩晓华、张凡芝、杨金平、刘军、王猛、张建秋、张之斌、孙玉坤。 1 范围 本标准规定了大豆食品中异黄酮（大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、黄豆黄素、黄豆黄苷）含量测定的高效液相色谱法。 本标准适用于原料大豆及豆浆、豆腐、腐乳等大豆食品中异黄酮含量的测定。 本方法线性范围为 0.5 μg/mL～100 μg/mL，检出限为 2.5 μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 3.1 大豆异黄酮 soybean isoflavones 大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物，以异黄酮葡萄糖苷及其相应苷元形式存在，包括大豆苷（Daidzin）、染料木苷（Genistin）、大豆苷元（Daidzein）、染料木素（Genistein）、黄豆黄素（Glycitein）、黄豆黄苷（Glycitin）。其分子式如下：大豆苷（C21H20O9）、染料木苷（C21H20O10）、大豆苷元（C15H10O4）、染料木素（C15H10O5）、黄豆黄素（C16H12O5）、黄豆黄苷（C22H22O10）。 4 原理 样品经乙腈-水溶液振荡提取，提取液经离心、浓缩后用甲醇溶液（体积分数80%）定容、过滤后进行高效液相色谱分析（C18柱分离），在260 nm条件下测定，依据保留时间定性，采用外标法定量。 5 试剂和材料 本标准使用符合 GB/T 6682—2008 规定的一级水，除另有规定外均使用分析纯试剂。 5.1 试剂 5.1.1甲醇（色谱纯）。 5.1.2乙腈（色谱纯）。 5.1.3二甲基亚砜（DMSO）。 5.1.4冰醋酸。 5.2 试剂配制 5.2.1甲醇溶液（体积分数80%）：取800 mL甲醇用水定容至1000 mL，混匀。 5.2.2二甲基亚砜-乙腈-甲醇溶液（1:2:2体积比）：取10 mL二甲基亚砜和20 mL乙腈，用80%甲醇定容至50 mL，混匀。 5.2.3乙酸溶液（体积分数0.1%）：取1 mL冰醋酸用水定容至1000 mL，混匀。 5.2.4乙酸乙腈溶液（体积分数0.1%）：取1 mL冰醋酸，用乙腈定容至1000 mL，混匀。 5.3 标准品 5.3.1大豆苷元（Daidzein，CAS 486-66-8，纯度≥98%）。 5.3.2染料木素（Genistein，CAS 446-72-0，纯度≥98%）。 5.3.3黄豆黄素（Glycitein，CAS 40957-83-3，纯度≥98%）。 5.3.4大豆苷（Daidzin，CAS 552-66-9，纯度≥98%）。 5.3.5染料木苷（Genistin，CAS 529-59-9，纯度≥98%）。 5.3.6黄豆黄苷（Glycitin，CAS 40246-10-4，纯度≥98%）。 5.4 标准品配制 将6种大豆异黄酮标准品分别精密称取后置于容量瓶中，加入溶剂进行配制。