【其他行业标准】 非鼓泡传氧生物培养器

ICS11.120.30
备案号：36752-2012
中华人民共和国制药机械行业标准JB/T20143-2012
非鼓泡传氧生物培养器
Non-bubbling oxygen transferbioreacton2012-05+24发布
2012-11-01实施
中华人民共和国工业和信息化部发布
中华人民共和国工业和信息化部公告
2012年第20号
工业和信息化部批准《无气喷涂机》等464项行业标准（标准编号、名称、主要内容及起始实施日期见附件1），其中：机械行业标准170项、轻工行业标准105项、纺织行业标准47项、冶金行业标准23项、有色行业标准30项、化工行业标准38项、石化行业标准5项、建材行业标准2项、制药装备行业标准13项、包装行业标准1项、黄金行业标准2项、船舶行业标准6项、民爆行业标准13项、电子行业标准4项、通信行业标准5项；批准《变形铝合金3003光谱标准样品》等6项有色行业标准样品（标准样品目录、成分含量见附件2）；批准JB/T3300一2010《平衡重式叉车整机试验方法》1项机械行业标准修改单（见附件3），现予以公告。以上6项有色行业标准样品及1项机械行业标准修改单自公布之日起实施。以上机械行业标准由机械工业出版社出版，纺织、有色、黄金行业标准由中国标准出版社出版，轻工行业标准由中国轻工业出版社出版，冶金行业标准由冶金工业出版社出版，化工行业产品标准由化工出版社出版，石化行业标准由中国石化出版社出版，建材行业标准由建材工业出版社出版，化工行业工程建设标准、包装行业标准及制药装备行业标准由中国计划出版社出版，船舶行业标准由中国船舶工业综合技术经济研究院组织出版，民爆行业标准由中国兵器标准化所组织出版，电子行业标准由工业和信息化部电子工业标准化研究院组织出版，通信行业标准由人民邮电出版社出版。附件：13项制药装备行业标准编号、标准名称及起始实施日期。中华人民共和国工业和信息化部二〇一二年五月二十四日
附件：
13项制药装备行业标准编号、标准名称及起始实施日期标准编号
JB/T20143—2012
JB/T20144—2012
JB/T20145—2012
JB/T20146—-2012
JB/T20147—2012
JB/T20148—2012
JB/T20149—2012
JB/T20150—2012
JB/T 20008.1—2012
JB/T20008.2-—-2012
JB/T20008.3---2012
JB/T20030—2012
JB/T20032-—2012
标准名称
非鼓泡传氧生物培养器
药用冻干机在线取样装置
药用冻干机无框式自动进出料
药用液氮制冷真空冷冻干燥机
玻璃输液瓶真空充氮灌装机
瓷缸球磨机
抗生素玻璃瓶/安两用洗烘灌
封联动线
抗生素玻璃瓶/安灌装封口两
抗生素玻璃瓶粉剂分装联动线
抗生素玻璃瓶螺杆式粉剂分装机抗生素玻璃瓶轧盖机
多效蒸馏水机
药用真空冷冻干燥机
被代替标准编号
JB20008.1—2004
JB 20008.2—2004
JB 20008. 3--2004
JB20030-2004
JB 20032—2004
起始实施日期
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
2012-11-01
范围·
规范性引用文件
术语和定义
分类与标记·
要求·
试验方法
检验规则·
标志、使用说明书、包装、运输和储存附录A（规范性附录）
一次性细胞培养袋
附录B(规范性附录）
载体，
JB/T20143-—2012
JB/T20143-2012
本标准是根据《药品生产质量管理规范》、JB20067《制药机械符合药品生产质量管理规范的通则》的相关要求和GB/T1.1—2009《标准化工作导则本标准附录A和附录B为规范性附录。本标准由中国制药装备行业协会提出。第1部分：标准的结构和编写》的规则制定。本标准由全国制药装备标准化技术委员会（SAC/TC356)归口。本标准起草单位：杭州安普生物工程有限公司。本标准主要起草人：原世平、张如、李峦峰、胡福林、郭芝香。Ⅱ
1范围
非鼓泡传氧生物培养器
JB/T20143-—2012
本标准规定了非鼓泡传氧生物培养器的术语和定义，分类与标记，要求，试验方法，检验规则，标志、使用说明书、包装、运输与储存。本标准适用于细胞悬浮培养和贴壁培养的非鼓泡传氧生物培养器（以下简称培养器）。2
规范性引用文件
下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB/T191包装储运图示标志
GB5226.1一2008机械电气安全机械电气设备第1部分：通用技术条件GB/T5461—2000食用盐
GB/T6388运输包装收发货标志
工业产品使用说明书总则
GB/T9969
GB/T10111-2008
随机数的产生及其在产品质量抽样检验中的应用程序GB/T13306标牌
GB/T13384
GB/T16769
机电产品包装通用技术条件
金属切削机床噪声声压级测量方法HG/T3935—2007
YBB00012003
YBB00032003
YBB00042003
YBB00052003
YBB00062003
YBB00082003
YBB00092003
哺乳类动物细胞培养基
细胞毒性检查法
溶血检查法
急性全身毒性检查法
皮肤致敏检查法
皮内刺激检查法
气体透过量测定法
水蒸气透过量测定法
YBB00112003
拉伸性能测定法
YBB00122003
热合强度测定法
YY/T0216—1995制药机械产品型号编制方法药品生产质量管理规范（2010年修订）中华人民共和国卫生部中华人民共和国药典（2010年版）二部国家药典委员会1
JB/T20143—2012
3术语和定义
下列术语和定义适应于本标准。3.1非鼓泡传氧non-bubbling oxygen transfer不通过鼓泡将氧气溶入培养液中的传氧方式。3.2载体vector
用于细胞贴壁吸附生长的固相介质。3.3贴壁培养adherentculture
细胞在载体上生长的培养方式。3.4悬浮培养suspensionculture细胞分散于培养液中生长的培养方式。3.5流加fed—batch
细胞培养过程中，连续或间歇添加且不排出培养液的方式。4分类与标记
4.1分类
按细胞培养方式划分为贴壁培养和悬浮培养。4.2标记
4.2.1型号编制下载标准就来标准下载网
型号编制按YY/T0216一1995的规定进行。口口
规格代号：培养袋容积(L）
特征代号：贴壁培养(T)，悬浮培养(X)型式代号：非鼓泡传氧
功能代号：培养器
4.2.2标记示例
示例1：PFT20型。表示培养袋容积为20L的用于贴壁培养的非鼓泡传氧生物培养器。示例2：PFX20型。表示培养袋容积为20L的用于悬浮培养的非鼓泡传氧生物培养器。5要求
5.1材料
与工艺介质直接接触的材料均应无毒、无味、耐腐蚀、不脱落、不发生化学反应或向培养液中释放物质。
5.2外观
5.2.1培养器外表面应简洁、平整，易清洁，不得有颗粒物脱落。允许涂镀的表面其涂覆层应密实，不脱落。
5.2.2罐体内外表面应光滑，便于清洁。2
5.2.3仪表及操作元件应有清晰的标识。5.3性能
5.3.1培养器各气体管道的连接处应不渗漏。JB/T20143—2012
5.3.2培养液温度应能在(25~40)℃范围内设定和控制，控制误差应为设定值的±0.2℃。5.3.3培养液酸碱度(pH)应能在6~9范围内设定和控制，控制误差应为设定值的±0.02。5.3.4培养液溶氧(D0)应能在(5~100)%空气饱和度范围内设定和控制，控制误差应为设定值的±10%。
5.3.5振荡器的转速应可调可控，控制精度应为设定值的±5%。5.3.6操作过程及工艺参数应可记录、可追溯。5.3.7负载噪声应不大于70dB（A)。5.4细胞生长质量
5.4.1悬浮培养细胞密度应不低于8×10°cells/mL，细胞活率不低于90%。5.4.2贴壁培养细胞密度应不低于1.0×10°cells/g载体，细胞活率不低于90%。5.5电气安全
5.5.1电气系统保护联结电路的连续性应符合GB5226.1--2008中的8.2.3的规定。5.5.2电气系统的绝缘电阻应符合GB5226.1—2008中18.3的规定。5.5.3.电气系统的耐压应符合GB5226.12008中18.4的规定。5.5.4电气系统的按钮应符合GB5226.1—2008中10.2的规定。5.5.5电气系统的指示灯和显示器应符合GB5226.1—2008中10.3的规定。5.5.6电气系统的配线应符合GB5226.1—2008中第13章的规定。5.5.7电气系统的标记、警示标记和参照代号应符合GB5226.1—2008中第16章的规定。6试验方法
6.1材料试验
查验相应部件的材质证明资料，当不能证明材质时，应按其相应材料的试验方法进行检验。6.2外观试验
查验确认培养器外表面质量和仪表、操作件标识。6.3性能试验
6.3.1气体管道密封试验。
将气体管路的连接密封处涂抹皂液，通入0.2MPa压缩空气，观察密封处有无气泡产生。6.3.2温度设定和控制试验。
6.3.2.1试验条件：
a）试验环境：18℃~26℃
b）试验用材料：一次性细胞培养袋，其要求按附录A的规定；试验介质：二氧化碳：氮气；磷酸缓冲盐溶液（简称PBS溶液）：用精度为0.01g的天平称取c）
氯化钾0.2g、无水磷酸二氢钾0.24g、氯化钠8.0g、用精度为0.001g的天平称取无水磷酸氢二钠1.44g，加纯化水1000mL，混匀即得；碱液：称取碳酸氢钠75g，加纯化水1000mL，混3
JB/T20143--2012
匀即得。
d）试验参数：见表1。
PFX200
PFX1200
6.3.2.2试验步骤：
PFT200
表1试验参数
转速（r/min）
温度（℃）
溶氧（%）
向一次性细胞培养袋中加入PBS溶液至工作容积（见表2），开启加热器。启动温度、pH、a）
溶氧、转速控制程序，培养器进人负载运行。b）
当工艺参数达到设定值并运行30min后，用温度传感器测量PBS溶液温度并记录；c)
查验1h内测得的最高温度值和最低温度值与设定温度值比较；按式(1)计算控制误差：W=M(m)-S
式中：W.控制误差；
M——最高测量值；
m-最低测量值；
S—设定值。
：（1）
d）在允许设定的温度范围内再任意设定两档温度值（其他工艺参数不变），重复以上试验，检验温度在规定范围内可调可控。6.3.3pH值设定和控制试验。
将pH值调整为7.10.按6.3.2.1的试验条件，用pH检测系统自动测量和记录。查验运行1h内测得的最高pH值和最低pH值,与设定pH值比较,按式(1)计算控制误差。在允许设定的pH范围内再任意设定两档pH值（其他工艺参数不变），重复以上试验，检验pH在规定范围内可调可控。
6.3.4溶氧设定和控制试验。
按6.3.2.1的试验条件,用溶氧检测系统自动测量和记录。查验运行1h内测得的最高溶氧和最低溶氧并与设定值比较，按式(1)计算控制误差。在允许设定的溶氧范围内，再任意设定两档溶氧（其他工艺参数不变），重复以上试验，检验溶氧在规定范围内可调可控。
6.3.5转速设定和控制试验。
按6.3.2.1的试验条件，用转速测速仪自动测量和记录。每隔2min记录一次转速值，共记录6次，用测得的最高转速值或最低转速值与设定转速值比较，按式(2)计算控制精度。W2 =[M2(m2)- S2]/S2
式中W,转速控制精度；
M2——最高转速值；
mz最低转速值;
Sz—设定转速值。
JB/T 20143—2012
在允许设定的转速范围内，再任意设定两档转速（其他工艺参数不变），重复以上试验，检验振荡器转速在规定范围内可调可控。6.3.6控制系统记录试验。
上述试验完毕,将培养器断电，重启，查验操作过程及工艺参数的记录。6.3.7噪声试验。
培养器负载运行状态下，按GB/T16769规定方法测试噪声。6.4细胞生长试验
6.4.1悬浮培养细胞生长试验。
6.4.1.1试验条件：
试验环境：符合《药品生产质量管理规范》规定的C级洁净区。a）
b）试验介质：分析纯试剂及纯化水或注射用水，纯化水和注射用水符合药典规定，以下同；CHO细胞无血清无动物组分培养液（或BO01安普生产培养液）；除菌过滤的二氧化碳；氮气。
试验细胞：中国仓鼠卵巢细胞（CHO-S悬浮培养细胞株）,接种密度为1×10℃cells/mL，细c）
胞活率不低于90%。
试验参数：见表2。
表2试验参数
PFX200
PFX1200
转速（r/min）
6.4.1.2试验步骤：
温度(℃）
溶氧（%）
起始容积(L)
工作容积(L)
复苏CHO-S细胞，方瓶传代2~3次，使用培养器悬浮并扩增细胞。将CHO细胞接种于培养器中的一次性细胞培养袋内，然后添加细胞培养液至起始容积，按HG/T3935--2007中7.7.4.3测定接种细胞密度和活率。采用流加培养方式，输人运行参数，启动反应器运行，每12h用取样器取出细胞悬液15mL,按葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量。通过流加培养液至工作容积，控制糖含量不低于3g/L，悬浮培养96h。用取样器从取样口取出细胞悬液15mL，按照HG/T3935—2007中7.7.4.3进行细胞密度及活率的测定。
6.4.2贴壁培养细胞生长试验。
6.4.2.1试验条件：
a）试验环境：符合《药品生产质量管理规范》规定的C级洁净区。5
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