【国家标准】 食品安全国家标准 食品中4-己基间苯二酚残留量的测定

中华人民共和国国家标准
GB5009.2802020
食品安全国家标准
食品中4-己基间苯二酚残留量的测定2020-09-11发布
2021-03-11实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
GB5009.2802020
本标准代替SN/T36412013《出口水产品中4-已基间苯二酚残留量检测方法》。本标准与SN/T3641—2013相比，主要变化如下：标准名称修改为“食品安全国家标准食品中4-已基间苯二酚残留量的测定”；一一修改了前处理部分操作。
1范围
食品安全国家标准
食品中4-己基间苯二酚残留量的测定本标准规定了虾和螃蟹中4-已基间苯二酚残留量的测定方法。本标准适用于虾和螃蟹中4-己基间苯二酚残留量的测定2原理
GB5009.2802020
样品经乙酸乙酯提取，乙饱和正已烷除脂，采用高效液相色谱分离、荧光检测器检测，外标法定量。
3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂
3.1.1乙睛(C2HN)：色谱纯。
3.1.2甲醇(CHsOH)：色谱纯。
乙酸乙酯（CHsO2）：色谱纯。
正已烷(CH4)：色谱纯。
无水硫酸钠（Na2SO4）：将无水硫酸钠置于马弗炉内于400℃下灼烧4h后，置于干燥器血内备用。
3.2试剂配制
3.2.1乙饱和正已烷溶液：在正已烷中加入一定量的乙睛，振摇、混匀，混合液清晰分层后，上层即为乙腈饱和正已烷。上层液备用。3.2.2甲醇-乙-水混合溶液（1+2+1，体积比）：分别量取100mL甲醇、200mL乙腈和100mL水，在IL玻璃烧杯中混匀，备用。
3.3标准品
4-己基间苯二酚标准品（Ci2H1gO2,CAS号：136-77-6）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
3.4标准溶液配制
3.4.14-已基间苯二酚标准储备液（100μg/mL）：准确称取10mg（精确至0.01mg)4-己基间苯二酚标准品，用甲醇溶解并定容至100mL，混匀。将溶液转移至玻璃容器中，于-18℃保存，有效期6个月。GB5009.2802020
3.4.24-已基间苯二酚标准中间液（10μg/mL）：吸取标准储备液（3.4.1)1.00mL于10mL容量瓶中，加甲醇定容。临用现配。
3.4.34-已基间苯二酚标准系列工作液：分别吸取4-已基间苯二酚标准中间液0.02mL、0.05mL、0.10mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL于10mL容量瓶中，加甲醇-乙睛-水混合溶液定容至刻度。4-已基间苯二酚标准系列工作液的质量浓度分别为0.0200μg/mL、0.0500ug/mL、0.1000.500μg/ml、1.00μg/ml、2.00μg/mL。临用现配。仪器和设备
4.1液相色谱仪：配有荧光检测器。4.2天平：感量为0.01g及0.01mg。4.3旋转蒸发仪。
4.4涡旋混合器。
4.5超声波发生器。
4.6离心机：转速可达到4000r/min。4.7组织捣碎机。
4.8均质器。
4.9浓缩瓶。
4.10有机相微孔滤膜：0.45
5分析步骤
5.1试样制备
μg/mL、
取代表性样品的可食部分约500g，经组织捣碎机粉碎混匀后，装入洁净的容器中作为试样，密封并做好标识。试样于-18℃保存。
5.2试样提取
称取2g（精确到0.01g）样品于50mL离心管中，加入20mL乙酸乙酯和3g无水硫酸钠，均质30s后，以4000r/min离心3min，将上清液全部转移至100mL浓缩瓶中，残渣再次加入20mL乙酸乙酯，均质30s，以400Or/min离心3min后，将上清液与第一次获得的上清液合并于同一浓缩瓶中，于35℃水浴中蒸发至近干。
5.3试样净化
向残渣准确加入2mL甲醇-乙睛-水混合溶液复溶，超声10s，涡旋30s.残渣溶解后，加入2mL乙睛饱和正已烷溶液，涡旋30s，转移至15mL离心管后以4000r/min离心3min，弃去正已烷层后向离心管中再次加入2mL乙饱和正已烷溶液涡旋30s，以4000r/min离心3min，弃去上层正已烷层，取下层过0.45um有机微孔滤膜过滤，滤液待上机。5.4空白试验
除不加试样外，均按5.2和5.3测定步骤进行。2
5.5测定
仪器参考条件
色谱柱：C8柱，250mm×4.6mm（i.d.），b）
流动相：乙睛+水=65+35：
流速：1.0mL/min;
粒径5μm；
检测波长：激发波长280nm，发射波长310nm；柱温：35℃；
进样量：10μL。
标准曲线的制作
GB5009.2802020
将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以标准系列工作液中4-己基间苯二酚的质量浓度为横坐标，以4-已基间苯二酚的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。4-已基间苯二酚标准溶液的色谱图参见附录A。
5.5.3试样溶液的测定
将试样溶液注入高效液相色谱仪中，通过保留时间定性，得到待测物峰面积，根据标准曲线得到待测液中4-已基间苯二酚的质量浓度。结果计算和表述
试样中4-已基间苯二酚的含量按公式(1)计算：(e-c0)×V×1000
mx1000
式中：
试样中4-己基间苯二酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；(1)
一由标准曲线得到的试样溶液中4-己基间苯二酚的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）：一由标准曲线得到的空白试验中4-已基间苯二酚的质量浓度，单位为微克每毫升（口g/mL)：测试样品的复溶体积，单位为毫升(mL);1000—一单位换算系数；
试样的称样量，单位为克（g)。计算结果保留3位有效数字。
7精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。8其他
当虾和螃蟹称样量为2.00g时，检出限为0.0200mg/kg，定量限为0.0500mg/kg。3
附录A
4-己基间苯二酚标准溶液和加标色谱图已基间苯二酚标准溶液的液相色谱图见图A.1。1600000
1400000
1200000
1000000-
800000
600000
400000
200000
4-己基间苯二酚-6.655
5009.2802020
-200000
0.001.252503.755.006.257.508.7510.00/min
4-已基间苯二酚标准溶液的色谱图（质量浓度为1.0μg/mL）4
A.24-己基间苯二酚的样品加标液相色谱图见图A.2。3500000
3000000-
2500000
2000000-此内容来自标准下载网
1500000-
1000000-
-500000-
5009.2802020
4-己基间苯二酚-6.633
图A.2样品加标色谱图（加标量为1.00mg/kg）10.0
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