【农业行业标准(NY)】 水稻褐飞虱抗药性监测技术规程

ICS 65.100.01
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1708—2009
水稻褐飞虱抗药性监测技术规程Technological rules for monitoring insecticide resistance in rice brownlanthopper，Nilaparvatalugens(Stal）2009-03-09 发布
2009-05-01实施
中华人民共和国农业部
本标准附录A为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、南京农业大学。本标准主要起草人：梁桂梅、沈晋良、李永平、高聪芬、苏建亚。建筑321---标准查询下载网

NY/T1708—2009
1范围
水稻褐飞虱抗药性监测技术规程NY/T1708—2009
本标准规定了稻茎浸渍法和稻苗浸渍法监测稻褐飞虱[Nilaparvatalugens(Stal)抗药性的方法。本标准适用于杀虫剂对稻褐飞虱室内毒力测定和稻褐飞虱的抗药性评估。2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。2.1
抗药性
resistance
一种农药当用其标签推荐的剂量防治某种害虫时，即使重复试验也无法达到所期望的防治效果，该种群的敏感性所出现的遗传变化称作抗药性。2.2
敏感基线
susceptibilitybaseline
在某种农药使用之前，该种药剂对褐飞虱敏感品系的毒力基线及LDso或LCs0。2.3
rice-stemdippingmethod
稻茎浸渍法
稻褐飞虱接触、取食浸药稻茎而中毒死亡的毒力测定方法，适用于稻褐飞虱对杀虫作用较快、具有触杀和内吸作用的有机磷酸酯、氨基甲酸酯、氯化烟碱类、昆虫生长调节剂、苯基吡唑类、有机氯类等杀虫剂的抗药性监测。
稻苗浸渍法日rice-seedlingdippingmethod稻褐飞虱接触、取食浸药的杯栽稻苗而中毒死亡的毒力测定方法，适用于稻褐飞虱对杀虫作用特慢而持效期长的吡啶甲亚胺杂环类等杀虫剂的抗药性的监测。3试剂与材料
3.1·生物试材
3.1.1稻褐飞虱
田间采集，经室内饲养1代～2代的3龄中期若虫。3.1.2供试水稻
TN1或汕优63（温室笼罩内盆栽的无虫、未用药处理的水稻）。3.2试验药剂
原药或母药(分析纯）。
4仪器设备
4.1实验室通常使用仪器设备
4.2电子天平（感量0.1mg）。
4.3培养杯(直径7cm，高27cm)。4.4塑料小杯直径5cm，高4.5cm)。NY/T1708—2009
4.5恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱。4.6塑料圆筒（直径16cm，高15cm）。4.7吸虫器。
5试验步骤
5.1试材准备
5.1.1试虫
5.1.1.1试虫采集
选当地具有代表性的稻田3块～5块。每块田随机多点采集生长发育较一致的稻褐飞虱成虫或若虫或卵，每地采集虫（卵)1000头(粒)以上，供室内饲养。5.1.1.2试虫饲养
采集的成虫接入供试水稻上分批产卵(2d～3d一批）。采集的若虫或卵在供试水稽上饲养到成虫后再分批产卵，取3龄中期若虫供试。5.1.2供试水稻
5.1.2.1稻茎
连根挖取分菓至孕穗初期、长势一致的健壮稻株，洗净，剪成10cm长的带根稻茎，3株一组，于阴凉处晾至表面无水痕，供测试用。5.1.2.2稻苗
在温室内用塑料小杯播种水稻，每杯20株～30株稻苗，选择生长至10cm高的稻苗供试。5.2药剂配制
原药用有机溶剂（如丙酮、乙醇等）溶解，加人10%(m/)用量的Triton-X100(或吐温80），加工成制剂，并用蒸馏水稀释。根据预备试验结果，按照等比例方法设置5个～7个系列质量浓度。每质量浓度药液量不少于400mL。
5.3处理方法
5.3.1稻茎浸渍
将供试稻茎在配制好的药液中浸渍30s，取出晾干，用湿脱脂棉包住根部保湿，置于培养杯中，每杯3株。按试验设计剂量从低到高的顺序重复上述操作，每浓度处理至少4次重复，并设不含药剂的处理做空白对照。
5.3.2稻苗浸渍
在稻苗高约10cm的塑料小杯土表加约2mL1.5%琼脂水溶液，静置1h待凝固。将杯栽供试稻苗倒置在配制好的药液中，浸渍到稻苗基部30S，取出晾干，将杯放人搁物架并盖上通气的盖子。按试验设计剂量从低到高的顺序重复上述操作，每浓度处理至少4次重复，并设不含药剂的处理做空白对照。5.3.3接虫与培养
用吸虫器将试虫移入培养杯或塑料小杯中，每杯10头～15头，杯口用纱布或盖子罩住，转移至温度为25℃士1℃、相对湿度为60%～80%、光周期为L：D=16h：8h条件下饲养和观察，特殊情况可适当调整试验环境条件，应如实记录。5.4结果检查
稻茎浸渍法于处理后5d、稻苗浸渍法于处理后10d～15d检查试虫死亡情况，记录总虫数和死虫数。
6数据统计与分析
6.1计算方法
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根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按式(1)和式(2)计算，计算结果均保留到小数点后两P,
式中：
P1———死亡率,单位为百分率(%);K
式中：
表示死亡虫数，单位为头；
-表示处理总虫数，单位为头。
P-Po×100
校正死亡率，单位为百分率(%)；P
处理死亡率，单位为百分率(%)；Po
空白对照死亡率，单位为百分率（%）。(1)
若对照死亡率<5%，无需校正；对照死亡率在5%～20%之间，应按式(2)进行校正；对照死亡率>20%，试验需重做。
6.2统计分析
采用SAS、EPA、POLO、BA、DPS等统计分析系统软件的几率值分析法进行统计分析，求出每个药剂的毒力回归方程式、LC5o值及其95%置信限、b值及其标准误。7抗性水平评估
7.1水稻褐飞虱敏感毒力基线的制定水稻褐飞虱抗性监测的毒力基线参照附录A。7.2抗性水平的分级标准
抗性水平的分级标准见表1。
表1水稻褐飞虱抗性水平的分级标准抗性水平分级
敏感性下降(或早期抗性)
低水平抗性
中等水平抗性
高水平抗性
极高水平抗性
7.3抗性水平的计算与评估
抗性倍数
根据敏感品系的LCso值和测试种群的LCso值，计算测试种群的抗性倍数。按式（3)计算，计算结果均保留到小数点后一位：
抗性倍数：
测试种群的LCso
敏感品系的LC50
按照抗性水平的分级标准，对测试种群的抗性水平做出评估。8监测报告编写
根据统计结果和抗性水平评估，写出正式抗性检(监)测报告，并列出原始数据。（3）
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8—2009
附录A
(资料性附录）
水稻褐飞虱敏感毒力基线
杀虫剂对江浦敏感品系(JPS)和杭州敏感品系(HZS)的毒力基线数据表A.1
阿维菌素ECe
氟虫腈ECe
噻嗪酮(5%EC)2
噻嗪酮(25%WPl）
噻虫嗪EC
呋虫胺SL3
吡虫啉EC?
吡虫啉（10%WP）
氯噻啉EC2
烯啶虫胺EC2
啶虫胀ECe
毒死蜱EC
异丙威EC
硫丹EC3
吡蚜酮ECe
LD-PLine
9.030 6+2.396 9x
8.039 7+2.149 3x
10. 019 0+4.248 6x
6.6499+2.8865x
7.134 0+2.184 0x
7.353 7+2.716 2x
6.676 6+1.511 9x
7.142 2+2. 079 2x
6.003 0+2.098 5x
5. 708 5+2.173 8x
2. 836 2+2. 465 2x
4.2591+3.1439x
3.6570+2.2809x
6.649 6+2.642 4x
4. 810 3+0. 660 4x
LCso (95%CL)mg a.i. /L
0.021(0.018~0.24)
0.039(0.03~0.05)
0. 066(0.06~0. 07)
0.268(0.21~0.32)
0.105(0.09~0.12)
0.136(0.11~0.18)
0.078(0.05~0.10)
0.09(0.08~0.11)
0.333(0.27~0.40)
0.472(0.25~9.51)
7.546(6.42~9.01)
1.721(1.40~12.81)
3.880(3.29~4.59)
0.238(0.19~0.30)
1.938(1.17~3. 48)
稻茎浸渍法
稻苗浸渍法
注1：江浦敏感品系(JPS)的毒力基线制定：1993年采集于江苏省江浦县植保站预测圃水稻田的第一代褐飞虱成虫，在室内经单对纯代筛选得敏感品系，在不接触任何药剂的情况下用汕优63杂交稻在室内饲养。注2：杭州敏感品系（HZS)的毒力基线制定：2005年7月由杭州化工集团提供。该品系于1995年采自杭州市蒋家湾村单季水稻大田，在室内不接触任何药剂的情况下用汕优63杂交稻饲养。4
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中华人民共和国
农业行业标准
水稻褐飞虱抗药性监测技术规程NY/T1708—2009
中国农业出版社出版
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北京昌平环球印刷厂印刷
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新华书店北京发行所发行
开本880mm×1230mm1/16
2009年9月第1版
印张0.75
字数7千字
2009年9月北京第1次印刷
书号：16109·1931
定价：18.00元bzxZ.net
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