【国家标准(GB)】 高粱 单宁含量的测定

ICS 67. 040
中华人民共和国国家标准
GB/T15686—2008
代替GB/T15686—1995
单宁含量的测定www.bzxz.net
Sorghum---Determination of tannin content(IS0) 9648:1988,M0D)
2008-11-04 发布
中华人民共和国国家质量篮督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2009-01-20实施
本标准修改采用1SO9648：1988《高疑单宁含量的测定》（英文版）。本标准与 ISO 9648:1988 的技术性差异为：GB/T15686—2008
谷物来样（籽粒）\已经废止，所以改为引用“GB5491用于原标准引用的标准“1S0950：1979粮油、油料检验托样分样法”。为了便于使用，本标准做了下列编辑性修改：“本国际标准”一词改为“本标推”；删除国际标准的前言，增补新的前言；将原文中的“引用标准”改为\规范性引用文件”，并增加\凡是不注日期的引用标准，其最新版本适用于本标准\的文字说明；将引用“ISO712：1985谷物及谷物产品水分含量测定（常规参考方法）”改为引用“GB/T21305谷物及谷物制品水分含量的测定常规法\；改为x_、
为了更清晰地表述,将第9章中单宁含量计算公式100-H
本标准代替GB/T15686—1995《高无中单宁含量的测定》。本标准与GB/T156861995相比主要变化如下：单宁酸标准品采用IS09648：1988推荐的默克公司的773单宁酸：单宁提取液与试样分离,采用 3 000 g(3 000 m/s×9. 81 m/s)离心加速度的离心机分离。本标准由国家粮食局提出。
本标准全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草单位：河南T业大学。本标准主要起草人：翟权恭，范璐、周展明。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-GB/T15686—1995。
1范围
高粱单宁含量的测定
GB/T 15686—2008
本标雅规定厂一种通用的高疑单宁含量测定方法，这种测定方法并不是针对某一种类型的多酚类物质的测定。用雄鸡进行动物实验测定的高檗代谢能与本方法测定的结果之间，具有很好的负相关性，证明了本方法的有效性。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标推的条款。凡是注H期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括谢误的内容）或修订版均不适用丁本标准，然而，鼓励根据本标准达成协设的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注H期的引用文件，其最新版本适用于本标推。GI35491粮食、油料检验打样，分样法CGB/T21305谷物及谷物制品水分的测定常规法（GB/T21305—2007.ISO712:1998，IDT）3原理
用二甲基甲酰胺溶液提取高单宁，经离心后取上消液加柠檬酸铁铵溶液和氨溶液，显色后，以水为空白对照，用分光光度计于525nm处测定吸光度值，用单宁酸作标准曲线测定高凝单含量。4试剂
所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水或与之相当纯度的水。4.12g/L单宁酸溶液，该溶液可保存-周。注：由于不同来源的单宁酸对标准曲线有影响.所以，推荐便用克公司的773单宁酸（Merck reference 773 tannicaeid\作为参考，以便于实验室之问比较测定结果。4. 28. 0 g/L 氮(NH,)溶液。
4,375 %二甲基甲酰胺溶液:取 75 mL 二甲基甲酰胺溶液丁 Ir00 mL 容量瓶中，用水稀释,冷却后加水至刻度。
替告一一当二甲基甲酰胺被吸入惑与皮肤接触射,有害于健康,并且刺效眼随。4.43.5g/L柠檬酸铁铵（铁含量17%～20%)溶液：在使用前24h配制。由于柠檬酸缺的铁含景影响测定结果，应特别注意其含量。5仪器
实验室常规仪器以及下列仪器：5.1粉碎机：粉碎样品并全部通过筛子（5，2)，5.2筛子：孔径0.5mm。
5. 3离心机:具备 3 000 g(3 000 m/s2×9.81 m/s)离心加速度。5. 4离心管:容量约 50 mL，具密封。5.5往复式机械搅拌器或磁力搅拌幕。1）献克公司的773单宁酸是商品化的产品，为本标准的使用者提供这样的信息，并不意味者它己经是ISO认可的产品。
GB/T 15686--2008
5. 6 涡旋式报荡器:可用于试管,5.7分光光度计:带10 mm 比色.,可在525 num处测定。5.8移液管:1 ml.、5 ml..20 ml..5. 9 刻度移液管:5 ml.,10 mL。5.10武管：140mm×14mm。
5. 11 睿量瓶:20 ml.。
6扦样
按照GB5491进行打样和分样。
测定单宁的高梁样品于爆后，避光以保存几个月。7试样制备
除去试拌中的杂质，用粉碎机（5.1)粉碎试样，并全部通过筛子（5.2)，充分混合均勾。试样粉碎后，单宁会迅速氧化，应立即分析测定试样。注：粉释的择品最多避光保存儿天，最好干燥后保存。8操作步骤
8. 1 水分测定
试样水分含最按照GB/T21305测定。8.2称样盘
称取试样(7)约 1 g,精确至 1 mg,置离心管中(5.1)。8.3样品测定
8.3.1用移液管（5.8)取20ml.一甲基甲酰胺溶液（4.3)于装有样品的离心管中，盖好密闭盖并用搅拌器(5.li)搅拌提取60 min士1min。然后以300n)g离心加速度离心10 min8.3.2用移液管(5.8)取1ml上清液(8.3.1)下试管(5.10)中,用移液管分别加6ml水和1mL氢溶液(4.2),然后用振菌器(5.6)振荡几秒钟，83.3用移液管（5.8)移取1mI1清（8.3.1)=试筐（5.10)中.用移液管（5.8)分别切5ml水和【mL杆檬酸铁铵溶液（4.4），用振荡器（5.6)振荡几秒钟。然厉,用移液管（5.8)加1mL氨溶液（1.2)，用振荡器（5.6）再振荡儿秒钟。8.3.4在8.3.2和8.3.3操作结束10min±1min后，分别将8.3.2和8.3.3溶被倒入比色Ⅲ中，以水为空白对照，用分光光度计(5.7)于525nm处测定吸光度值。试样的吸光度值测定结果Ax为两个吸光度值之差，8.4测定次数
同--样品测定两次。
8.5绘制标准曲线
在测定试样的当天，按照8.5.1～8.5.3的步骤绘制标准曲线。8.5. 1准备 6 个 20 mlL 容量瓶(5. 11),用刻度移液管(5. 9)分别胎人 0 mL、1 ml.、2 mL、3 mL,4 tmL、 IL单宁酸溶液(4.1),加二巾基甲酰胺溶液(4,3)至刻度,所得标系列溶被的单宁酸含最分别为0mg/mL,0. 1 mg/ml.0.2 mg/mL.(0.3mg/mL.0.4 mg/mL.0.5 mg/mL8.5.2分别移取 1 mL以上标准系列溶液于试管(5.10)中,用移波管(5.8)分别加5 mL水和1 ml.柠檬酸铁铵溶液（4.4）,用振荡器（5.6)振荡儿秒钟：然后，加1mL氨溶液（4.2）,用振药器（5.6)再振药几秒钟。静置10min上1min后，将溶液倒人比色Ⅲ中，以水为空白对照，用分光光度计（5.7）于525nm处测定吸光度值。
CB/T 15686--2008
8.5.3以标准系列8.5.1中各济液的吸光度值为纵坐标，相应的单宁酸微度（mg/m1.)为横坐标，绘制标准曲线。标准曲线不经过原点，而且不需要校正通过原点。9结果计筒
试样中单宁含量(X)以干基中单宁酸的质分数（%)表示，按式(1)计算：2cx
X100-H
式中;
---从标准曲线（8.5.3)读取的试样提取液中单宁酸的浓度，单位为毫克每旁升（rg/mL.)；m
试样的质量（8.2），单位为克（g)：试样的水分含量(8.1),%。
如果两次测试结果满足按表1用线性内插法计算的重复性要求，测试结果用两次测定的算术平均值表示。
10精密度
法国9个实验室进行了实验牵们的比较实验，每个样品测定3软，保留8个实验室测定结果讲行统计分析，统计结果（参照ISO5725评价）见表1。表1以试样干基中单宁酸质量分数表示的结果样品
平均宿
重复性的标准偏差（S,）
熏复性的变异系数
重复性（2.8S.）
再现性的标准偏差（SR)
再现性的变异系数
再现性（2.8Se）
测试报告
样品1
样品2
样品3
测试报告应明确说明使用的方法，单宁酸的生产商、参考号和测定结果，也应说明所有在本标准中末规定或规为任选的操作细节，以及其他可能已经影响了实验结果的事件。测试报告危括完整的识别样品所需的所有信息2）1S05725：1986测试方法的精密度通过实验室问试验确定标准测试方法的重复性和再现性GB/T15686-2008
中华人民共和国
国家标准
高桑单宁含量的测定
GB/T 15686—2008
中国标准出版社出版发行
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字数 8 千字
2009年1月第一版
2C09年1月第-次印刷
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