【农业行业标准(NY)】 花生黄曲霉毒素B1的测定 高效液相色谱法

ICS 67.050
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1286—2007
花生黄曲霉毒素B,的测定
高效液相色谱法
Determination of Aflatoxin B, Content in Peanut-High Performance Liguid Chromatography2007-04-17发布免费标准下载网bzxz
2007-07-01实施
中华人民共和国农业部
本标准由中华人民共和国农业部提山并归11。本标准起草单位：农业部油料及制品质量监肾检验测试中心。本标推主要起人：李培武、张文、」小殿、谢立华，陈小媚、李光明、陈洪。NY7T 1286—2007
NY/T1286—2007
花生黄曲霉毒素B,的测定高效液相色谱法本标准规定了采用高效液相色谱法测定花生黄曲需毒素3含量的方法。本标准适用于花坐中黄曲毒素B，的测定。本方法检出限为1.0μg/kge
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标，然而，鼓根据本标准达成协议的各方研究是否可使弟这些文件的最新版本。凡是不注H期的用文件，其最新版本适用于本标谁：GB 5491粮食油料检验扦样、分样法GB6682实验室用水规定（CB6682---1992，egVIS）3696—1987）3原理
样品中黄曲霉毒素B经提取，浓缩、衍生化，反相C1g柱分离后，在激发波长365mm，荧光波长440nm检测，外标法定量，计算样品黄随截薄索B,含最。4试剂
下列试剂除注明外均为分析纯，水为GB6682规定的二级水。4.1甲醇，色谱纯
4.2乙晴，色谱纯。
4.3甲醇溶液（含4%飘化钠），称坡4g氮化钠（NaC1)溶丁70mL甲醇和30ml.水的混合溶液。4.4氟乙酸。
4.5石油醚（6090℃）
4.6三氯甲烷。
黄曲奔毒素B标准储备液，10m/L5仪器设备
5.1天平，感量1mg=
5.2切片机
5.3粉碎机
5.4旋涡混合器。
5.5超市波清洗暴，功率不低于50W。5.6干热氮吹仪，挖温精度50℃±2℃。5.7中速定性滤纸，
5.8烘箱，控温精度50%℃±2℃：5.90.45pm有机相滤膜。
NY/T 1286—2007
5.10Nova-pak Cis色谱柱(3.9innX150mm)。5.11液相色谱仪（带荧光检测器）。6取样
按 GB 5491执行。
7试样的制备
样品中的水分及探发物含量超过10%时，在45℃左右的条件下通风干燥：将十燥的花生样品在切片机中切片至0.5uml左右，再经粉碎机粉碎，过0.42mm筛。8分析步骤
8.1提取
称取20g精确至10mg）样品，置于250mL具蜜形瓶中，加60m正中醇溶波（4.3）。50=2℃水浴超声提取5min（每隔1min取山旋涡混合1次），过双层中速定性滤纸（5.7)，收集滤液于小烧杯中，敢滤液10ml.于试管a中，加入5tnL石油醚（4.5），旋涡混合30s，静置2min，待分层后，弃上层，取下层落校5ml于试管b中，加入5mL二氯甲烷(4.6)至试管b中,旋涡混个10,静置2min,取出上层于试曾,再加人5m三氯中烷(4.6)至试管b中旋涡混合10 s,静置2min,敢上层，合并两次提取液子试管c中。8.2柱前衍生
将提取液置下热氮吹仪（5.6)50℃恒温吹丁，加人200l.衍生试剂（4.4)，盖好塞子，施涡混合30,50℃烘箱中衍生5min,置」T热氮吹仪（5.6)50℃恒温吹，用1mT流动相溶解，过有机相滤膜（5.9，湛液用液相色谱分析，
8.3色谱分析
8.3.1取黄山霉毒索B标准储备液（4.7)，用甲醇（4.1)稀释至20g/L.40ug/L、80g/L、160ug/L320必/L标准使用液连同样品依次进样，进行液相色谱检测，建立工作曲线。8.3.2色谱条件：流动相：腈1甲醇+水=13+12175,流速：0.8mL/rxi进样量10μl,柱温30℃，检测器：EX:365nm,FM:440n11n
9结果计算
试样中黄曲霉每素B含量以质量分数W计，单位以微克每于克衣示（ug/kg），按公式(1)计算：V/XD1000×1000
式中：
m1——从工作山线上计算出进样体积样品中黄曲霖毒素B,质量，单位为微克(rug)；V1—----加入流动相体积的数值，单位为毫升(mL)；V2—-逊样体积,单位为微乃（μL)：D—样液的总稀释倍数；
试样质量，单位为克(g)。
计算结果保留小数点后一位
10精密度
测定结果用算术平均值表示。两次平行测定结果的相对相差小于10%。2
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