【商检行业标准(SN)】 香蕉细菌性枯萎病菌检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1390—2004
香蕉细菌性枯萎菱病菌检疫鉴定方法Mcthods for quarantinc and idcntificntion of Ralstonia solanacerun(Smith) Yabuuchi et al race 22004-06-01发布
中华人民共和国
菌蒸质量选检验检疫感局
2004-12-01实施
本标准的附录A,附录B和耐示C为资料性附录。本标准出国家认证认可监督当理委员会提出并归可。本标准起草单位：中华人民共和国广州出入境校脸检疫局，本标准主要起草人，张传飞、行国班、赵立荣、川徒保谈。本标准系首次发有的出人境检验检疫行业标准，SN/T1390—2004
1燕国
香蕉细菌性枯藜病菌检疫鉴定方法本标准规定了进出境植物检疫中香蒸细商性情率疾首检变签冠力法，$N/T 1390-2004
本标准道用子香藻·大摄、蜗路蒸等资丰情物之彩实、吸芽、试世首知其他第殖材料的香然细菌性费赖激疫临定。
2规英性引周文
下列文件中的最款随这本标能的引消的成为本标准龄条款。品选期的到用实舒改随所所有的格改单（不包括动说的内替>或修订致均不适开学本标造，照流，鼓励投指本标性达成协议的各方研究是可使用这些文件的最舒版本，后不注正期的引用文性，其最新限车适月于本标增。CB，T4789.28--1594食品J生微生物学：检验集色法、培郑基利式湖3
奇带细菌性美辆菌分失地学东ar（Si）Yhanhtal2异名PaudwnasrolaucmarumE.F.Smnthrere2,编害英文Minkseasecfbarana城老Besenreilttf hanana，该病案来两于原核生物男Peuiryole，两细荫门Gruci.izutes，Ralxrorie.ceaz利：Keloriak
香离继菌性枯美病菌会主范国、症状特点，洛性状及牛物学析性等方面，不于还似种，也不间于奔枯齿药其延生琼小种减生特型，是说病菌的茶定依据鑫见肝录只、磁录.4依器试刻
4、1仪器、器具
4.1.1生物显微镜.
4..2紧部显微赖
4,3解辞工作白。
4.1,4 生物培亲辑。
4. 1. 5 高压灭雷密、
4. 1. 6恒短计她箱,
4.1.7此第
4.1.3天平感.0g
4.1.9试管(1515），
4.1，10小件用器兴：踏蒸原、酒精虾营、致范片、益玻片、依种针、按种路、移液然、真魔款、烧虾、记专笔、小剪万、数子、月片等。4.2剂
4.2.1TTC养张（参见附量C)
4. 2.295%乙酶(H,0)-
,2.3氧酸销蒂C0
4.2.4茜水。
SN/T 1390—2004
5实验室检验
5.1症状检查
首先应看植株足否著满，按声范味的根基叶果等各个部立，叶片是否化黄、折佳，实是否质池变硬、削免变据、干腐，如果发现上述信何种在状、应设时用辉削刀横向剖开病假茎至部，效查式难者束组织是否变越色，病部受挤片后是否有菌雌带出，如果是则应迷步处离纯化苗钟。本病立状易与者患巴拿可差满病（aryeram「.p,henis便销但前者通游是值株上部的一片动叶先超鼠贡化，前后者往往后下部老叶先发病，病部无谢帐、火害不产生民色干腐的病果。5.2细菌的分离纯化
5.2.1分离：采用选净性.TC培养基，板划线法残希样分离法分商细直，将病纠织划成3mm死方的小尖.元月70必艺醇泡C，情出后用C.3次素酸钠部液处理5n、典书菌水清洗网次，量与把病组！置放洁净的载玻片上搞萨，挣觉20，用接行坏的取汁满在TC平板上龙跌，35~37下培养3山一-4d后.检查并萨选培养基主的菌落。吉枯萄在TT[上特：无致病力或致病力很弱的菊落深红免：致病性菌落为流压状、方色或中失带淡组的自色。5.2.2苗冲纯化采用平板划线法、即用灭菌的多针头取TTC上可疑的致病菌落后，在TTC平板上$以划线纯它，仁5~组度下培养2d~1d移出单个菌落后进一步扩人整结，5.3单兰氏染色区盘(可省培本步）益兰阴件反盘安GT/T4783.2%—15S1中的2.2进行至验，5.4致病性测
5.4.1即试构
漫试抗物除香您外，还应在马蕾，吾帖、烟草，张子、姜五种植物中任选两种，香燕枯密病函瓜丁三号小种，寄生专化三，只为害再燕不为害其他测试堂物。5. 4. 2 接种方法
接种采用针刺加注的力法，用消币的决计菌上菌地为24h浓度为1Ccfu/mL的细南基浮液后：针刺株的上部缺叶或（假）部。让射法采用让时器每抹粒物英茎茎部注村11：T.左右的接种液，接种激度10”u/r.I.。所性讨照用大菌水代替按和液按种后的值五放在8～36温度下，先在10G相对促保湿215-46，然后转移到80左干的非对湿度下.每天在700C1x--10000x下光脏培养161.旁室培荐8h，接钟d后开始观症状-接种d不表现立状的视为不发病.植表现出著满，在假>茎套部横划面出现格交且有酋浓笠的视为能猫。
E鉴定特征
E. 1 症状转点
维管束病害，病株茎基的横切而可见组妇变密、挤历部有行白色菌脏落白.?谢原萄的培获特征
在T心培素基上产生白色,粘质，完滑的苗落：齿等题色不为课红名，6.3致病性特行
寄心专化性适，为去香燕，不为出马分害，客诺，站利要等非获属植物7结果别定
凡症状，培获特征及改府性特征均与第6查所注内率相哟合的·整定为香蒸组菌性枯垂病3样品和茵种保存
抽性样品（包括偿染和发病的枯株或指织)指照后均应制成部办于标本，定湿实低温于操条件下2
要善保存。
SN/T13902004
新鲜菌种在TTC谱养基上(S=℃--37℃下)培养24h石用计刮取细董，人裂有次菌水的消璃管中，封口后室温题低弱之心下保存苗钟的致肉力数年不会丧失），菌种保存时间至少一年，对敬安弃的齿卡底做灭活处理，
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附录A
（奋料性附录）
枯苗小种,寄主与生物型的关系
逆今为儿，丙站壶其报道：5个小种利5个生物型（关弱见表A.1)，香照枯类病的四小种2半将型1，
表在.！南枯酋不同生小种奇主与生物型之而的关系小种编号
清、恒草、白苗料精的bzxZ.net
三当许作热，大然，竭民然
马铃善、等布
主是中安，要的，了
附录R
（盗料性阴录）
香然细苗性括茎病蓝的分布家和地区生要分在东两亚、中南大洪义阳勒比海地区，牛物安作号
芊律离，印度成西业，印度美国夏成央、翠西开，留尼壮、格林纳达，危地马拉、伯重兹、萨尔瓦多、洪都控斯，开斯达黎动，巴卒马、特立尼达、多巴近、好伦比亚、委内瑞拉、主亚彝、苏里南、秘鲁和凸西。最C
（资抖性附示）
TT培美茶的配制
蛋白脑:0/L,酪所水解物1 g/L,面谢5:1.脂15g/L,加蒸缩水定客至1L.PH调至?.0在121℃灭函5ir11%过选灭策的>,3，-氧化三革基四英唑TC)至55℃旁荠十使其终浓度送到0.005%。
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